低氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞中Gax基因表达及细胞增殖的影响

目的探讨低氧对肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs)中生长终止特异性同源盒(growth arrest-spec ific homeobox,Gax)基因表达及细胞增殖的影响。方法以RT-PCR法、免疫细胞化学法和W estern blot法测定经低氧处理后的大鼠PASMCs中Gax mRNA和蛋白表达3。H-TdR掺入法观察低氧处理后PASMCs增殖情况。结果RT-PCR、免疫细胞化学和W estern blot检测证实低氧(2.5%O2)处理后的PASMCs中Gax mRNA和蛋白的表达逐渐降低;与常氧组比较,低氧组Gax mRNA和蛋白的表达显著下降3。H-TdR掺入法测定结果示PASMCs3H-TdR掺入量在低氧6 h开始增加,随着低氧时间延长,3H-TdR掺入量逐渐增加,至低氧24 h时3H-TdR掺入量最高。结论低氧可下调大鼠PASMCs中Gax mRNA和蛋白的表达并诱导PASMCs增殖,提示Gax基因在低氧性PASMCs增殖过程中可能起着重要作用。

一步法电化学沉积Cu(In1-x， Gax)Se2薄膜的特性

在CuCl2、InCl3、GaCl3及H2SeO3组成的酸性水溶液电沉积体系中,对Mo/玻璃衬底上一步法电沉积Cu(In1-x,Gax)Se2(简写为CIGS)薄膜进行了研究.为了稳定溶液的化学性质,在溶液中加入邻苯二甲酸氢钾和氨基磺酸作为pH缓冲剂,将溶液的pH值控制在约2.5,并提高薄膜中Ga的含量.通过大量实验优化了溶液组成及电沉积条件,得到接近化学计量比贫Cu的CIGS薄膜(当Cu与In+Ga的摩尔比为1时,称为符合化学计量比的CIGS薄膜;当其比值为0.8-1时,称为贫Cu或富In的CIGS薄膜)预置层,薄膜表面光亮、致密、无裂纹.利用循环伏安法初步研究了一步法电沉积CIGS薄膜的反应机理,在沉积过程中,Se4+离子先还原生成单质Se,再诱导Cu2+、Ga3+和In3+发生共沉积.电沉积CIGS薄膜预置层在固态硒源280℃蒸发的硒气氛中进行硒化再结晶,有效改善了薄膜的结晶结构,且成份基本不发生变化,但是表面会产生大量的裂纹.

GAX循环的α-h图热力学分析

本文分别对单级氨水吸收式制冷循环和GAX循环进行了计算机模拟,在热源温度TH为120℃、TM为25℃、TL为5℃的情况下,两个循环的制冷系数分别为0.589和0.776,GAX循环高出31.8%。(火用)效率分别为15.4%和27.4%,GAX循环高出77.9%。在α-h图上别对两个循环的热力学结构进行了比较分析,认为循环的改进取决于热机子循环的热力学完善程度,GAX循环与单级循环内部的热泵子循环的(火用)需求是相同的,只是由于GAX循环改善了热机子循环的过程耦合结构,减少了(火用)的消耗而获得了整个循环的增益。

