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Specific activation of 2'-5'oligoadenylate synthetase gene promoter by hepatitis C virus-core protein:A potential for developing hepatitis C virus targeting gene therapy
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作者 Ying Wang Shan-Shan Mao +3 位作者 Qiong-Qiong He Yuan Zi Ji-Fang Wen De-Yun Feng 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2009年第25期3178-3182,共5页
AIM: TO examine whether 2'-5'oligoadenylate synthetase (OAS) gene promoter can be specifically activated by hepatitis C virus (HCV)-core protein. METHODS: Human embryo hepatic cell line L02 was transfected wit... AIM: TO examine whether 2'-5'oligoadenylate synthetase (OAS) gene promoter can be specifically activated by hepatitis C virus (HCV)-core protein. METHODS: Human embryo hepatic cell line L02 was transfected with pcDNA3.1-core plasmid and selected by G418. Expression of HCV-core was detected by reverse transcription polymerase chain reaction and Western blotting. The OAS promoter sequence was amplified from the genomic DNA and inserted into pGL3-basic vector. The resultant pGL3-OAS-Luci plasmid was transiently transfected into L02/core cells and luciferase activity was assayed. I^ESULTS: L02/core cell line stably expressing HCV- core protein was established. The pGL3-OAS-Luci construct exhibited significant transcriptional activity in the L02/core cells but not in the L02 cells. CONCLUSION: HCV-core protein activates the OAS gene promoter specifically and effectively. Utilization of OAS gene promoter would be an ideal strategy for developing HCV-specific gene therapy. 展开更多
关键词 Hepatitis C virus gene promoter gene therapy CORE 2'-5'oligoadenylate synthetase
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The 5-HT2c receptor gene Cys23Ser polymorphism influences the intravaginal ejaculation latency time in Dutch Caucasian men with lifelong premature ejaculation 被引量:3
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作者 Paddy KC Janssen Ron van Schaik +1 位作者 Berend Olivier Marcel D Waldinger 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2014年第4期607-610,共4页
It has been postulated that the persistent short intravaginal ejaculation latency time (IELT) of men with lifelong premature ejaculation (LPE) is related to 5-hydroxytryptamine (HT)2c receptor functioning. The a... It has been postulated that the persistent short intravaginal ejaculation latency time (IELT) of men with lifelong premature ejaculation (LPE) is related to 5-hydroxytryptamine (HT)2c receptor functioning. The aim of this study was to investigate the relationship of Cys23Ser 5-HT2c receptor gene polymorphism and the duration of IELT in men with LPE. Therefore, a prospective