UPLC-MS/MS法同时测定透骨香中6种成分的含量

目的建立UPLC-MS/MS法同时测定透骨香中原儿茶酸、表儿茶素、绿原酸、槲皮苷、白珠树苷、滇白珠苷A的含量。方法分析采用Waters BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相水(含0.1%甲酸)-乙腈(含0.1%甲酸),梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;多反应监测模式。采用层次聚类分析(HCA)、主成分分析(PCA)筛选影响药材质量的重要成分。结果6种成分在各自范围内线性关系良好(r≥0.9982),平均加样回收率98.76%~101.88%,RSD 1.0%~2.5%。透骨香根、地上部分所含成分有较大差异,白珠树苷、表儿茶素、原儿茶酸是质量标志成分。结论该方法准确、高效,可用于透骨香的质量控制。

联用纳米技术与促渗剂改善滇白珠提取物的透皮行为

为探究纳米制剂技术和促渗剂对滇白珠提取物体外透皮性能的影响,分别采用介质研磨法和薄膜分散法,将提取物制备成纳米混悬液和纳米脂质体,测定了其中总黄酮和水杨酸类成分的载药量与包封率.随后,通过Franz扩散池法,进一步评估这2种制剂在小鼠皮肤上的累积渗透率和皮内滞留量.结果发现,24 h内,脂质体水杨酸累积渗透量是纳米混悬液的1.34倍;皮内滞留量为纳米混悬液的3.78倍;不同促渗剂对累积渗透量的影响按照氮酮≈薄荷醇>丙二醇>无促渗剂的顺序递减,但对皮内滞留量的影响基本可忽略.水杨酸类成分的渗透和滞留均显著高于总黄酮.因此,纳米制剂技术、促渗剂及活性成分的性质均对体外透皮行为产生不同程度的影响,采取综合策略可提高中药制剂的经皮吸收性能.

滇白珠及其同属药用植物研究进展

综述民族药滇白珠及同属药用植物的资源、化学、药理、临床、产品开发等方面的研究。国内外对同属 15种药用植物 ,特别是平铺白珠树和芳香白珠进行过研究。今后应着重在治疗风湿性关节炎方面进行药理和临床研究 。

民族药滇白珠资源研究

目的 :系统调查滇白珠的民间用法、资源分布规律、生长环境和生物学特性 ,为客观评价和合理开发民族药滇白珠奠定基础。方法 :采取查阅文献和标本与实地考察和专家咨询相结合的方法。结果和结论 :滇白珠广布江南各省 ,云南是集中分布区 ,而昆明、楚雄和大理是主产区 ,主产地气候温暖潮湿 ,滇白珠在其生长环境中不是优势种 ,有时与芳香白珠等 4种同属植物混生。滇白珠生于海拔 40 0～ 3 5 0 0m的山地 ,适应不同光照条件 ,喜光 ,多数生于向阳陡坡 ,少数生于密林下。主要以根茎进行无性繁殖。民间主要用于治疗风湿性关节炎 ,也用于眩晕、闭经、风寒感冒、咳嗽、哮喘、劳伤吐血、湿疹、水臌、跌打损伤、经闭、阿米巴痢疾、急慢性前列腺炎等疾病。今后应着重在治疗风湿性关节炎和止痛方面进行药理和临床研究 ,为开发成中药新药提供依据。

不同来源滇白珠中木脂素苷的含量测定

目的 :测定滇白珠中木脂素苷的含量 ,探讨评价滇白珠质量的方法。方法 :高效液相色谱法。色谱柱为KromasilC18(0 .4cm× 2 5cm) ,流动相为甲醇 乙腈 水 (30∶5∶6 5 ) ,波长 2 2 0nm ,外标法。结果 :进样量与峰面积线性关系良好 (D1,D2 ,D4 分别为r1=0 .9997,r2 =0 .9999和r4 =0 .9999)。D1平均回收率为 98.9% ,RSD 2 .6 %。不同产地药材木脂素苷 (LD)含量不同 ,贵阳、广西金秀县和昆明LD平均测定值分别是 :2 0 8.8,15 8.2 ,15 4.8mg·(10 0 g) -1。小范围采集样品LD含量基本稳定 ,其变化幅度明显小于不同分布地区的差异。嫩茎比枯老茎LD总含量高 1倍 ,采收时留嫩去老方可保证疗效。结论 :此方法简便、可靠 。

