Long non-coding RNA GATA6-AS1 is mediated by N6-methyladenosine methylation and inhibits the proliferation and metastasis of gastric cancer

BACKGROUND Through experimental research on the biological function of GATA6-AS1,it was confirmed that GATA6-AS1 can inhibit the proliferation,invasion,and migration of gastric cancer cells,suggesting that GATA6-AS1 plays a role as an anti-oncogene in the occurrence and development of gastric cancer.Further experi-ments confirmed that the overexpression of fat mass and obesity-associated protein(FTO)inhibited the expression of GATA6-AS1,thereby promoting the occurrence and development of gastric cancer.AIM To investigate the effects of GATA6-AS1 on the proliferation,invasion and migration of gastric cancer cells and its mechanism of action.METHODS We used bioinformatics methods to analyze the Cancer Genome Atlas(https://portal.gdc.cancer.gov/.The Cancer Genome Atlas)and download expression data for GATA6-AS1 in gastric cancer tissue and normal tissue.We also constructed a GATA6-AS1 lentivirus overexpression vector which was transfected into gastric cancer cells to investigate its effects on proliferation,migration and invasion,and thereby clarify the expression of GATA6-AS1 in gastric cancer and its biological role in the genesis and development of gastric cancer.Next,we used a database(http://starbase.sysu.edu.cn/starbase2/)to analysis GATA6-AS1 whether by m6A methylation modify regulation and predict the methyltransferases that may methylate GATA6-AS1.Furthermore,RNA immunoprecipitation experiments confirmed that GATA6-AS1 was able to bind to the m6A methylation modification enzyme.These data allowed us to clarify the ability of m6A methylase to influence the action of GATA6-AS1 and its role in the occurrence and development of gastric cancer.RESULTS Low expression levels of GATA6-AS1 were detected in gastric cancer.We also determined the effects of GATA6-AS1 overexpression on the biological function of gastric cancer cells.GATA6-AS1 had strong binding ability with the m6A demethylase FTO,which was expressed at high levels in gastric cancer and negatively correlated with the expression of GATA6-AS1.Following transfection with siRNA to knock down the expression of FTO,the expression levels of GATA6-AS1 were up-regulated.Finally,the proliferation,migration and invasion of gastric cancer cells were all inhibited following the knockdown of FTO expression.CONCLUSION During the occurrence and development of gastric cancer,the overexpression of FTO may inhibit the expression of GATA6-AS1,thus promoting the proliferation and metastasis of gastric cancer.

类风湿关节炎患者血清lncRNA GATA6-AS1和GATA6 mRNA水平与疾病活动度指标、免疫功能及疾病严重程度的关系

目的分析类风湿关节炎患者血清中长链非编码RNA GATA结合蛋白6反义RNA1(lncRNA GATA6-AS1)和GATA结合蛋白6(GATA6)信使RNA(mRNA)水平与疾病活动度指标、免疫功能及疾病严重程度的关系。方法选取2021年4月至2023年3月我院收治的74例类风湿关节炎缓解期患者作为缓解期组,81例类风湿关节炎活动期患者作为活动期组,另选取同期体检健康者80例为对照组。收集受试者一般资料和疾病活动度指标[类风湿因子(RF)、血细胞沉降率(ESR)、C反应蛋白(CRP)、抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体、肿瘤坏死因子(TNF)-α、28处关节疾病活动度(DAS28)评分];荧光定量PCR法检测血清中lncRNA GATA6-AS1和GATA6 mRNA水平;并检测受试者免疫功能指标[免疫球蛋白(Ig)A、IgM、IgG、CD3^(+)T、CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞,计算CD4^(+)/CD8^(+)比值]。分析类风湿关节炎患者血清lncRNA GATA6-AS1、GATA6 mRNA、疾病活动度指标、免疫功能指标的相关性,影响类风湿关节炎患者活动期发生的危险因素,血清lncRNA GATA6-AS1、GATA6 mRNA对类风湿关节炎患者活动期发生的预测价值。结果对照组、缓解期组、活动期组RF、ESR、CRP、抗CCP抗体、TNF-α、DAS28评分、血清lncRNA GATA6-AS1、GATA6 mRNA、IgA、IgM、IgG、外周血CD3^(+)T、CD4^(+)T、CD8^(+)T细胞比例、CD4^(+)/CD8^(+)比值水平依次升高(P<0.05);风湿关节炎患者血清lncRNA GATA6-AS1与GATA6 mRNA呈正相关(P<0.05);血清lncRNA GATA6-AS1和GATA6 mRNA水平均与RF、ESR、CRP、抗CCP抗体、TNF-α、DAS28评分、IgA、IgM、IgG、CD3^(+)T细胞、CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞和CD4^(+)/CD8^(+)比值呈正相关(P<0.05);RF、ESR、CRP、抗CCP抗体、TNF-α、DAS28评分、lncRNA GATA6-AS1、GATA6 mRNA均是影响类风湿关节炎患者活动期发生的独立危险因素(P<0.05);血清lncRNA GATA6-AS1、GATA6 mRNA、二者联合预测类风湿关节炎患者活动期发生的曲线下面积(AUC)分别为0.843、0.861、0.928;二者联合预测的AUC高于血清lncRNA GATA6-AS1、GATA6 mRNA水平各自单独预测的AUC(P<0.05)。结论类风湿关节炎患者血清中lncRNA GATA6-AS1和GATA6 mRNA呈现高水平,且活动期患者二者水平更高,二者与疾病活动度指标、免疫功能以及疾病严重程度密切相关,可以很好地预测类风湿关节炎患者活动期的发生。