study was conducted in 64 Dutch Caucasian men with LPE. Baseline IELT during coitus was assessed by stopwatch over a 1-month period. All men were genotyped for Cys23Ser 5-HT2c receptor gene polymorphism. Allele frequencies and genotypes of Cys and Ser variants of 5-HT2c receptor gene polymorphism were determined. Association between Cys/Cys and Ser/Ser genotypes and the natural logarithm of the IELT in men with LPE were.investigated. As a result, the geometric mean, median and natural mean IELT were 25.2, 27.0, 33.9s, respectively. Of all men, 20.0%, 10.8%, 23.1% and 41.5% ejaculated within 10, 10-20, 20-30 and 30-60s after vaginal penetration. Of the 64 men, the Cys/Cys and Ser/Ser genotype frequency for the Cys23Ser polymorphism of the 5-HT2c receptor gene was 81% and 19%, respectively. The geometric mean IELT of the wildtypes (Cys/Cys) is significantly lower (22.6s; 95% CI 18.3-27.8s) than in male homozygous mutants (Ser/Ser) (40.4s; 95% CI 20.3-80.4s) (P = 0.03). It is concluded that Cys23Ser 5-HT2c receptor gene polymorphism is associated with the IELT in men with LPE. Men with Cys/Cys genotype have shorter IELTs than men with Ser/Ser genotypes. 展开更多
关键词 5-HT2c receptor gene Cys23Ser polymorphism intravaginal ejaculation latency time lifelong premature ejaculation
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NT5C2在疾病及治疗中的研究进展
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作者 舒玲 霍本念 宋林 《基础医学与临床》 2023年第5期852-856,共5页
NT5C2所编码的蛋白为细胞质5’-核苷酸酶Ⅱ(cN-Ⅱ),该酶具有催化核苷单磷酸酯去磷酸化作用,主要参与细胞内嘌呤核苷酸库的调节。高表达cN-ⅡmRNA与急性白血病(AL)患者预后较差有关,获得性NT5C2突变会阻碍DNA和巯鸟嘌呤核苷酸(TGN)结合... NT5C2所编码的蛋白为细胞质5’-核苷酸酶Ⅱ(cN-Ⅱ),该酶具有催化核苷单磷酸酯去磷酸化作用,主要参与细胞内嘌呤核苷酸库的调节。高表达cN-ⅡmRNA与急性白血病(AL)患者预后较差有关,获得性NT5C2突变会阻碍DNA和巯鸟嘌呤核苷酸(TGN)结合物的形成,导致6-巯基嘌呤(6-MP)耐药。此外,NT5C2与2型糖尿病、精神分裂症等多种疾病的发生风险都具有关联性。 展开更多
关键词 nt5c2 胞质5’-核酸酶Ⅱ(cN-Ⅱ) 核苷类似物 急性白血病(AL) 2型糖尿病
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达格列净对Ⅱ型心肾综合征患者心肾功能及短期预后的影响 被引量:3
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作者 周乐 曹华明 +3 位作者 陆瑾玥 耿小红 陈怡 胡伊 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2023年第2期246-251,共6页
目的 观察在常规治疗基础上,加用达格列净对Ⅱ型心肾综合征(cardiorenal syndrome, CRS)患者的血清肌酐(serum creatinine, SCr)、血胱抑素C(cystatin C, Cys-C)、可溶性生长激素表达基因2蛋白(growth stimulation expressed gene 2, sS... 目的 观察在常规治疗基础上,加用达格列净对Ⅱ型心肾综合征(cardiorenal syndrome, CRS)患者的血清肌酐(serum creatinine, SCr)、血胱抑素C(cystatin C, Cys-C)、可溶性生长激素表达基因2蛋白(growth stimulation expressed gene 2, sST2)和N末端B型利钠肽原(n-terminal pro b-type natriuretic peptide, NT-proBNP)的影响。方法 选取Ⅱ型CRS患者94例,随机分为对照组48例(常规治疗)和观察组46例(常规治疗的基础上加用达格列净10 mg),在基线与治疗24周后检测心肾功能指标,并观察短期预后以及不良反应。结果 与对照组比较,观察组患者的SCr、Cys-C、sST2和NT-proBNP值均明显降低(P<0.05),观察组主要不良心血管事件发生率更低(P<0.05)。结论 在常规治疗基础上加用达格列净10 mg可显著降低Ⅱ型CRS患者的SCr、Cys-C、sST2和NT-proBNP水平及改善短期预后,且sST2可用来判断Ⅱ型CRS患者心肾功能,有助于指导诊疗。 展开更多
