重组人β-防御素3对铜绿假单胞菌生物膜结构影响的初步研究

目的研究重组人β-防御素3(rhBD-3)对铜绿假单胞菌(PA)形成生物膜的体外抑制作用。方法平板培养法培养PA,得到早期和成熟期生物膜;琼脂糖弥散抗菌法测定最低抑菌浓度(M IC);扫描电镜(SEM)观察载体表面BF形态;连续稀释法行活菌计数。结果 rhBD-3对PA的M IC值是64μg/m l。rhBD-3作用后8、16、24 h,膜片载体表面PA活菌黏附量减少,且随着rhBD-3浓度的增高,活菌群数量进行性减少;SEM观察见rhBD-3组少量散在的游离细菌,有少量小斑片状多糖复合物,而空白对照组可见大量分布均匀的微菌落和游离细菌及多糖复合物交联。结论 rhBD-3可以抑制PA的BF形成,并对早期和成熟期BF具有破坏作用。

琼脂糖凝胶电泳法测定糖化血红蛋白及其临床应用

目的 采用琼脂糖凝胶电泳的方法测定糖化血红蛋白 (Hb Alc) ,了解 Hb Alc与空腹血糖的关系。方法 取正常人及糖尿病人 EDTA- K2抗凝全血 2 32例 ,制成血红蛋白溶液 ,使用法国 sebia公司 sebia HYDRASYS电泳仪及光密度计扫描仪 ,用琼脂糖凝胶进行电泳分离和光密度计扫描定量测定 Hb Alc;在全自动生化分析仪上用己糖激酶法测定空腹血糖。结果 对照组的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=5 .4 1± 0 .94 ,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=4 .92± 0 .87;糖尿病人的 Hb Alc平均值 (% )为 x± s=11.0 6± 4 .3,血糖的平均值 (mmol/ L )为 x± s=10 .86± 3.0 4 ,P<0 .0 1,血糖值与Hb Alc值有显著相关性 ,r=0 .985 ,回归方程 Y=1.10 15 x+1.815。结论 该方法标本用量少 ,分辨率高 ,重复性好 ,结果不受温度及胎儿血红蛋白的影响 ,Hb

微型磁笔提取DNA的应用

目的探索用微型磁笔进行DNA快速提取以及电泳鉴定的研究。方法取人血0.1 m l或菜叶0.1g,磁珠悬液0.25 m l,选择性结合DNA、洗涤、洗脱、电泳即得。不需离心,不用大量检材,用微型磁笔在离心管中微量操作,分离纯化DNA只需30 m in,电泳只需50 m in。结果可以观察到清楚明亮的DNA条带,使大、中学师生同时掌握了正规DNA提取和琼脂糖电泳两项技能。结论本方法是对细胞生物学、医学遗传学实验的一大改进,对于DNA的提取是一大进步,它操作简捷直观、速度及准确率大为提高。

淮南地区土壤氨氧化细菌属的组成研究

采用琼脂糖凝胶电泳法研究淮南地区土壤氨氧化细菌群落组成。将提取的土壤DNA溶液经过纯化、PCR扩增,与氨氧化细菌的4个属的细菌DNA进行琼脂糖凝胶电泳,发现土壤中主要含有亚硝化单胞菌属(Nitrosomonas)和亚硝化球菌属(Nitrosococcus),不含有亚硝化螺菌属(Nitrososoira)。对土壤DNA的提取采用了SDS高盐提取法、Edgcomb改进法和Tsai报道法3种方法。比较电泳条带发现,Tsai报道法提取效果最好。

质粒提取及酶切图谱鉴定

本实验是采取碱变性方法从重组大肠杆菌中提取质粒 DNA,并用 EcoR I,BamH I 两种限制性内切酶对质粒 DNA 进行适当酶切,然后进行琼脂糖凝胶电泳对 DNA 酶切图谱加以鉴定。通过在紫外灯下观察电泳结果,证实利用碱变性方法提取质粒,同时通过酚氟仿抽提,得到的质粒 DNZ 纯度比较高。并且证实酶切图谱与预计相符。从而说明在一般工厂的实验条件下可以进行操作。