血清GATA6和SMAD3表达水平对孕中期胎儿心血管畸形的诊断价值

目的探究孕中期孕妇血清GATA结合6(GATA6)、SMAD同源物3(SMAD3)表达水平对胎儿心血管畸形的诊断价值。方法选取2017年6月至2023年6月北部战区总医院收治的有高危胎儿心血管畸形风险的孕中期孕妇203例作为研究对象,根据随访结果,45例孕妇胎儿确诊为心血管畸形(疾病组),158例孕妇胎儿心脏发育正常(对照组)。采用荧光定量PCR法和酶联免疫吸附(ELISA)法分别检测孕中期孕妇血清GATA6 mRNA、SMAD3表达水平。受试者工作特征(ROC)曲线分析孕中期孕妇血清GATA6 mRNA、SMAD3对胎儿心血管畸形的诊断价值。结果疾病组孕妇血清GATA6 mRNA、SMAD3表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(t值分别为4.210、7.185,P<0.05);孕中期孕妇血清GATA6 mRNA、SMAD3二者联合诊断胎儿心血管畸形的曲线下面积(AUC)为0.95,优于各自单独诊断(Z值分别为5.41、5.23,P<0.05);联合诊断的灵敏度和特异度分别为97.78%、79.11%。结论胎儿心血管畸形的孕中期孕妇血清GATA6 mRNA、SMAD3表达水平均较低,二者联合检测对胎儿心血管畸形有较好的诊断价值。

一例GATA6基因变异引起儿童特殊类型糖尿病的临床特点及基因变异分析

一例男性患儿,2岁,2018年11月30日因“多饮、多食、多尿伴血糖升高两周余”就诊于上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心。患儿表现为匀称性矮小[身高81 cm(-2.2标准差),体重9.8 kg(-2.1标准差),体重指数14.94 kg/m^(2)(P_(10)~P_(15))],无特殊面容及躯体特征。实验室检查显示,其糖化血红蛋白为14%,空腹C肽为0.3 ng/mL,胰岛自身抗体阴性。口服葡萄糖耐量试验结果提示,空腹和负荷后血糖显著升高,但仍有部分胰岛功能留存(负荷后C肽较基线升高1.43倍)。基因测序提示患儿存在GATA6基因c.1366C>T(p.R456C)杂合变异,确诊为特殊类型糖尿病。该患儿既往有先天性心脏病,11月龄时先天性心脏病术后出现一过性高渗性高血糖状态。患儿确诊后采取胰岛素替代治疗,但不规则随访,最近随访距离确诊糖尿病约3.5年(患儿5岁11个月),患儿空腹血糖6.0~10.0 mmol/L,餐后2 h血糖多数17.0~20.0 mmol/L。

