纳米颗粒Gd@C_(82)(OH)_(22)抑制哺乳动物细胞外排转运的研究

目的探讨纳米颗粒Gd@C82(OH)22体外对哺乳动物细胞外排转运的影响,研究该外排转运抑制作用与MRP1蛋白和ATP酶活性间的关系,为Gd@C82(OH)22应用于耐药肿瘤治疗提供初步实验依据。方法通过Calcein-AM(C-AM)摄入法,以仓鼠肾细胞BHK-21、转染表达多药耐药相关蛋白MRP1的BHK-21/MRP1细胞以及肿瘤细胞PC-3为模型测定Gd@C82(OH)22对细胞外排转运的整体影响;用比色法测定Gd@C82(OH)22对MRP1蛋白截短体及BHK-21/MRP1质膜微囊的ATP酶活性的影响。结果经Gd@C82(OH)22处理后,3种细胞的C-AM摄入量均上调,BHK-21与BHK-21/MRP1摄入量增加相似;用MRP1抑制剂MK571处理BHK-21/MRP1后,细胞C-AM摄入增长趋势不变;Gd@C82(OH)22对MRP1蛋白截短体及质膜微囊的ATP酶活性没有抑制作用。结论表明Gd@C82(OH)22可抑制哺乳动物细胞的外排转运,其抑制作用并不是通过抑制MRP1蛋白或ATP酶活性来实现的。

同步辐射CD分析Gd@C_(82)(OH)_(22)纳米颗粒对λ-DNA结构稳定性的影响

本文利用同步辐射真空紫外圆二色光谱(SRCD)研究λ噬菌体DNA(λ-DNA)加入内包金属富勒烯Gd@C82(OH)22纳米颗粒后的二级结构变化,推测了纳米颗粒与λ-DNA相互作用机理。研究发现,在SRCD 230–255 nm波长范围内,λ-DNA经Gd@C82(OH)22纳米颗粒处理后,在245 nm处的负峰减弱并伴随DNA熔解温度(Tm值)降低。说明λ-DNA及λ-DNA酶切片段受Gd@C82(OH)22纳米颗粒影响,导致二级结构稳定性和热稳定性下降。通过分析SRCD谱在180–200 nm处的信息,发现Gd@C82(OH)22纳米颗粒引起了λ-DNA超螺旋结构的解旋。