关键词 达格列净 Ⅱ型心肾综合征 血清肌酐 血胱抑素C 可溶性生长激素表达基因2蛋白 N末端B型利钠肽原
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1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌嗪(H-7)对肺纤维化大鼠肺单核细胞趋化蛋白-1 mRNA表达的影响
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作者 曾钧 宋烈昌 +2 位作者 金行中 郭丹 林敬明 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期362-365,共4页
研究蛋白激酶C(PKC)抑制剂 1 (5 异喹啉磺酰基 ) 2 甲基哌嗪 (H 7)对肺纤维化大鼠单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)mRNA表达的影响 ,为临床治疗肺纤维化提供理论基础 .博来霉素致大鼠肺纤维化动物模型 ,腹腔注射H 7后 ,定量RT PCR方法检... 研究蛋白激酶C(PKC)抑制剂 1 (5 异喹啉磺酰基 ) 2 甲基哌嗪 (H 7)对肺纤维化大鼠单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)mRNA表达的影响 ,为临床治疗肺纤维化提供理论基础 .博来霉素致大鼠肺纤维化动物模型 ,腹腔注射H 7后 ,定量RT PCR方法检测其对肺组织MCP 1mRNA表达的影响 ;测定实验组和对照组肺组织匀浆内羟脯氨酸的含量 ,观察肺组织病理学变化并计数单核细胞 .结果发现 ,H 7能显著抑制大鼠肺纤维化组织MCP 1mRNA表达和单核细胞的聚集以及羟脯氨酸的含量 .结果表明 ,H 7通过抑制肺组织MCP 1mRNA的表达 ,对博来霉素致肺纤维化有明显的防治作用 . 展开更多
关键词 蛋白激酶C 1-(5-异喹啉磺酰基)-2-甲基哌嗪 基因表达 单核细胞趋化蛋白-1 mRNA 肺纤维化 博来霉素
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NT5C2基因在儿童急性白血病中的表达及其临床意义 被引量:8
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作者 王艳珍 安曦洲 +4 位作者 刘江华 张妮 刘志娟 梁绍燕 于洁 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期748-753,共6页
目的探讨核苷类似物代谢相关基因NT5C2在儿童急性白血病(AL)患者骨髓样本中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学染色法检测63例初诊、15例完全缓解和7例复发AL患JLNTSC2mRNA及蛋白水平,以16例非恶性血液系统... 目的探讨核苷类似物代谢相关基因NT5C2在儿童急性白血病(AL)患者骨髓样本中的表达及其临床意义。方法采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学染色法检测63例初诊、15例完全缓解和7例复发AL患JLNTSC2mRNA及蛋白水平,以16例非恶性血液系统疾病患儿作为对照。分析NT5C2在AL患儿中的表达及其与临床指标的关系。结果①NT5C2mRNA在初诊急性B淋巴细胞白血病(B—ALL)、急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)、急性髓系白血病(AML)和对照组的表达水平分另0为1.16(0.89~2.25)、0.96(0.74~1.25)、I.66(0.84~3.15)币口0.88(0.61~1.21)。其中AML(P〈0.01)、B—ALL(P〈0.05)的表达水平显著高于对照组;T-ALL的表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P〉0.05)。动态观察NT5C2mRNA在15例AL患儿不同治疗阶段的表达变化,完全缓解后表达水平明显降低(P〈0.01)。复发AL患儿的NT5C2mRNA水平显著高于缓解组及对照组(P〈0.01)。②免疫组织化学染色检测显示NT5C2蛋白水平与mRNA水平趋势一致。③在AML、T-ALL患儿组中NT5C2mRNA表达水平与危险度分级呈正相关(r值分别为0.434、0.389,P值均〈0.05)。@NT5C2高表达组AML患儿的诱导缓解化疗第9天骨髓不缓解率(35.2%对0)、巩固治疗前骨髓不缓解率(25.O%对0)、微小残留病阳性率(36.4%对14.3%)和复发率(38.5%对28.6%)均高于低表达组,但差异无统计学意义(P值均〉0.05)。结论NT5C2高表达是儿童AL预后不良相关危险因素,有望成为指导个体化化疗、判断预后、监测复发的指标。 展开更多
关键词 基因 nt5c2 白血病 儿童 危险因素 核苷类似物耐药
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小鼠与人重排活化基因2启动子的比较
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作者 赵文璞 岸裕幸 村口笃 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期707-711,共5页
目的 通过比较小鼠与人重排活化基因 2 (RAG2 )启动子 ,试图寻找与小鼠RAG2启动子特异性结合的转录因子。方法 采用表达luciferase的报告基因载体检测启动子的活性。采用EMSA(electrophoresismobilityshiftassay)检测与启动子结合的... 目的 通过比较小鼠与人重排活化基因 2 (RAG2 )启动子 ,试图寻找与小鼠RAG2启动子特异性结合的转录因子。方法 采用表达luciferase的报告基因载体检测启动子的活性。采用EMSA(electrophoresismobilityshiftassay)检测与启动子结合的转录因子。结果 小鼠RAG2启动子 - 6 0 - 4 1区域存在富G的GA盒子 ,而人RAG2启动子在相应位置却是富A区。突变实验结果显示 ,GA盒子是小鼠RAG2启动子完整活性所必须的。EMSA结果显示 ,Sp1 Sp3结合在小鼠RAG2启动子 - 6 0 - 4 1区域 ,并且Sp1能够协同Pax 5、c Myb活化小鼠RAG2启动子。结论 尽管小鼠与人RAG2启动子同源性很高 ,但它们结合的转录因子和功能有所不同。 展开更多