干扰FAM201A通过调控miR-146a-5p/GATA6影响直肠癌细胞生物学行为

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FAM201A对直肠癌细胞生物学行为的影响及其分子机制。方法选取23例直肠癌患者的癌组织及癌旁组织,用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测序列相似性201家族成员(FAM201)A、miR-146a-5p和人GATA结合蛋白(GATA)6 mRNA的表达水平;将直肠癌细胞SW837分为si-NC组、si-FAM201A组、miR-NC组、miR-146a-5p组、si-FAM201A+anti-miR-NC组、si-FAM201A+anti-miR-146a-5p组;克隆形成实验检测集落形成数;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹法检测GATA6蛋白的表达;双荧光素酶报告实验检测FAM201A与miR-146a-5p,miR-146a-5p与GATA6的靶向关系。结果直肠癌组织中FAM201A和GATA6 mRNA表达水平升高,miR-146a-5p表达水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰FAM201A或过表达miR-146a-5p,直肠癌细胞的集落形成数减少,细胞的凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05);经4 Gy射线照射后,集落形成数减少,凋亡率升高,且细胞存活分数降低(P<0.05)。抑制miR-146a-5p可逆转干扰FAM201A对直肠癌细胞集落形成及凋亡的影响。FAM201A靶向调控miR-146a-5p;miR-146a-5p靶向调控GATA6。结论干扰FAM201A通过调控miR-146a-5p/GATA6抑制直肠癌细胞集落形成,促进细胞凋亡,增强其放射敏感性。

结直肠癌组织中Lgr5、GATA6表达变化及临床意义

目的探讨结直肠癌(CRC)组织中富含亮氨酸重复单位的G蛋白耦联受体5(Lgr5)和转录调节因子GATA结合蛋白6(GATA6)的表达变化及临床意义。方法选取手术切除CRC组织41例为实验组,其配对的癌旁正常组织(距离癌组织边缘>5cm)作为对照组。采用免疫组化法检测组织中Lgr5、GATA6表达,分析两者与结直肠癌临床病理特征的关系,Spernman秩相关分析两者的相关性。结果CRC组织及癌旁正常组织中Lgr5蛋白高表达率分别为60.98%(25/41)、12.20%(5/41),比较差异有统计学意义(P<0.05);CRC组织及癌旁正常组织中GATA6蛋白高表达率分别为63.41%(26/41)、21.95%(9/41),比较差异有统计学意义(P<0.05)。Lgr5蛋白高表达率与CRC的TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和浸润深度无关(P均>0.05)。GATA6蛋白高表达率与CRC的浸润深度、淋巴结转移有关(P均<0.05),与患者性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度和肿瘤分期无关(P均>0.05)。Spernman秩相关分析结果显示,CRC组织中Lgr5、GATA6蛋白表达呈正相关(r=0.327,P<0.05)。结论CRC组织中Lgr5、GATA6呈高表达,二者可能协同促进CRC的发生发展。

先天性房间隔缺损相关GATA6基因新突变的识别

目的:识别先天性房间隔缺损(ASD)相关GATA6基因新突变。方法:收集110例先天性ASD患者和200名健康对照者的临床资料和血标本,使用DNA纯化试剂盒提取基因组DNA。通过聚合酶链反应扩增GATA6基因的编码外显子和其两侧的部分内含子,应用双脱氧核苷链末端合成终止法进行DNA测序。将所测序列与GenBank数据库中的GATA6基因序列进行比对,识别GATA6基因突变。分别借助在线程序MUSCLE和MutationTaster评估突变氨基酸的保守性和致病性。结果:在1例家族史阴性的先天性ASD患者发现了1种新的GATA6基因杂合错义突变,即p.Q363E突变,突变率约为0.91%。该突变不存在于200名健康对照者,多物种序列比对显示,被改变氨基酸在进化上高度保守,致病性预测表明这种变异为致病性突变。结论:发现ASD相关GATA6基因新突变,有助于揭示ASD新的分子机制。

