抗稻瘟病基因pi5检测标签的设计及验证

稻瘟病是在世界范围内广泛分布的水稻真菌病害,控制该病的为害必须有效利用抗稻瘟病基因.抗病基因pi5包含2个独立遗传的NBS-LRR类基因Pi5-1和Pi5-2,为了解该基因的抗谱并使其在抗病育种中得以有效利用,本研究利用辽宁地区分离出的6群15个生理小种对携带该基因的单基因系接种,结果表明单基因系对其中12个生理小种表现中抗或抗病,只对其中3个小种表现中感或感病,这说明pi5抗病基因抗谱较宽,是一个可在辽宁地区广为使用的广谱抗稻瘟病基因.为了提高该基因的选择效率,使其在抗病品种选育中发挥更大的作用,本研究根据pi5-1和pi5-2的CDS序列设计特异性引物,并通过基因扩增和测序比对,获得了6对用于育种亲本材料或杂交后代抗稻瘟病基因型检测的标记,为携带pi5抗病基因育种材料的分子标记辅助育种提供了参考.

分子标记辅助选育聚合抗稻瘟病基因Pi5及Pita的水稻新品系

稻瘟病是对水稻生产具有严重威胁的真菌病害,选育并推广聚合多个抗稻瘟病基因的抗病品种是防控该病最为经济有效的途径。本研究以携带不同抗稻瘟病基因的‘吉粳105’(Pita)和‘T639’(Pi5)为亲本杂交衍生的后代群体为试材,利用分子标记辅助育种技术,筛选到3个聚合抗稻瘟病基因Pita和Pi5的后代。并以其中一个株系‘吉2011TK50’为试验材料,利用人工接种鉴定、显微观察及定量PCR等技术研究‘吉2011TK50’的抗病表型及抗性分子机制。结果表明,抗稻瘟病基因的聚合能够增强该品系对稻瘟病的抗性。显微观察和抗稻瘟病基因表达分析发现,基因聚合株系在接种稻瘟病菌后24 h PR基因表达量显著升高,被稻瘟病菌侵染的细胞开始出现过敏性死亡等抗病反应,抑制了稻瘟病菌的进一步侵染。研究结果证实聚合Pita和Pi5可提高水稻品种对抗稻瘟病的抗性,这可为抗病基因聚合育种提供参考。

丙戊酸钠对Molt-4细胞增殖的影响及其作用途径探讨

目的 观察丙戊酸钠（VPA）对人急性T细胞白血病细胞系Molt-4细胞增殖和细胞周期的影响,并探讨其对Molt-4细胞p15INK4B基因甲基化状态的影响.方法 不同浓度VPA作用Molt-4细胞后,用MTr法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞周期的变化,半巢式甲基化特异PCR（MSP）法检测p15INK4B基因甲基化状态,RT-PCR方法检测p15基因、DNA甲基转移酶DNMT-1、DNMT3A、DNMrT3B mRNA的表达.结果 VPA可明显抑制细胞增殖,影响Molt-4细胞周期分布,5.0mmol/L VPA作用Molt-4细胞48 h,G0/G1期细胞为（66.87±3.31）%,S期细胞为（8.47±2.56）%,与未加VPA组相比,S期细胞明显下降,G0/G1期细胞明显升高（P＜0.05）.经VPA作用后Molt-4细胞p15基因甲基化程度明显下降,p15基因表达水平明显增加,DNMT-1、DNMT3B mRNA表达水平下降,以DNMT-1下降较明显.结论 VPA可能通过抑制甲基转移酶DNMT-1和（或）DNMT3B表达使p15INK4B基因去甲基化,使p15基因表达上调,从而抑制Molt-4细胞增殖,使细胞周期阻滞于G0/G1期.