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Effects of Heterologously Overexpressing PIP5K-Family Genes in Arabidopsis on Inflorescence Development
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作者 Mingda Yin Rui Luo +8 位作者 Tana Liang Qi Wen Xiaotian Liang Yanpeng Wen Xuemei Hu Zhiyan Wang Chang Gao Wenjing Ren Fenglan Huang 《Phyton-International Journal of Experimental Botany》 SCIE 2024年第1期97-117,共21页
Castor is one of the top 10 oil crops in the world and has extremely valuable uses.Castor inflorescences directly affect yield,so the study of inflorescence development is very important in increasing castor yield.Our... Castor is one of the top 10 oil crops in the world and has extremely valuable uses.Castor inflorescences directly affect yield,so the study of inflorescence development is very important in increasing castor yield.Our previous studies have shown that the PIP5K gene family(PIP5Ks)is associated with inflorescence development.In this study,to determine the function of each PIP5K gene in castor,a female Lm-type castor line,aLmAB2,was used to determine the relative expression levels of the PIP5Ks in castor inflorescences.Six PIP5K genes were heterologously overexpressed in Arabidopsis thaliana,the relative expression of each gene and the effect on plants was determined in A.thaliana,and the relationships among the PIP5Ks in castor were inferred.The expression levels of the PIP5Ks in the female Lm-type castor line aLmAB2 were analyzed.The relative expression levels of the PIP5K9 and PIP5K11 genes were high(p<0.05)in isofemale inflorescences,and those of PIP5K1,PIP5K2,PIP5K6,and PIP5K8 were high(p<0.05)in female inflorescences but low(p<0.05)in bisexual inflorescences.The PIP5Ks were heterologously overexpressed in A.thaliana,and T3-generation plants with stable genetic resistance,i.e.,AT-PIP5K^(+)plants(AT-PIP5K1^(+),AT-PIP5K2^(+),AT-PIP5K6^(+),AT-PIP5K8^(+),AT-PIP5K9^(+),and ATPIP5K11^(+) plants),were obtained.Biological tests of the AT-PIP5K+plants showed that the growth of the main stem was significantly delayed in AT-PIP5K+plants compared with Columbia wild-type(WT)A.thaliana plants;the PIP5K1 and PIP5K2 genes promoted lateral stem growth and flower and silique development;and the PIP5K6,PIP5K8,PIP5K9 and PIP5K11 genes inhibited lateral stem growth and flower and silique development.The correlations among PIP5Ks in castor suggest that there may be a synergistic relationship among PIP5K1,PIP5K2,and PIP5K6 in castor inflorescences,and PIP5K8,PIP5K9,and PIP5K11 are complementary to the other three genes. 展开更多
关键词 CASTOR inflorescence development PIP5K gene family gene overexpression
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The Influence of Aerial Exposure on Sea Anemones Aulactinia veratra Mucin Genes Expression Using the RNA Sequencing
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作者 Alaa Haridi 《Open Journal of Marine Science》 2024年第1期1-18,共18页
Mucin genes are the main component of mucus. The sea anemone species, Aulactinia veratra (Phylum Cnidaria) contains different types of mucin genes. In the intertidal zone, A. veratra is found to be exposed to air duri... Mucin genes are the main component of mucus. The sea anemone species, Aulactinia veratra (Phylum Cnidaria) contains different types of mucin genes. In the intertidal zone, A. veratra is found to be exposed to air during the low tide and produces large quantities of mucus as an external covering. The relation between low tide and mucus secretion is still unclear, and what is the role of mucin during arial exposure is not yet investigated. This study hypothesised that