基于染料Genefinder和适配体的荧光传感体系检测赭曲霉毒素A

构建基于核酸染料Genefinder和适配体的荧光传感体系用于检测赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)。OTA适配体与其互补链形成双链结构,Genefinder染料与双链结构DNA结合后产生较强的荧光信号,加入OTA后,适配体与OTA结合形成四链体结构,双链打开,Genefinder染料荧光强度降低。结果表明,该荧光传感体系的线性范围为50 pg/L~300 ng/L,实际检出限为50 pg/L,对OTA有较强的选择性。这种简单、快速、特异性强的荧光传感体系具有广泛的应用前景。

Genefinder和EB在DNA电泳谱带定量分析中的比较

[目的]比较Genefinder和EB对DNA电泳谱带定量分析的影响。[方法]用加入Genefinder或EB的琼脂糖凝胶进行PBR322DNA电泳,并用凝胶成像分析系统进行标准曲线相关性等分析。[结果]用Genefinder作染料,标准曲线相关性、样品含量百分误差、灵敏度等都比EB好。[结论]用Genefinder作染料不仅提高了定量分析的质量,而且安全、无污染,有利于保护环境。

琼脂糖电泳中核酸染料Genefinder的最佳使用方法建立

目的确定琼脂糖凝胶电泳中使用核酸染料Genefinder的最适方法,以期找到染色效果理想的染色方法。方法在琼脂糖凝胶电泳中,采用预染样品法、胶内染色法以及两者相结合的3种方法,使用核酸染料Genefinder进行染色,对染色结果进行比较分析。结果使用胶内染色法染色效果较好,预染样品法次之,胶染及样品染色法结合效果最差。结论核酸染料Genefinder会影响DNA的迁移效率,使用Genefinder进行胶内染色是一种较好的染色方法。

基于染料Genefinder的荧光传感体系检测玉米赤霉烯酮

玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)是由镰刀菌属真菌产生的一种毒素,具有生殖毒性、免疫毒性、肝肾毒性及致癌性,对人类健康造成严重威胁。该研究通过构建一种简单、灵敏的荧光传感体系检测ZEN,其中核酸适配体作为识别元件,对目标物ZEN具有特异性识别作用;Genefinder染料作为荧光传感信号,当染料与ZEN适配体及其互补链形成的双链结构作用时,染料荧光信号增强,然而加入ZEN后,适配体特异性识别ZEN,导致双链打开,染料荧光强度降低。研究结果表明,该传感体系对ZEN具有较好的选择性,在最优条件下,这种简单快速的荧光传感体系的线性范围是0.1~200μg/L,实际检出限为0.1μg/L。以玉米粉为实际样品,ZEN的加标回收率为100.4%~105.8%,该荧光传感体系成功用于实际样品检测,具有广阔的应用前景。

核酸染料在实验教学改革中的应用与思考--核酸染料Genefinder在基因工程实验教学改革的应用与思考

琼脂糖凝胶电泳技术是基因工程实验课程教学中必不可少的一项常规教学内容。琼脂糖凝胶电泳技术常用的核酸染料EB具有强烈的致突变能力和强致癌性。而核酸染料Genefinder属于花青类植物染料,毒性很低,使用安全,可有效保护实验操作者和环境,且检测核酸的灵敏度高。论述在基因工程实验平台建设中应用无毒的核酸染料Genefinder替代强致癌的EB作为基因工程琼脂糖凝胶电泳中的核酸染料,阐述核酸染料Genefinder实施于在基因工程本科实验教学中的应用及成效,并对完善核酸染料Genefinder在基因工程实验课教学中的应用提出思考。

Genefinder和Goldview两种核酸染料的灵敏度比较

使用前染和后染两种不同的染色方法,比较了Genefinder和Goldview两种新型核酸染料对凝胶中DNA的染色效果及灵敏度。结果表明,用前染法染色Genefinder对琼脂糖凝胶中的核酸染色效果要较Goldview好,用后染法染色两种染料效果差不多,且用前染法的灵敏度较后染法好。

核酸染料Genefinder使用方法的比较

目的:使用核酸染料Genefinder检测琼脂糖凝胶中的核酸,通过比较预染样品法、胶内染色法和后染法三种染色方法的染色效果,了解该染料的染色特性,以期找到性能稳定,染色效果好的染色方法。方法:在琼脂糖凝胶电泳中,以不同的染色方法使用核酸染料Genefinder进行染色,对染色结果进行比较分析。结果:使用电泳后染色方法染色效果较好,胶内染色法次之,预染样品法效果最差。结论:核酸染料Genefinder会干扰DNA的迁移效率,因此,使用Genefinder进行电泳后染色是一种较好的染色方法。

四种核酸荧光染料在琼脂糖凝胶中染色特性的比较分析

目的比较几种核酸染料(Genefinder、Geneview、SYBER greenI)对于琼脂糖凝胶中DNA/RNA的染色效果并分析其取代溴化乙锭(EB)用于常规电泳后凝胶中核酸染色的可能性。方法分别使用四种核酸染料对凝胶中的RNA/DNA进行染色并对结果进行比较分析。结果四种染料对RNA/DNA染色结果无明显差异(P>0.05)。结论新型核酸染料Genefinder、Geneview和SYBER greenI能够代替EB,用于常规凝胶中的DNA/RNA染色。