滇白珠地上部分化学成分研究

目的 :研究滇白珠地上部分的化学成分。方法 :质谱、核磁等鉴定结构。结果 :从 95 %乙醇提取物的氯仿淬取相中获得 4个化合物 ,正三十二烷酸及同系物 (1) ,熊果酸 (2 ) ,香草酸 (3)和槲皮苷 (4 )。结论 :化合物 1,4为首次从该植物中得到 ,化合物 2和

产地和季节对滇白珠木脂素苷含量的影响

目的 研究产地和季节对滇白珠木脂素苷 (L G)含量的影响 ,为开发提供依据。方法 高效液相色谱法。色谱柱为 Kromasil C1 8(0 .4cm× 2 5 cm) ,流动相为甲醇 -乙腈 -水 (3 0∶ 5∶ 65 ) ,波长 2 2 0 nm,外标法。结果 L G含量在滇白珠内分布规律是 :根 >茎 >叶 ,只有楚雄林下样品茎高于根。采自海南、广东、云南、贵州、重庆等省市的 9个地点的样品中 ,根中 L G含量 (mg/g)最高的是海南 2 .15 ,其次是贵州 2 .0 0 ,云南楚雄和昆明样品仅 1.42和1.44。根中 LG含量在 9月 (果期 )以前仅 1.43 8mg/g,比 11月低 2 4.4%。结论 海南和贵阳样品 LG含量最高 ,但结合生物量考虑 ,选云南大理和广西金秀的资源更合理。不同季节滇白珠 LG含量变化规律是 :花期 (6～ 7月 )和果期 (8～ 9月 )根中含量较低 ,因此采根应避免花果期。而茎则花果期含量较高 ,故采茎应选花期。

民族药滇白珠的体外抗氧化活性研究

目的:研究滇白珠(G.leucocarpa var.yunnanensis)地上部分乙醇提取物的不同极性萃取部位和大孔树脂柱层析的不同浓度甲醇洗脱部位的抗氧化活性。方法:采用清除DPPH(2,2-二苯基苦味酰基苯肼基)和ABTS[2,2′-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐]自由基的方法对滇白珠乙醇提取物的不同极性萃取部位和大孔树脂柱层析的不同浓度甲醇洗脱部位进行清除自由基能力的综合评价。结果:乙酸乙酯部位的抗氧化能力最强,与阳性对照相近。100%甲醇流出部位的抗氧化能力能力最强,强于阳性对照。结论:滇白珠地上部分具有较好的体外抗氧化活性。

滇白珠叶油的化学成分

江西井冈山产的滇白珠Gaultheria leucocarpa Bl.var crenulata(KurZ.)T.Z.Hus.鲜叶经常压水蒸气蒸馏法得到精油 Dy(沉水油)和Gx(萃取油),应用气相色谱-质谱-计算机联用仪分别进行了定性定量分析。从精油Dy中鉴定出7个化学成分,占该精油含量的99.96％;从精油Gx中鉴定出38个化学成分,占该精油含量的99.75％。精油Dy和Gx都含主要化学成分水杨酸甲酯(Methyl Salicylate),前者为99.51％,后者95.93％,几乎为一纯品。同时该植物精油的总得油率最高可达3.22％。经评香、调香认为精油甜润、香气留长,适宜配成口香糖香精和牙膏香精。

透骨香药材HPLC指纹图谱研究

目的建立透骨香药材的HPLC指纹图谱,为科学评价药材质量提供可靠方法。方法采用Hypersil C18色谱柱;流动相:乙腈-0.1%醋酸梯度洗脱;体积流量:1.0 mL/min;柱温20℃;检测波长为220 nm;分析时间53 min。测定了不同产地以及同一产地不同采收时间和同一采收时间不同年份共17批透骨香药材。使用计算机辅助相似度评价软件进行数据处理。结果建立了透骨香药材HPLC-DAD色谱指纹图谱,标示出18个共有峰。相似度计算发现17批透骨香指纹图谱相似度均大于0.910。不同来源透骨香药材化学组成相似,其相对比例具有差异。结论建立的HPLC指纹图谱可用于透骨香的质量评价。

