老鹳草素治疗去卵巢小鼠骨质疏松症的实验研究

目的观察老鹳草素对去卵巢小鼠骨质疏松症的治疗作用,并探讨其可能机制。方法将18只C57BL/6J小鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组,每组6只。假手术组仅实施手术暴露两侧卵巢,切除卵巢旁边少量脂肪组织,保留卵巢。模型组、治疗组小鼠腹腔注射2%戊巴比妥钠麻醉后,沿背部近髂脊处做一长约2 cm×3 cm纵行切口,逐层切开皮肤后切除双侧卵巢,缝合切口。治疗组在去卵巢手术前5 d灌胃给予老鹳草素20 mg·kg-1·d-1,假手术组灌胃给予等量0.9%氯化钠溶液。疗程3个月。实验结束后处死3组小鼠,测定血清生化指标[碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、骨钙素(BGP)、雌二醇(E2)]。双能X线骨密度测量仪、micro-CT测定股骨干骺端骨密度(BMD)及计量学参数。光学显微镜下观察股骨下端骨髓腔中脂肪细胞数量。Real time-PCR和Western blot检测股骨组织Wnt/β-catenin信号通路的关键信号分子Wnt3a、β-catenin、GSK-3β、Axin2、Runx2 mRNA和蛋白表达。结果将与假手术组比较,模型组小鼠血清ALP、TRAP、BGP水平显著升高,E2水平显著降低,股骨干骺端BMD、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨体积/总体积、股骨下端Wnt3a、β-catenin、Axin2、Runx2 mRNA和蛋白表达显著减少,骨小梁体积、股骨下端骨髓腔中脂肪细胞数量、GSK 3β-mRNA和蛋白表达显著增加(P<0.05);治疗组小鼠血清ALP、TRAP、BGP水平较模型组显著降低,E2水平较模型组显著升高,股骨干骺端BMD、骨小梁厚度、骨小梁数量、骨体积/总体积、股骨下端Wnt3a、β-catenin、Axin2、Runx2 mRNA和蛋白表达较模型组显著增加,骨小梁体积、股骨下端骨髓腔中脂肪细胞数量、GSK-3βmRNA和蛋白表达较模型组显著减少(P<0.05)。结论将老鹳草素对去卵巢骨质疏松小鼠模型有一定治疗作用,其机制与Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。