microRNA-100诱导视网膜神经节细胞氧化应激损伤的机制研究

目的 探讨基因调节因子-100(miRNA-100)在氧化应激(OS)诱导视网膜神经节细胞(RGCs)氧化应激损伤中的机制。方法 培养RGC5细胞,加入100 μmol/L、200 μmol/L、400 μmol/L、500 μmol/L、1 000 μmol/L过氧化氢(H 2O 2)建立氧化应激损伤模型。检测RGC5细胞凋亡情况,Real-timePCR检测miRNA-100基因表达情况,观察氧化应激对RGC5细胞miR-100表达的影响以及抑制miR-100后对RGC5细胞保护作用,Western Blot方法分析miR-100对RGC5细胞的作用机制,分析抑制胰岛素生长因子-1受体(IGF1R)对氧化应激损伤RGC5细胞凋亡的影响。结果 RGC5细胞凋亡率随氧化应激损伤程度加重而增高,且氧化应激损伤程度越重,RGC5细胞中miR-100表达越高,各组间差异有统计学意义( P <0.05);转染miR-100组RGC5细胞凋亡率较对照组明显降低,而RGC5细胞中miR-100表达水平也明显降低,差异有统计学意义( P <0.05);miR-100下调组RGC5细胞中pTrkB蛋白、pAKT蛋白、pERK蛋白较对照组明显增加,差异有统计学意义( P <0.05);抑制IGF1R组氧化应激损伤RGC5细胞凋亡率明显低于空白对照组,差异有统计学意义( P <0.05)。结论 氧化应激损伤可诱导CGR5细胞凋亡,miRNA-100参与了RGC5细胞凋亡过程,下调miRNA-100可有效调节RGC5细胞凋亡,其可能机制与miRNA-100调节靶基因IGF1R,从而激活了TrkB、AKT、ERK信号通路有关。