滇白珠提取物对胃肠功能以及止泻作用研究

目的:观察滇白珠提取物对胃肠运动功能、吸收功能影响以及止泻作用。方法:采用新斯的明造成小鼠胃排空和小肠推进亢进,乙酰胆碱造成大鼠离体回肠痉挛性收缩,利血平造成小鼠小肠吸收功能障碍,蓖麻油造成小鼠腹泻,观察滇白珠提取物对胃肠运动亢进模型动物胃肠运动,小肠吸收D-木糖水平以及腹泻次数的影响。结果:滇白珠提取物能够显著减少小鼠胃排空(增加胃内残留率)和小肠推进率;显著抑制大鼠离体回肠痉挛性收缩;显著提高小肠吸收D-木糖水平(增加尿液中D-木糖的排出量);显著减少小鼠腹泻次数。结论:滇白珠提取物具有显著抑制胃肠运动亢进,改善小肠吸收功能以及止泻作用。

超声-振荡辅助提取透骨香叶中槲皮素的工艺研究

目的:研究透骨香叶中槲皮素的最佳提取工艺。方法:以透骨香叶槲皮素得率为指标,用反相高效液相色谱法测定,通过单因素试验,再采用正交试验设计L9(34)优化实验条件,并且研究对比了超声-机械振荡辅助提取法与常规加热回流和超声辅助提取透骨香叶中槲皮素的得率。结果:确定了超声-机械振荡辅助提取透骨香叶中槲皮素的最佳工艺为以乙醇-6.5mol/L HCl(4∶1)混合液为提取剂,料液比1∶70(g/mL),在水浴温度为65℃下超声提取40min后,再室温振荡萃取30min。优化的超声-机械振荡提取透骨香叶中槲皮素提取率分别比常规加热回流和超声辅助提取法提高了47.1%和44.9%。结论:该方法可以简便、高效地从透骨香叶中提取槲皮素,为透骨香叶中槲皮素的有效开发和利用提供一定参考依据。

滇白珠水提物对慢性阻塞性肺疾病大鼠Nrf-2和HO-1的影响

目的研究滇白珠水提物对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠核因子NF-E2相关因子(Nrf-2)和血红素氧合酶(HO-1)的影响。方法选择烟熏加气管内滴注内毒素(LPS)法复制慢性阻塞性肺疾病模型,将清洁级雄性SD大鼠36只,随机分为三组:正常对照组、COPD组和滇白珠组,每组12只。造模成功后肺组织HE染色观察病理改变,采用ELISA法测定大鼠肺组织中HO-1的表达水平,采用Western blot方法检测肺组织中Nrf-2的表达。结果滇白珠组中HO-1表达较模型组明显升高,具有统计学意义(P<0.05),与正常对照组比较,模型组和滇白珠组中HO-1升高(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组Nrf2蛋白表达明显增加,具有统计学意义(P<0.05),滇白珠组Nrf2表达明显升高,差异均有统计学意义(P<0.01)。光学显微镜下可见滇白珠组大鼠肺部炎症较模型组有所减轻。结论滇白珠水提物能够诱导Nrf2的表达,升高HO-1,从而使慢性阻塞性肺疾病大鼠氧化应激抑制,对其具有一定的防治作用。

滇白珠醇提物预防大鼠胃溃疡的实验研究

目的:探讨滇白珠醇提物(DBZ)预防给药对大鼠幽门结扎型胃溃疡(A)及乙醇型胃溃疡(B)的抑制作用。方法:采用A模型,观察DBZ对大鼠胃溃疡发生率、溃疡指数以及胃液量、胃酸、胃蛋白酶的影响;采用B模型,观察DBZ对大鼠胃溃疡发生率、溃疡指数以及胃黏膜组织SOD、MDA、PGE2、NO含量的影响。结果:A模型为瘤胃部胃溃疡。模型组胃溃疡发生率高,溃疡指数大,病理检查显示溃疡部位胃组织严重缺损。与模型组比较,DBZ高剂量组大鼠胃溃疡发生率及溃疡指数显著减少,胃组织缺损程度明显减轻,胃液量、胃酸浓度和总酸排出量均显著降低;DBZ低剂量组大鼠胃溃疡指数显著减小,胃组织缺损程度明显减轻,胃酸浓度显著降低;DBZ高、低剂量组对胃蛋白酶活力均没有显著影响。B模型为腺胃部胃溃疡。模型组大鼠胃部出现明显淤血及溃疡。与模型组比较,DBZ高剂量组大鼠胃部没有淤血及溃疡,DBZ低剂量组淤血及溃疡程度明显减轻;DBZ高、低剂量组大鼠胃黏膜组织的SOD含量显著增加、MDA含量显著降低,而对PGE2、NO含量没有显著影响。结论:DBZ预防给药对大鼠A、B模型胃溃疡均具有显著抑制作用。其中对A模型抑制作用可能与减少胃酸分泌有关,对B模型抑制作用可能与升高胃黏膜SOD水平、同时降低MDA水平有关。

