犬贾第虫MM/Sac-C/1基因的克隆及序列分析

利用PCR技术从犬贾第虫滋养中扩增出了2004bp大小的MM/Sac-C/1基因,构建了p MD-MM/Sac-C/1克隆载体,并进行了序列测定,利用计算机对该序列进行了核苷酸同源性比较.结果表明,与GeneBank登陆的蓝氏贾第虫WB株AF236019序列比较,其同源性为98%,蛋白质同源性比较结果显示,与蓝氏贾第虫WB株表面抗原的同源性为90%,获得了犬贾第虫MM/Sac-C/1基因.

肝癌缺失基因1(DLC-1)甲基化在多发性骨髓瘤患者中的临床意义

目的探讨肝癌缺失基因1(DLC-1)启动子区CpG岛甲基化在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达及相关临床意义。方法采用重亚硫酸盐测序PCR(BSP)法定量检测自2016年10月—2017年12月在新疆医科大学附属肿瘤医院初诊的30例MM患者DLC-1基因的甲基化状态,分别进行MM患者的临床资料分析、MM患者及健康对照组关于DLC-1基因甲基化情况的比较,以及MM患者DLC-1基因甲基化情况与相关临床指标的比较。结果(1)临床资料有关M蛋白的免疫分型提示:30例MM患者中IgG型21例(21/30),IgA型6例(6/30),轻链型3例(3/30);骨髓细胞学检查提示:MM患者中骨髓瘤细胞比例<30%的有6例(21/30),30%~50%之间的有19例(19/30),≥50%的有5例(5/30)。(2)MM组与对照组比较提示:MM组DLC-1启动子区甲基化率显著高于正常组(P=0.009),其中CpG岛4、6、7、13、21位点的甲基化率显著高于正常对照组(P值分别为0.017、0.030、0.023、0.017、0.044)。(3)进一步对MM患者深入比较发现,DLC-1基因的甲基化比例分别在Ⅱa+Ⅲa期与Ⅲb期组间、血清肌酐正常与升高患者组间、骨髓异常浆细胞/骨髓瘤细胞比例50%≥与<50%组间均存在统计学差异(P均<0.05)。结论DLC-1异常甲基化可能与肿瘤负荷及肾功能损害相关,深入研究有关DLC-1基因甲基化在MM患者中的表达情况,可为今后MM的去甲基化治疗提供新的研究思路。

结合基因表达谱探讨恶性黑色素瘤免疫微环境分型的预后预测价值

目的:探讨恶性黑色素瘤(malignant melanoma,MM)微环境分型对MM患者预后的评估价值。方法:对2010年7月至2017年5月在南京鼓楼医院手术切除的87例原发性MM组织进行二代测序,免疫组化法检测PD-1、PD-L1、CD3^(+)TIL、MSH2、MSH6、PMS2和MLH1的表达。随访患者的生存时间,分析不同免疫微环境分型对患者预后的影响及其基因表达特征。结果:根据PD-L1和TIL表达水平将87例MM患者的肿瘤微环境分为4个亚型:PD-L1^(+)TIL^(+)型或双阳型(15/87,17.24%)、PD-L1^(+)TIL^(-)型(15/87,17.24%)、PD-L1-TIL^(+)型(20/87,22.99%)、PD-L1-TIL^(-)型或双阴型(37/87,42.53%)。双阳型患者的中位无病生存期显著长于双阴型患者(P<0.05),此可能与双阴型患者存在更多CDK4、MCL1、MYC、AKT2、CCDD1、FGF19等预后不良基因拷贝数扩增相关;双阳型患者PD-1表达显著高于双阴型患者(P<0.01),可能与PD-L1、TIL分别与PD-1呈共表达和共不表达有关。结论:根据PD-L1及TIL表达将MM患者微环境分为4种亚型,能够区分MM患者预后,双阴型患者存在更多预后不良基因拷贝数扩增。