FOXA2及GATA6在肺腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的探索叉头框架蛋白A2(FOXA2)、转录因子GATA6(GATA6)在不同类型肺腺癌中的表达,其在肺癌发生、发展中的作用。方法采用免疫组化方法检测32例癌旁组织、32例原位腺癌组织、68例浸润性腺癌组织中FOXA2、GATA6的表达,分析其与患者临床、病理特征间的关系。结果FOXA2在癌旁组织、原位腺癌、ⅠA-ⅡA期浸润腺癌和IIB-IIIB期浸润腺癌中的表达率分别为59.4%(19/32)、93.8%(30/32)、60%(24/40)和25%(7/28)。GATA6在癌旁组织、原位腺癌、ⅠA-ⅡA期浸润腺癌和ⅡB-ⅢB期浸润腺癌中的表达率分别为43.8%(14/32)、87.5%(28/32)、72.5%(29/40)和35.7%(10/28)。两者表达呈正相关(r=0.551,p<0.01)。FOXA2和GATA6在具有微乳头或实性结构的肺腺癌中表达率较低,分别为23.5%(8/34)和41.2%(14/34)。FOXA2的低表达与患者淋巴结转移、脉管癌栓、胸膜侵犯有关(p<0.05),GATA6的低表达与患者脉管癌栓、胸膜侵犯有关(p<0.05),二者的表达随肿瘤分期的增高而降低(p<0.05)。结论FOXA2、GATA6的低表达可能提示肺腺癌患者预后不良。两者联合检测比单独检测能够更好的评估肺腺癌患者预后,指导临床治疗。

GATA6和STAT4在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨GATA6和STAT4在乳腺癌中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学,检测79例乳腺癌组织及其对应癌旁组织中GATA6和STAT4蛋白表达情况,分析二者表达与临床病理特征的关系。采用Spearman等级相关分析GATA6和STAT4表达之间相关性,Kaplan-Meier评估GATA6和STAT4与患者生存期的关系,Cox回归模型分析影响患者预后因素。结果癌旁组织中GATA6和STAT4阳性表达率分别为15. 19%、10. 13%,乳腺癌组织中GATA6和STAT4阳性表达率分别为64. 56%、62. 03%。乳腺癌组织中GATA6和STAT4阳性表达率较均癌旁组织升高,差异显著(P <0. 05)。乳腺癌组织中GATA6和STAT4表达均与肿瘤分化程度、TNM分期以及淋巴结转移相关(P <0. 05),而与患者年龄、肿瘤大小、肿瘤病理分型无关(P> 0. 05)。相关性分析结果显示,GATA6和STAT4在乳腺癌中的表达呈显著正相关(γ=5. 613,P <0. 05)。GATA6和STAT4阳性表达患者5年存活率较对应阴性表达患者均降低,差异显著(P <0. 05)。GATA6、STAT4、TNM分期和淋巴结转移均是影响乳腺癌患者预后的独立因素。结论乳腺癌组织GATA6和STAT4表达异常,二者明显呈正相关,可能参与乳腺癌发生和发展过程,有望成为乳腺癌诊治和预后判断的新靶点。

GATA6和TPM1在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的检测转录因子GATA6和原肌球蛋白1(TPM1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况,探讨两者在NSCLC中的临床意义。方法选取在本院治疗的NSCLC患者60例,采用PCR技术检测NSCLC患者癌组织及对应癌旁组织中GATA6和TPM1基因表达情况,免疫组织化学法检测GATA6和TPM1蛋白表达,并分析GATA6和TPM1表达水平与各临床病理参数的关系。Cox回归模型分析GATA6和TPM1表达与NSCLC患者预后影响。结果 60例NSCLC患者癌组织中GATA6基因表达水平及阳性表达率均明显高于癌旁组织,而TPM1基因表达水平及阳性表达率均明显低于癌旁组织(P <0.05)。GATA6和TPM1蛋白表达情况与患者年龄、分化等级、肿瘤分期、TNM分期均无关系(P> 0.05);GATA6蛋白表达情况与淋巴结是否出现转移密切相关(P <0.05),TPM1的蛋白表达情况与患者病理分类密切相关(P <0.05)。GATA6和TPM1以及是否出现淋巴结转移是影响NSCLC患者预后的主要危险因素(P <0.05)。结论 GATA6和TPM1在NSCLC组织中呈异常表达,且是影响NSCLC预后的危险因素,两者均在NSCLC发生发展及预后评估中具有重要的意义,可为靶向治疗提供参考依据。