Gax基因过表达对低氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖及周期的作用

目的:探讨生长终止特异性同源盒(growth arrest-specific homeobox,Gax)基因转染在低氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary arterial smooth muscle cells,PASMCs)中过表达及其对细胞增殖和周期的作用。方法:腺病毒介导Gax基因(adenovirus expressing Gax cDNA,Ad-Gax)转染体外培养的PASMCs。在常氧(21%O2)和低氧(2·5%O2)2、6、12、24和48h条件下,利用RT-PCR和免疫细胞化学法分别测定转染前后PASMCs中Gax mRNA和蛋白表达;用四唑盐(MTT)比色法和流式细胞术检测各组PASMCs增殖和周期。结果:RT-PCR和免疫细胞化学法证实Ad-Gax转染后PASMCs中Gax能稳定过表达;MTT比色试验结果显示,未转染组常氧和低氧2、6、12、24和48h时PASMCs吸光度值分别为0·38±0·02、0·44±0·11、0·48±0·05、0·59±0·07、0·67±0·03和0·75±0·18,低氧组比常氧组明显增加(P<0·05);而转染组各时相吸光度值分别为0·17±0·04、0·15±0·02、0·24±0·11、0·33±0·13、0·31±0·03和0·37±0·09,低氧组比未转染组同时相点组明显降低(P<0·05、0·01)。流式细胞仪检测结果表明,Ad-Gax转染对常氧条件下PASMCs的周期没有显著影响,但可使低氧处理后PASMCs的G0/G1比例较未转染组显著增高、S+G2/M比例显著降低(P<0·01);结论:Gax基因过表达能够抑制低氧性PASMCs的增殖。

gax基因对血管平滑肌细胞中p21基因表达的影响

目的:研究p21基因在gax基因抑制血管平滑肌细胞(VSMC)增殖中的作用。方法:以携带大鼠gax基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(AdCMV gax)常规转染VSMC后,应用免疫细胞化学染色检测gax和p21表达的变化;应用RT PCR检测p21mRNA表达的变化;应用3H标记的胸腺嘧啶核苷(3H TdR)掺入试验观察gax基因表达增强对VSMC增殖的影响。结果:①AdCMV gax转染前,血小板衍化生长因子BB(PDGF BB)下调gax蛋白的表达,AdCMV gax转染后,无论有无PDGF BB刺激,VSMC中gax蛋白的表达均比转染前显著增高。②AdCMV gax转染使VSMC的p21表达比未转染组显著增高。③AdCMV gax转染使VSMC的3H TdR掺入量均较未转染组显著降低。结论:gax基因抑制VSMC增殖的机制与其增强p21表达有关。

Gax基因转染对A549细胞增殖及原癌基因表达的影响

背景与目的在中国肺癌居各种恶性肿瘤之首位,寻求肺癌的基因疗法已成为人们努力的方向。本研究拟探讨生长终止特异性同源盒基因(growtharrest-specifichomeobox,Gax)对A549细胞系增殖及其原癌基因c-fos、c-junmRNA表达的影响。方法以腺病毒介导Gax基因(adenoviraltransductionoftheGaxgene,Ad-Gax)转染A549细胞,RT-PCR和免疫细胞化学法测定转染前后细胞中GaxmRNA和蛋白表达;RT-PCR测定转染前后细胞中c-fos、c-junmRNA表达变化;MTT法检测Gax基因转染对A549细胞生长的抑制作用,计算24、48、72h细胞抑制率。结果RT-PCR和免疫细胞化学证实Gax基因转染A549细胞后Gax能稳定表达,未转染组未发现Gax表达;RT-PCR证实转染组A549细胞中c-fos、c-junmRNA比未转染组显著降低(t=7.755,P<0.01;t=5.938,P<0.01);MTT法检测显示转染组A549细胞在24、48、72h的抑制率分别是(47.35±5.36)%、(54.96±1.78)%、(65.39±5.11)%,随时间逐渐升高与未转染组同时间比较有显著性差异(χ2=7.152、9.431、12.847,P<0.01)。结论Gax基因转染能抑制A549细胞的增殖,其分子机制可能与Gax下调c-fos、c-jun的表达有关。