透骨香水煎液HPLC指纹图谱及化学模式识别研究

目的:建立透骨香水煎液的HPLC指纹图谱,并进行化学模式识别研究。方法:采用Kromasil^(Ⓡ)100-5 C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.15%三氟乙酸溶液,梯度洗脱;流速为0.8 mL/min;检测波长为280 nm;柱温为20℃;进样量为20μL。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004 A版)”计算相似度,SPSS 26.0软件进行聚类分析和主成分分析及正交偏最小二乘判别分析。结果:建立了透骨香水煎液HPLC指纹图谱,确定了19个共有峰,指认了5个成分,17批样品与对照图谱的相似度均≥0.945。聚类分析结果表明17批样品聚为3类,正交偏最小二乘判别分析发现7个成分是造成不同批次间质量差异的主要标志性成分。结论:该研究建立的HPLC指纹图谱可为透骨香质量评价提供参考。

滇白珠止泻活性部位的化学成分研究

目的研究滇白珠Gaultheria leucocarpa BI.var.yunnanensis(Franch.)T.Z.Hsu的化学成分。方法应用各种色谱技术对滇白珠进行分离纯化,用MS和NMR分析鉴定化合物结构。结果共分离得到11个化合物,分别鉴定为水杨酸(1)、槲皮素(2)、熊果酸(3)、香豆素(4)、龙胆酸(5)、槲皮苷(6)、对香豆酸(7)、芦丁(8)、对羟基苯乙酸(9)、对羟基苯乙酸甲酯(10)和胡萝卜苷(11)。结论化合物4~7、9和10为首次从该植物中分离得到。

滇白珠乙酸乙酯提取物对腹泻小鼠的止泻作用及其胃肠功能调节机制观察

目的观察滇白珠乙酸乙酯提取物(简称滇白珠提取物)对大肠及小肠性腹泻小鼠的止泻作用,并观察其可能的胃肠功能调节机制。方法采用番泻叶和蓖麻油诱导建立大肠及小肠性腹泻小鼠模型,分别按照体质量灌胃给予20、10、5 g/kg(按生药计算)的滇白珠提取物及6 mg/kg易蒙停、等体积溶媒(3.2%吐温-80溶液)进行预处理,记录小鼠的稀便率、稀便级及腹泻指数。取正常昆明小鼠及胃肠功能亢进小鼠(皮下注射甲硫酸新斯的明0.15 mg/kg),采用炭末推进实验观察20、10、5 g/kg滇白珠提取物及6 mg/kg易蒙停、等体积溶媒灌胃处理对其胃肠推进运动的影响,比较其胃内残留率、小肠推进率。取SPF级SD大鼠离体小肠进行张力试验,记录终浓度分别为44.78、22.39、11.19μg/mL的滇白珠提取物及硫酸阿托品、溶媒作用2.5、5.0 min的大鼠离体正常小肠张力抑制率,终浓度分别为89.11、44.56、22.28μg/mL的滇白珠提取物及硫酸阿托品、溶媒作用2.5、5.0 min的大鼠离体张力亢进小肠(加入15 mg/L氯化乙酰胆碱)张力抑制率。结果在大肠及小肠性腹泻小鼠中,20、10 g/kg滇白珠提取物及易蒙停作用后小鼠稀便率、稀便级及腹泻指数均较溶媒作用后降低,5 g/kg滇白珠提取物作用后小鼠腹泻指数均较溶媒作用后降低(P均<0.01)。与溶媒作用后比较,20、10 g/kg滇白珠提取物及易蒙停作用后正常小鼠小肠推进率均降低,胃肠功能亢进小鼠胃内残留率均升高、小肠推进率均降低(P均<0.05)。与溶媒作用后相同时间点比较,加入不同终浓度滇白珠提取物及硫酸阿托品作用2.5、5.0 min的大鼠离体正常小肠及张力亢进小肠张力均降低、张力抑制率均升高(P均<0.05)。结论滇白珠提取物对大肠及小肠性腹泻小鼠均具有明显的止泻作用,其机制可能与通过拮抗M胆碱能受体而增加胃内残留率、降低小肠推进速度、解除胃肠道平滑肌痉挛有关。