GATA6在胰岛素瘤中的表达及与胰岛素瘤细胞增殖和凋亡的关系

目的：探究锌指转录因子G ATA 6在胰岛素瘤中的表达及与胰岛素瘤细胞增殖和凋亡的关系。方法收集2009年1月至2014年9月于上海交通大学附属第六人民医院确诊的3例胰岛素瘤患者的瘤体及其相应瘤旁组织，应用蛋白印迹法（Western blotting）检测GATA6在胰岛素瘤瘤体及瘤旁的表达差异。另外收集正常胰腺组织标本2例，免疫荧光法观察GATA6在胰岛素瘤组织及正常胰腺组织中的表达及定位。培养小鼠胰岛素瘤细胞系MIN6细胞，小干扰RNA（siRNA）干扰GATA6表达后，用流式细胞仪观察细胞凋亡及细胞周期的变化。结果胰岛素瘤瘤体组织GATA6表达水平较瘤旁组织异常升高（P＜0.05）；免疫荧光法显示胰岛素瘤正常胰岛结构丧失，GATA6主要位于胰岛素瘤细胞的细胞核中，在胰岛素瘤中大量表达，在正常胰岛β细胞中少量表达。沉默G ATA 6表达后胰岛素瘤细胞凋亡显著增加（P＜0.05），且细胞增殖受抑制（P＜0.05）。结论 GATA6在胰岛素瘤中异常高表达，与胰岛素瘤细胞增殖凋亡关系密切，提示G ATA 6可能在胰岛素瘤的发病机制中起重要的作用。

GATA6 siRNA对肝癌HCC-9204细胞自噬和周期的影响及机制研究

目的:探讨锌指蛋白GATA6(GATA6)小分子干扰RNA(siRNA)对肝癌HCC-9204细胞自噬和周期的影响及机制。方法:肝癌HCC-9204细胞中转染GATA6 siRNA、siRNA control,定量即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)方法检测GATA6 mRNA表达;Western blot方法检测GATA6、卷曲螺旋状Myosin样Bcl-2相互作用蛋白(beclin1)、自噬相关基因3(ATG3)、磷酸化信号转导与转录因子3(p-STAT3)蛋白表达;流式细胞术检测细胞周期。STAT3信号激活剂处理转染GATA6 siRNA后的肝癌HCC-9204细胞,用上述方法检测细胞周期和beclin1、ATG3、p-STAT3蛋白表达。结果:与转染siRNA control后的肝癌HCC-9204细胞比较,转染GATA6 siRNA可以降低细胞中GATA6 mRNA和蛋白表达量,提高细胞G0/G1期比例,减少细胞中beclin1、ATG3、p-STAT3蛋白表达。STAT3信号激活剂可以降低转染GATA6 siRNA后的肝癌HCC-9204细胞G0/G1期比例,提高细胞中beclin1、ATG3、p-STAT3蛋白表达水平。结论:GATA6 siRNA抑制肝癌HCC-9204细胞自噬并阻滞细胞周期,作用机制与降低STAT3信号通路激活水平有关。

敲降Gata6基因雄性小鼠模型睾丸功能维持过程中的调控机制

背景:GATA家族是一类含有两个保守锌指结构的转录调节因子,在人和脊椎动物中广泛表达,同时该家族参与调节组织发育、分化和细胞增殖过程。Gata6属于GATA家族中的一员,其在哺乳动物的心脏、性腺、脾脏、肝、性腺等器官发挥重要功能。目的:分析Gata6基因在小鼠睾丸中的作用机制。方法:以小鼠为模型,通过CRISPR/Cas9技术在雄性小鼠体内敲降Gata6基因,并以正常小鼠做对照,组织学观察睾丸形态学变化,Ellisa法测定雄激素相关合成酶,实时定量PCR仪检测相关基因。结果与结论:(1)利用CRISPR/Cas9技术成功在小鼠体内敲降Gata6基因;(2)与对照组相比,2月龄敲降组小鼠睾丸发育迟缓,睾丸及相关生殖器明显变小,精原细胞和精子生成减少,睾丸中雄性信号通路相关基因表达量降低,雄激素水平显著降低(P<0.05);(3)结果说明,Gata6在哺乳动物睾丸发育过程中发挥重要作用。