腺病毒介导gax基因转染在培养的血管平滑肌细胞中的表达

目的 以腺病毒介导gax基因转染血管平滑肌细胞 (VSMC) ,增强VSMC中 gax基因的表达。方法 采用位置特异性重组方法构建携带大鼠 gax基因表达序列的复制缺陷型 5型腺病毒载体 (Ad CMV gax) ,经 2 93细胞扩增 ,纯化制备高滴度病毒转染液 ;以病毒转染液常规转染VSMC后 ,应用RT PCR、流式细胞仪和免疫细胞化学等方法分别检测VSMC中 gaxmRNA和蛋白质的表达。 结果 流式细胞仪检测和免疫细胞化学染色均显示AdCMV gax转染VSMC后 ,VSMC的Gax蛋白表达率明显增高 ,转染后 2 4小时即可达 80 %左右 ,高水平的表达可维持 5天以上 ;AdCMV gax转染前 ,PDGF BB对 gax基因转录和翻译水平的表达均有下调作用 ,AdCMV gax转染后 ,无论有无PDGF BB刺激 ,VSMC中 gax基因的表达均比转染前显著增高。 结论 腺病毒载体可有效地介导 gax基因转染VSMC ,并且表达为蛋白质。这有利于进一步研究

腺病毒介导gax基因转染对血管平滑肌细胞迁移的影响

目的以腺病毒介导gax基因转染血管平滑肌细胞(VSMC),探讨gax基因表达增强后VSMC迁移的变化。方法以携带大鼠gax基因表达序列的复制缺陷型5型腺病毒载体(AdCMV-gax)常规转染VSMC后,应用免疫细胞化学染色检测gax基因表达的变化,Boyden's小室观察gax基因表达增强对VSMC迁移的影响。结果①AdCMV-gax转染前,PDGF-BB下调Gax蛋白的表达,接近正常生理浓度的PDGF-BB(2ng/ml)即可使VSMC的Gax蛋白表达率由36·42%显著降低至22·83%(P<0·05),随着PDGF-BB浓度的升高,gax基因表达下降程度更加显著;AdCMV-gax转染后,无论有无PDGF-BB刺激,VSMC中gax基因的表达均比转染前显著增高。②AdCMV-gax转染使VSMC表达gax增强后,VSMC迁移数较未转染组显著减少。结论增强gax基因表达,可抑制由有丝分裂原刺激所引起的VSMC迁移。

Gax基因转染对低氧性PASMCs增殖及原癌基因表达的影响

目的:探讨生长终止特异性同源盒Gax基因转染对低氧性大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)中原癌基因c-fos、c-jun mRNA表达及细胞增殖的影响。方法:腺病毒介导Gax基因(Ad-Gax)转染PASMCs。在常氧(21%O2)和低氧(2.5%O2)12h条件下,利用RT-PCR和免疫细胞化学法分别测定转染组和未转染组PASMCs中Gax mRNA和蛋白表达,以及c-fos、c-jun mRNA表达变化;[3H]-TdR掺入法检测各组PASMCs增殖情况。结果:RT-PCR和免疫细胞化学法证实Gax基因转染后PASMCs中Gax能稳定过表达;转染组细胞c-fos、c-jun mRNA表达水平在常氧和低氧均低于未转染组细胞(P<0.05,P<0.01);未转染组低氧时[3H]-TdR掺入量比常氧时高(P<0.01);在常氧和低氧时转染组[3H]-TdR掺入量均低于未转染组(P<0.05,P<0.01)。结论:Gax基因过表达可能通过下调c-fos、c-jun基因的表达来抑制低氧性PASMCs的增殖。