关键词 小鼠 重排活化基因2 启动子 比较 免疫球蛋白
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^(131)I-c(RGD)_2环肽及其联合基因治疗对荷神经胶质瘤裸鼠模型肿瘤抑制作用
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作者 马欢 刘敏 +4 位作者 陈雪祺 孙宏伟 闫平 王荣福 张春丽 《肿瘤学杂志》 CAS 2017年第10期837-841,共5页
[目的]探讨^(131)I标记的c(RGD)_2 对荷神经胶质瘤裸鼠模型的治疗作用,并与放射敏感性启动子E8和CD/5-FC自杀药物系统进行联合治疗,拟建立一种具有特异性和高效性的恶性肿瘤靶向治疗方式。[方法]建立荷神经胶质瘤U87裸鼠模型30只,瘤体... [目的]探讨^(131)I标记的c(RGD)_2 对荷神经胶质瘤裸鼠模型的治疗作用,并与放射敏感性启动子E8和CD/5-FC自杀药物系统进行联合治疗,拟建立一种具有特异性和高效性的恶性肿瘤靶向治疗方式。[方法]建立荷神经胶质瘤U87裸鼠模型30只,瘤体直径约14mm时,随机分为6组,每组5只:(1)生理盐水组;(2)^(131)I-c(RGD)_2 11.1MBq组;(3)^(131)I-c(RGD)_2 18.5MBq;(4)^(131)I-c(RGD)_2 18.5MBq+LV组:连续2d,瘤体内注射方式将5×106U/25μl的重组慢病组载体E8-cod A-GFP LV转染至肿瘤,然后通过尾静脉将18.5MBq^(131)I-c(RGD)_2 注入到小鼠体内;(5)^(131)I-c(RGD)_2 18.5MBq+LV+5-FC组:同(4),将同量慢病毒载体转染至瘤内,同时腹腔注射10 mg前体药物5-FC连续7d。(6)^(131)I-对照肽18.5MBq组(序列:YKAREC)。观察各组裸瘤肿瘤体积和质量的变化。[结果]治疗结束后,(2)、(3)、(4)、(5)、(6)组抑瘤率分别为36.75%、41.39%、43.63%、44.87%、3.31%。对瘤体质量进行比较,只有生理盐水组与(3)、(4)及(5)组之间差异有统计学意义(P<0.05),而(3)、(4)及(5)组之间差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]^(131)I-c(RGD)_2 能抑制U87神经胶质瘤的生长,对神经胶质瘤的治疗有潜在价值。但^(131)I-c(RGD)_2 联合放射敏感性启动子E8和CD/5-FC自杀系统对于肿瘤细胞的治疗并没有达到统计学上的预期的效果,可能与开始治疗时的瘤体积过大或者样本量小有关。 展开更多
关键词 放射敏感性启动子 CD/5-FC自杀系统 基因治疗 131I-c(RGD)2
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茅苍术AlCMK基因的克隆及原核表达分析 被引量:2
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作者 鲁继梅 徐睿 +4 位作者 吴君贤 邹立思 刘超 彭华胜 查良平 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第9期2876-2884,共9页
4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶[4-(cytidine-5′-diphospho)-2-C-methyl-D-erythritol kinase,CMK]是生成萜类化合物MEP途径的关键酶之一。本研究以茅苍术转录组数据为依据,克隆获得CMK基因序列,命名为AlCMK(GenBank登录号为OM283... 4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶[4-(cytidine-5′-diphospho)-2-C-methyl-D-erythritol kinase,CMK]是生成萜类化合物MEP途径的关键酶之一。本研究以茅苍术转录组数据为依据,克隆获得CMK基因序列,命名为AlCMK(GenBank登录号为OM283293)。研究结果表明,AlCMK包含一个全长为1230 bp的开放阅读框(ORF),编码409个氨基酸,推测其相对分子质量为44752.53,蛋白理论等电点为6.67;跨膜结构分析表明其无跨膜结构,二级结构显示其主要由无规则卷曲(48.17%)结构组成;同源氨基酸序列分析表明,茅苍术与除虫菊、桂花、杜仲、忍冬、丹参CMK基因编码的氨基酸序列具有较高同源性;系统进化树分析表明,茅苍术AlCMK与菊科植物CMK蛋白亲缘关系较近;构建pET-32a-AlCMK原核表达载体,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)表达感受态,蛋白表达结果显示其分子质量约为65 kDa;利用qRT-PCR分析AlCMK基因在不同组织和茉莉酸甲酯(MeJA)处理后的表达模式,同时采用ELISA试剂盒法测定茅苍术CMK酶活性,结果表明,不同产地茅苍术AlCMK基因具有组织表达差异性,且受外源MeJA诱导表达,酶活结果显示不同产地茅苍术CMK酶活性均在叶中较高;亚细胞定位显示该基因位于叶绿体中。本研究为进一步阐明茅苍术中萜类化合物合成途径AlCMK基因的生物学功能提供参考。 展开更多
关键词 茅苍术 4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶 基因克隆 原核表达 表达分析 亚细胞定位
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