葫芦素D通过下调GATA6表达抑制SGC-7901胃癌细胞增殖迁移的作用机制研究

目的:探讨葫芦素D通过下调GATA转录因子6(GATA6)表达抑制SGC-7901胃癌细胞增殖、迁移的作用机制。方法:体外培养SGC-7901细胞,用MTT法检测葫芦素D对SGC-7901细胞抑制率并确定葫芦素D的干预剂量,将细胞分为对照组、顺铂组、葫芦素D低、中、高剂量组。对照组不进行处理,顺铂组给予终浓度为10.0μmoL/L的顺铂,葫芦素D低、中、高剂量组分别给予终浓度为2.0、4.0、8.0μmoL/L的葫芦素D,继续培养48h后进行检测SGC-7901细胞迁移能力、SGC-7901细胞中miRNA-143和GATA6 mRNA表达水平及细胞凋亡和细胞周期情况测定。结果:随着葫芦素D剂量增加,SGC-7901细胞抑制率增加(P<0.05)。在葫芦素剂量为8.0μmoL/L时,抑制率为53.07%,故选8.0μmoL/L作为最高干预剂量,并设2.0μmoL/L和4.0μmoL/L两个剂量。与对照组比较,顺铂组SGC-7901细胞迁移能力、GATA6 mRNA相对表达量和G0/G1期细胞比例降低,miRNA-143 mRNA的相对表达量、细胞凋亡率和S期细胞比例增加(P<0.05);给予葫芦素D处理后,SGC-7901细胞迁移能力、GATA6 mRNA相对表达量和G0/G1期细胞比例降低,miRNA-143 mRNA的相对表达量、细胞凋亡率和S期细胞比例增加,且呈剂量依赖性(P<0.05),但效果不如顺铂组。结论:葫芦素D能抑制SGC-7901胃癌细胞增殖和迁移,具有一定的抗癌活性,其机制可能与葫芦素D通过下调GATA6表达有关。

GATA2/GATA6调控胃癌自噬和凋亡的机制

目的探究GATA2/GATA6调控胃癌自噬和凋亡的机制。方法以人胃癌SGC-7901细胞为研究对象,建立干扰RNA转染模型,通过流式细胞术检测细胞周期改变,Annexin-V-FITC/PI双染检测细胞凋亡,倒置相差显微镜、透射电镜观察细胞形态,并应用MDC染色对细胞自噬进行测定。结果GATA2与GATA6表达量与肿瘤直径、淋巴结转移呈正相关,肿瘤直径小于2cm的组织中GATA2与GATA6表达水平显著低于肿瘤直径大于2cm的组织(P<0.05)。RT-PCR以及Western-blot实验结果表明,胃癌细胞株GATA2与GATA6的mRNA与蛋白质的表达水平均高于胃黏膜细胞。与人胃黏膜细胞GES1相比,胃癌细胞株中GATA2与GATA6表达水平均显著上调,表明GATA2与GATA6在胃癌中具有较高表达水平。经流式细胞检测发现,对GATA2/GATA6干扰后,胃癌细胞的凋亡水平显著增加(P<0.05);CCK-8增殖实验表明GATA2/GATA6敲除后胃癌细胞的增殖能力显著下降(P<0.05)。对自噬相关蛋白的检测发现,GATA2/GATA6干扰后胃癌细胞自噬水平显著降低(P<0.05),而透射电镜发现,GATA2/GATA6水平降低后,胃癌细胞中自噬小体随之减少。结论干扰GATA2/GATA6表达可以降低胃癌细胞自噬水平,促进细胞凋亡,从而影响胃癌细胞的增殖能力。

GATA6、ROR2和STAT3在膀胱移行细胞癌的表达及其意义

目的:探讨核转录因子GATA6、发育调节激酶ROR2和信号转导因子STAT3在膀胱移行细胞癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测72例膀胱移行细胞癌(Bladder transitional cell carcinoma,BTCC)组织中GATA6、ROR2和STAT3的表达,并将结果与病理分级、临床分期、肿瘤复发等临床病理资料进行统计学分析。结果:GATA6、ROR2和STAT3在BTCC的表达分别为:22.2%、61.1%、79.2%。不同病理分级和临床分期组间GATA6的表达差异无统计学意义(P>0.05),但复发组与未复发组间其表达差异有统计学意义(P<0.05);不同病理分级、临床分期,复发组与未复发组间ROR2的表达差异有统计学意义(P<0.05);不同病理分级组间STAT3表达差异有统计学意义(P<0.05),不同临床分期、复发与未复发组间差异无统计学意义(P>0.05)。(2)ROR2、STAT3在BTCC中的表达具有统计学相关性(rs=0.443,P<0.05);GATA6在BTCC中的表达与ROR2、STAT3无统计学相关。结论:STAT3、ROR2和GATA6可能都参与了BTCC的进展;ROR2与STAT3可能存在共同的信号通路;检测GATA6、ROR2和STAT3可能对判断BTCC的进展和预后有一定价值。