基于叶绿体基因证据的民族药滇白珠复合群系统发育关系

滇白珠是我国重要的民族药用植物,广泛分布于长江以南地区,是一个分类困难的复合群。为了探讨其种下分类关系,该文对滇白珠复合群(包括毛滇白珠、秃果白珠和滇白珠3个变种)进行网罗式采样,基本覆盖了该复合群在中国的分布范围,同时包括菲律宾和马来西亚的各1个居群,共计81个居群241个个体,通过联合两个变异位点适中的叶绿体片段rpl33-psa J和trn L-rpl32,构建基于最大似然法(Maximum Likelihood)和贝叶斯法(Bayesian Inference)的系统发育树,以及Neighbor-Net法构建系统发育网络。结果表明:滇白珠复合群内具有明显的遗传差异,这种差异性相比形态,与地域分布相关性更大。系统发育分析显示,滇白珠复合群分为3个支系。其中:一支包括中国台湾和菲律宾南达沃的居群,为变种秃果白珠,符合前人分类结果;一支包括分布于横断山脉区域的居群,由变种毛滇白珠和滇白珠组成;剩余一支包括分布于华东南区域的居群,同样由变种毛滇白珠和滇白珠组成。分子证据支持基于形态分类的秃果白珠作为变种,而不支持毛滇白珠作为变种的处理。这样的遗传分化式样可能是由地理隔离导致,这一结果为民族药滇白珠的种质资源评价和保护利用奠定了分类学框架。然而,变种滇白珠居群间的谱系发生关系却尚未得到很好地解决,特别是无法明晰华东南大部分居群间的遗传分化格局,需要进一步补充样本通过谱系地理学手段,并寻找分辨率更高的核基因分子标记进行更深入的研究。

滇白珠抗炎镇痛活性部位的化学成分研究

目的对滇白珠Gaultheria leucocarpa var.yunnanensis抗炎镇痛活性部位(ARF)的化学成分进行研究。方法利用MCI-Gel CHP、AB-8大孔吸附树脂、薄层色谱等方法进行分离和纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果从滇白珠30%乙醇提取物即ARF中分离得到16个化合物,其中水杨酸甲酯糖苷类化合物4个:水杨酸甲酯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、冬绿苷(2)、水杨酸甲酯-2-O-β-D-吡喃木糖基(1→2)[O-β-D-吡喃木糖基(1→6)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、水杨酸甲酯-2-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→2)[O-β-D-吡喃木糖基(1→6)]-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4);醇苷类化合物3个:乙基-O-β-D-吡喃木糖苷(5)、乙基-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、甲基-O-β-D-吡喃木糖基(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7);单萜苷类化合物2个:长寿花糖苷(8)、芍药苷(9);苯甲酸类化合物5个:香草酸(10)、2,5-二羟基苯甲酸(11)、3,4-二甲氧基肉桂酸(12)、阿魏酸(13)、绿原酸(14);其他成分2个:4-羟基-2,6-二甲氧基苯基-O-β-D-葡萄糖苷(15)和3-甲氧基-1H-吡咯(16)。结论化合物5~9、12、15、16是首次从该植物中分离得到,其中化合物7为首次从白珠树属植物中分离得到,化合物8、9、12、15是首次从杜鹃花科植物中分离得到。

滇白珠地上部分的化学成分研究

目的研究滇白珠(Gaultheria leucocarpa var.yunnanensis or var.crenulta)地上部分的化学成分。方法应用各种色谱技术进行分离纯化,用MS和NMR分析鉴定化合物结构。结果分离得到7个化合物,分别鉴定为①槲皮素-3-O-β-D葡萄糖醛酸苷、②山萘酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、③龙胆酸甲酯、④水杨酸甲酯、⑤白珠树苷、⑥滇白珠素A、⑦滇白珠素B。结论化合物1～3是首次从该植物中分离得到。