Ad-Gax转染诱导人肺腺癌A549细胞凋亡及其机制

背景与目的细胞凋亡与肺癌的发生发展密切相关,诱导肺癌细胞凋亡是肺癌治疗的一大策略。本研究探讨生长终止特异性同源盒Gax(growth arrest-specific homeobox)基因转染对人肺腺癌A549细胞凋亡及凋亡相关基因蛋白表达的影响。方法腺病毒介导Gax基因(adenovirus expressing Gax cDNA,Ad-Gax)转染A549细胞。以透射电镜观察细胞凋亡形态;原位细胞凋亡检测法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)观察转染前后A549细胞凋亡变化;流式细胞术检测细胞凋亡率;免疫细胞化学法测定细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达。结果透射电镜观察到Ad-Gax转染后A549细胞凋亡现象明显增强。无Ad-Gax转染时,无或仅见极少量的TUNEL染色阳性细胞;Ad-Gax转染后,TUNEL染色阳性细胞显著增多,尤其在转染后24小时更明显。Ad-Gax转染后12h、24h和48h细胞凋亡率分别为12.57%、17.29%和15.03%,与未转染组(0.25%)比较有显著性差异(χ2值分别为7.357、11.126、9.943,P值均小于0.01)。未转染组、转染12h、24h和48h组Bcl-2蛋白平均积分光密度值(AOD)分别是2.02±0.07、1.79±0.02、1.25±0.51和1.21±0.24,转染组Bcl-2蛋白AOD随转染时间的延长逐渐降低,与未转染组相比呈显著性差异(t值分别为6.651、7.089、7.438,P值均小于0.01)。未转染组、转染12h、24h和48h组Bax蛋白AOD分别是3.12±0.42、4.49±0.61、4.24±0.37和3.95±0.43,转染组Bax蛋白AOD升高,与未转染组相比差异显著(t值分别为7.469、7.287、6.473,P值均小于0.01)。转染组A549细胞凋亡率与Bcl-2/Bax比值呈负相关关系(r=-0.49,P<0.01)。结论Ad-Gax转染可诱导A549细胞凋亡,其机制可能是通过下调Bcl-2蛋白和上调Bax蛋白的表达,尤其是通过降低Bcl-2/Bax比值实现的。

Gax基因对低氧性肺动脉内皮细胞增殖与ET-1、VEGF和eNOS蛋白表达的影响

目的观察Gax基因对低氧性肺动脉内皮细胞(PAEC)增殖及内皮素(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达的影响。方法取大鼠肺动脉,用酶消化法获取PAEC并进行原代培养;分4组:未转染常氧对照组(常氧组)、未转染低氧处理组(低氧组)、Ad-βGal转染再行低氧处理对照组(Ad-βGal+低氧组)、Ad-Gax转染再行低氧处理组(Ad-Gax+低氧组)。分别在常氧(21%O2)和低氧(2.5%O2)6 h后,采用3H-胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法和酶联免疫吸附测定(ELISA)检测PAECs增殖和培养上清液中ET-1、VEGF和eNOS蛋白水平。结果与常氧组比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组PAEC的3H-TdR掺入量均显著升高(P<0.01);与低氧组比较,Ad-Gax+低氧组PAEC的3H-TdR掺入量均明显降低(P<0.01)。与常氧组比较,低氧组和Ad-βGal+低氧组PAEC上清中的VEGF和ET-1水平均显著升高(P<0.01),而eNOS含量明显降低(P<0.01);与低氧组比较,Ad-Gax+低氧组PAEC上清中VEGF和ET-1水平均明显降低(P<0.01),而eNOS水平显著升高(P<0.01)。结论低氧诱导PAEC异常增殖加速,而此时增强Gax基因表达可抑制细胞异常增殖;低氧上调PAEC中VEGF和ET-1含量,下调eNOS含量,而增强Gax表达可以逆转这种现象。

腺病毒介导gax基因转染抑制血管平滑肌细胞增殖

目的 以腺病毒介导gax基因转染血管平滑肌细胞 (VSMC) ,探讨gax基因表达增强后VSMC增殖的变化。方法 以携带大鼠gax基因表达序列的复制缺陷型 5型腺病毒载体 (AdCMV gax)常规转染VSMC后 ,应用免疫细胞化学染色检测gax基因表达的变化 ;应用四唑盐 (MTT)比色试验、3H标记的胸腺嘧啶核苷 ( 3H TdR)掺入试验和流式细胞仪检测观察gax基因表达增强对VSMC增殖的影响。结果 ①AdCMV gax转染前 ,PDGF BB下调Gax蛋白的表达 ,接近正常生理浓度的PDGF BB( 2ng ml)即可使VSMC的Gax蛋白表达率由 3 6.42 %显著降低至 2 2 .83 %(P <0 .0 5 ) ,随着PDGF BB浓度的升高 ,gax基因表达下降程度更加显著 ;AdCMV gax转染后 ,无论有无PDGF BB刺激 ,VSMC中gax基因的表达均比转染前显著增高。②AdCMV gax转染使VSMC表达gax增强后 ,VSMC的MTT吸光度值和3H TdR掺入量均较未转染组显著降低 ,G0 G1期的VSMC比例较未转染组显著增高 (P <0 .0 1) ,G2 M期和S期细胞比例显著降低 (P <0 .0 1)。

