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小鼠LRP5基因负调控区分析
1
作者
吕萍
龚瑶琴
+2 位作者
李江夏
周海斌
陈丙玺
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2007年第3期164-167,共4页
为研究小鼠LRP5基因-1 229 bp^-1 034 bp之间存在的负调控区,在此区域内构建了3种荧光素酶报告基因表达载体,即pGL3-1229(-1 229 bp^-914 bp),pGL3-1130(-1 130 bp^-914 bp)及pGL3-1051(-1 051 bp^-914 bp)。以PRL-TK为内参照质粒,瞬时...
为研究小鼠LRP5基因-1 229 bp^-1 034 bp之间存在的负调控区,在此区域内构建了3种荧光素酶报告基因表达载体,即pGL3-1229(-1 229 bp^-914 bp),pGL3-1130(-1 130 bp^-914 bp)及pGL3-1051(-1 051 bp^-914 bp)。以PRL-TK为内参照质粒,瞬时转染COS-7,48 h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性。结果表明pGL3-1229质粒的相对荧光素酶活性是pGL3-1130的26%,有显著性差异。在-1 229 bp^-1 130 bp之间存在负调控元件,软件分析COUP可能是小鼠LRP5基因的负调控元件,有待进一步突变分析证实。
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关键词
基因
lrp5
小鼠
调控序列
荧光素酶分析
下载PDF
职称材料
小鼠Lrp5基因5′端调控区域的功能
2
作者
吕萍
龚瑶琴
+2 位作者
李江夏
周海斌
陈丙玺
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期616-621,共6页
为研究小鼠低密度脂蛋白(LDL)受体相关蛋白5(LRP5)基因5′端调控序列的功能,PCR扩增小鼠Lrp5基因翻译起始位点上游3041bp(-2909bp^+132bp)DNA序列.PCR产物定向克隆到pGL3-basic载体上,重组质粒命名为pGL3-2909.以pGL3-2909质粒为模板,...
为研究小鼠低密度脂蛋白(LDL)受体相关蛋白5(LRP5)基因5′端调控序列的功能,PCR扩增小鼠Lrp5基因翻译起始位点上游3041bp(-2909bp^+132bp)DNA序列.PCR产物定向克隆到pGL3-basic载体上,重组质粒命名为pGL3-2909.以pGL3-2909质粒为模板,以不同的引物扩增出不同长短的DNA片段,分别定向克隆到含小鼠Lrp5基因基本启动子并含有荧光素酶报道基因的pGL3-103载体上,构建了12种荧光素酶报告基因表达体系:pGL3-267,pGL3-513,pGL3-535,pGL3-560,pGL3-575,pGL3-623,pGL3-645,pGL3-719,pGL3-770,pGL3-1032,pGL3-1330,pGL3-1619.以pRL-TK为内参照质粒,瞬时转染COS-7细胞,48h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性,pGL3-575(-2909bp^-2334bp)活性是pGL3-513(-2909bp^-2396bp)的20%,pGL3-535(-2909bp^-2374bp)的活性是pGL3-513的44%,pGL3-575的活性是pGL3-560(-2909bp^-2349bp)的48%,均有显著性差异.结果表明,在-2396bp与-2374bp之间的22bp区域内以及-2349bp与-2334bp之间的15bp区域内存在负调控元件.软件分析表明,此区域含有IK2,LYF1及MZF1调控元件.
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关键词
LDL受体相关蛋白5
小鼠
lrp5
基因
调控序列
荧光素酶分析
下载PDF
职称材料
题名
小鼠LRP5基因负调控区分析
1
作者
吕萍
龚瑶琴
李江夏
周海斌
陈丙玺
机构
山东大学医学院医学遗传学研究所实验畸形学教育部重点实验室
出处
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2007年第3期164-167,共4页
基金
教育部科学技术研究重点项目(批准号02129)
文摘
为研究小鼠LRP5基因-1 229 bp^-1 034 bp之间存在的负调控区,在此区域内构建了3种荧光素酶报告基因表达载体,即pGL3-1229(-1 229 bp^-914 bp),pGL3-1130(-1 130 bp^-914 bp)及pGL3-1051(-1 051 bp^-914 bp)。以PRL-TK为内参照质粒,瞬时转染COS-7,48 h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性。结果表明pGL3-1229质粒的相对荧光素酶活性是pGL3-1130的26%,有显著性差异。在-1 229 bp^-1 130 bp之间存在负调控元件,软件分析COUP可能是小鼠LRP5基因的负调控元件,有待进一步突变分析证实。
关键词
基因
lrp5
小鼠
调控序列
荧光素酶分析
Keywords
gene
,
lrp5
,
mice
,
control region
,
luciferase activity
分类号
R394-33 [医药卫生—医学遗传学]
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职称材料
题名
小鼠Lrp5基因5′端调控区域的功能
2
作者
吕萍
龚瑶琴
李江夏
周海斌
陈丙玺
机构
山东大学医学院医学遗传学研究所
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第5期616-621,共6页
基金
教育部科学技术研究重点项目(No.02129)资助~~
文摘
为研究小鼠低密度脂蛋白(LDL)受体相关蛋白5(LRP5)基因5′端调控序列的功能,PCR扩增小鼠Lrp5基因翻译起始位点上游3041bp(-2909bp^+132bp)DNA序列.PCR产物定向克隆到pGL3-basic载体上,重组质粒命名为pGL3-2909.以pGL3-2909质粒为模板,以不同的引物扩增出不同长短的DNA片段,分别定向克隆到含小鼠Lrp5基因基本启动子并含有荧光素酶报道基因的pGL3-103载体上,构建了12种荧光素酶报告基因表达体系:pGL3-267,pGL3-513,pGL3-535,pGL3-560,pGL3-575,pGL3-623,pGL3-645,pGL3-719,pGL3-770,pGL3-1032,pGL3-1330,pGL3-1619.以pRL-TK为内参照质粒,瞬时转染COS-7细胞,48h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性,pGL3-575(-2909bp^-2334bp)活性是pGL3-513(-2909bp^-2396bp)的20%,pGL3-535(-2909bp^-2374bp)的活性是pGL3-513的44%,pGL3-575的活性是pGL3-560(-2909bp^-2349bp)的48%,均有显著性差异.结果表明,在-2396bp与-2374bp之间的22bp区域内以及-2349bp与-2334bp之间的15bp区域内存在负调控元件.软件分析表明,此区域含有IK2,LYF1及MZF1调控元件.
关键词
LDL受体相关蛋白5
小鼠
lrp5
基因
调控序列
荧光素酶分析
Keywords
LDL receptor related protein 5, mouse,
lrp5
gene
,
control region
,
luciferase activity
分类号
R394 [医药卫生—医学遗传学]
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠LRP5基因负调控区分析
吕萍
龚瑶琴
李江夏
周海斌
陈丙玺
《药物生物技术》
CAS
CSCD
2007
0
下载PDF
职称材料
2
小鼠Lrp5基因5′端调控区域的功能
吕萍
龚瑶琴
李江夏
周海斌
陈丙玺
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
0
下载PDF
职称材料
已选择
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