转录调节因子GATA6在肿瘤中的研究进展

GATA6属于GATA家族。GATA6在不同的肿瘤类型组织中发挥不同的生物学作用,GATA6在胆管癌,乳腺癌等组织中作为促癌基因,而在卵巢癌,胰腺癌等组织中GATA6作为肿瘤的抑癌基因。本综述对GATA6和其家族成员特点,及其与相关肿瘤的关系进行重点阐述。

慢病毒介导的GATA6基因沉默对肝癌Huh-7细胞凋亡的影响

目的:研究GATA6基因沉默对肝癌Huh-7细胞凋亡的影响,同时探讨可能的作用机制。方法:构建靶向GATA6基因的慢病毒干扰载体,用流式细胞术确定转染效率,用RT-PCR和Western blotting法检测其对人类肝细胞癌细胞株Huh-7的干扰效果,流式细胞术检测细胞凋亡比例,Western blotting法检测各转染组Huh-7细胞NF-κB及Bcl-2蛋白表达。结果:靶向GATA6基因的慢病毒干扰载体感染肝癌Huh-7细胞后,转染效率为57.4%。GATA6在mRNA和蛋白水平的表达明显下降。GATA6沉默的肝癌Huh-7细胞凋亡比例增加(P<0.05),NF-κB和Bcl-2蛋白水平表达降低。结论:利用慢病毒载体干扰技术沉默GATA6基因的表达可以明显促进Huh-7细胞凋亡,其机制可能通过NF-κB信号通路调节凋亡相关蛋白的表达,进而影响细胞的凋亡。靶向GATA6的RNA干扰技术在肝癌的基因治疗中具有一定的研究价值。

特发性扩张型心肌病相关GATA6基因新突变的识别

目的:识别特发性扩张型心肌病(DCM)相关GATA6基因新突变。方法:入选132例特发性DCM患者和220名健康对照者,收集其临床资料和外周静脉血,使用DNA纯化试剂盒抽提基因组DNA,采用聚合酶链反应试剂扩增GATA6基因的整个编码区,应用循环测序试剂盒对扩增的GATA6基因片段进行测序,将所测序列与Nucleotide数据库中的GATA6基因序列进行对比分析以识别GATA6基因突变。应用MUSCLE和MutationTaste在线系统评估突变氨基酸进化上的保守性和突变的致病性。结果:通过序列分析发现1例散发性DCM患者的GATA6基因新变异c.1165G>T,相当于p.E389X突变,在220名健康对照者中没有检测出该无义突变。跨物种GATA6蛋白序列比对分析表明,被改变的氨基酸在物种进化上完全保守,致病性预测显示该GATA6基因突变具有致病性。结论:发现散发性DCM相关GATA6基因新突变,扩大了DCM相关GATA6基因突变谱。

汉族散发法洛四联症患儿GATA6、TBX20基因的表达研究

目的:通过研究中国汉族法洛四联症(tetralogy of Fallot,TOF)患儿心肌中GATA6、TBX20基因的表达变化,初步探讨GATA6、TBX20基因与汉族TOF分子发病机制之间的关系。方法:实验组选取中国汉族TOF患儿15例,年龄6.5个月～8岁,平均1.9岁,术中常规切除并留取右心室流出道肥厚心肌;对照组选取汉族室间隔缺损患儿15例,年龄4.5个月～5岁,平均2.2岁。术中留取患儿右心房壁少量心肌组织。提取心肌组织RNA,应用实时荧光聚合酶链反应检测两组心肌中的GATA6、TBX20基因mRNA表达;应用免疫组化染色技术,检测两组心肌中的GATA6、TBX20蛋白的表达并进行统计学比较分析。结果:TOF患者心肌中GATA6、TBX20基因mRNA和蛋白表达水平均较对照组显著降低,差异有统计学意义;同时,TOF患儿心肌TBX20mRNA水平与患儿肺动脉指数呈正相关(r=0.6782,P<0.05)。结论:人类心肌中存在GATA6、TBX20mRNA和蛋白的表达;在中国汉族人群中,TOF的发生可能与心肌组织中GATA6、TBX20基因表达下调有关。