以TFE/NMP为工质的GAX循环计算与分析

在简要介绍GAX循环的基础上 ,对以TFE/NMP为工质的GAX循环进行了热力计算 。

氨水吸收式制冷GAX循环中临界热源温度的理论分析

对氨水吸收式制冷GAX循环进行了理论分析,阐述了GAX循环存在临界热源温度的原因,编制了计算机模拟程序,分别对氨水吸收式制冷GAX循环与一般循环系统进行了理论计算与比较.得出了GAX循环性能与热源温度之间的变化关系:在蒸发温度为3℃、冷却水为32℃的条件下,GAX循环系统最低临界热源温度为110℃;在蒸发温度为3℃时,GAX循环系统最低临界热源温度值随冷却水温度的提高而升高;只有热源温度高于临界温度值时,GAX循环性能系数才能得到提高.所得结论为在实际氨水吸收式制冷系统中是否采用GAX循环提供了决策依据.

闪锌矿型GaX(X=P,As,Sb)电子结构和光学性质的第一性原理计算

采用基于密度泛函理论(DFT)框架下广义梯度近似平面波超软赝势法,计算了闪锌矿型GaX(X=P,As,Sb)的电子结构和光学性质。计算结果表明:GaP属于间接带隙半导体,GaAs和GaSb属于直接带隙半导体,禁带宽度分别为1.629 eV、0.612 eV和0.079 eV。经带隙校正后,计算得到闪锌矿型GaX(X=P,As,Sb)的复介电函数、复折射率、反射光谱和吸收光谱。随着X原子序数的增加,出现了明显的带边红移现象,为闪锌矿型GaX(X=P,As,Sb)的应用提供了理论依据。

高效吸收式热泵的GAX技术及市场展望

介绍了高效吸收式热泵近来出现的几种GAX回热循环技术，与传统的制冷方式进行了性能对比，并对此项技术在我国的市场前景进行了分析展望。

高效吸收式热泵GAX机组的研究进展

介绍了高效吸收式热泵GAX回热循环机组中应用的工质及冷凝器、吸收器和吸收—发生器等部件的研究状况，提出了今后的研究方向。

直燃型氨-水 GAX 吸收式热泵的计算机仿真及研制

介绍了利用计算机仿真、设计及优化技术研制直燃型氨—水ＧＡＸ（发生器—吸收器热交换）吸收式热泵的过程，并阐述了氨—水单效及ＧＡＸ吸收系统的原理、结构及运行工况。

GAX吸收制冷循环的理论分析

针对单效NH3-H2O吸收式制冷循环性能低的缺点,对高效的GAX吸收式制冷循环进行了理论分析,得出了在冷凝温度(蒸发温度)一定时,系统的性能变化情况和系统性能随热源温度的变化情况,分析了系统内部换热器在回收设备间的回热、减少外部吸热量、提高性能系数中的作用,为进一步改进GAX循环性能提供了理论基础。

缺氧诱导因子1α与Gax基因对自体静脉移植术后内膜过度增生的调控机制

自体静脉移植术后内膜过度增生是影响术后效果的重要原因,缺氧诱导因子1α(HIF-1α)与Gax基因可以抑制自体静脉移植术后内膜过度增生,可作为治疗移植静脉再狭窄的一个新手段,HIF-1α通过调控血管内皮生长因子的表达,对恢复血管内皮细胞的结构和功能起着重要的调节作用,而Gax基因通过影响细胞周期和诱导细胞凋亡两条途径来调节血管平滑肌细胞的增殖。