the mucin genes in A. veratra would have significantly high expression in response to aerial exposure. Therefore, the aim of current study was to examine and analyses the response of A. veratra mucins in response to an experiment involving three hours of aerial exposure. To achieve this, aim the RNA-sequencing and bioinformatics analyses were used to examine the expression profile of A. veratra mucin genes in response to aerial exposure. The generated results have shown that, Mucin4-like and mucin5B-like were up-regulated in response to the three hours of aerial exposure in A. veratra. This finding shows a significant role of mucin5B-like and mucin4-like genes in response to air stress at low tide. The data generated from this study could be used in conjunction with future mucin gene studies of sea anemones and other cnidarians to compare A. veratra mucin gene expression results across time, and to extend our understanding of mucin stress response in this phylum. 展开更多
关键词 Aulactinia veratra Mucin4-Like Mucin5B-Like CNIDARIA Mucin Gene Expression RNA-Sequencing Sea Anemones MUCUS Aerial Exposure
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SCN5A基因突变相关儿童心律失常临床分析
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作者 张海燕 姚如恩 许静 《儿科药学杂志》 CAS 2023年第7期48-51,共4页
目的:探讨SCN5A基因突变与儿童心律失常的关系。方法:回顾分析2018年1月至2020年6月我院诊治的8例心律失常合并SCN5A基因突变患儿的临床资料。结果:8例患儿中男7例、女1例,年龄5.5(2.5~7.0)岁。晕厥发作为主要临床表现,发生率为87.5%(7... 目的:探讨SCN5A基因突变与儿童心律失常的关系。方法:回顾分析2018年1月至2020年6月我院诊治的8例心律失常合并SCN5A基因突变患儿的临床资料。结果:8例患儿中男7例、女1例,年龄5.5(2.5~7.0)岁。晕厥发作为主要临床表现,发生率为87.5%(7/8)。其中1例晕厥发作与窦性静止、房扑有关,6例晕厥发作与室性心动过速发生有关。6例发生室性心动过速的患儿中,结合心电图及基因检查,4例诊断为Brugada综合征(Brs),1例为3型长QT间期综合征(LQT3),1例为Brs合并LQT3。3例患儿合并有左心功能射血分数的明显下降。结论:SCN5A基因突变与儿童恶性心律失常有关,需要引起重视,必要时应尽早行基因组测序予以精准的治疗。 展开更多
关键词 scn5a基因 BRUGADA综合征 长QT间期综合征
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SCN5A基因突变致家族性多源希浦系综合征一例 被引量:1
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作者 吕顺 焦鸿瑞 +2 位作者 王小艳 庄敏 牛惠萍 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2023年第5期568-572,共5页
多源希浦系综合征,即MEPPC综合征,是一种心脏钠离子通道病。该综合征是由SCN5A基因突变所致,其临床主要表现为室性心律失常(室性早搏和阵发性室性心动过速)和扩张型心肌病。目前,国内外关于该综合征的报道很少。本文报道一例具有家族性... 多源希浦系综合征,即MEPPC综合征,是一种心脏钠离子通道病。该综合征是由SCN5A基因突变所致,其临床主要表现为室性心律失常(室性早搏和阵发性室性心动过速)和扩张型心肌病。目前,国内外关于该综合征的报道很少。本文报道一例具有家族性发病特征的MEPPC综合征,通过分析该患者临床表现、心电图、超声心动图和基因检测结果,提高临床医师对该综合征的认识,为进一步治疗提供参考。 展开更多
关键词 scn5a基因 多源希浦系综合征 MEPPC综合征 心律失常
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厦门地区三例Brugada综合征患者SCN5A基因突变分析
5
作者 葛高顺 林玲 +1 位作者 倪二茹 谢华斌 《现代检验医学杂志》 CAS 2023年第2期81-85,101,共6页
目的探讨厦门地区3例Brugada综合征患者SCN5A基因突变情况。方法选取2011年1月~2022年6月到厦门大学附属心血管病医院就诊的3例Brugada综合征患者作为观察组,同期20例健康体检者作为对照组,收集两组人群的常规生化与心肌标志物检测结果... 目的探讨厦门地区3例Brugada综合征患者SCN5A基因突变情况。方法选取2011年1月~2022年6月到厦门大学附属心血管病医院就诊的3例Brugada综合征患者作为观察组,同期20例健康体检者作为对照组,收集两组人群的常规生化与心肌标志物检测结果。采集观察组全血后提取基因组DNA,应用高通量测序平台对Brugada综合征相关基因的目标区域测序,再预测蛋白质三维结构,比较国内已报道的Brugada综合征相关新发疑似致病SCN5A基因突变。结果观察组与对照组的常规生化与心肌标志物检测结果均无明显差异,目标区域捕获测序结果显示有2位受检者都携带SCN5A c·219delA移码突变,该突变导致74位的谷氨酸变成了丝氨酸,并产生新的阅读框架,终止于第74号密码子下游23位密码子处,产生一个缩短并变异的RNA以及蛋白。另一位受检者携带SCN5A c·584G>A无义突变,该突变会导致编码蛋白序列提前终止,产生一个截短的蛋白,可能会对蛋白质的结构和功能产生较大影响。这两个点突变都未有文献报道,在各大公共数据库中均没有被检索到,根据美国医学遗传学与基因组学协会(ACMG)评估指南,定义该位点为疑似致病突变的变异。结论SCN5A c·219delA和SCN5A c·584G>A点突变是Brugada综合征的致病原因。 展开更多
关键词 BRUGADA综合征 scn5a 厦门
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过表达TRPM8在SCN5A错义突变后对肥大细胞功能的影响
6
作者 徐伟 杨旸 +3 位作者 朱利红 王迪迪 黄玉荣 杨杰 《贵州医科大学学报》 CAS 2023年第12期1483-1488,1538,共7页
目的探究过表达瞬时受体电位阳离子通道M8(TRPM8)在心脏钠通道基因(SCN5A)错义突变后对肥大细胞功能的影响。方法构建TRPM8基因过表达载体及SCN5A干扰载体并分别转染入人肥大细胞HMC-1中,转染成功后用CCK8检测细胞增殖能力,qPCR、Wester... 目的探究过表达瞬时受体电位阳离子通道M8(TRPM8)在心脏钠通道基因(SCN5A)错义突变后对肥大细胞功能的影响。方法构建TRPM8基因过表达载体及SCN5A干扰载体并分别转染入人肥大细胞HMC-1中,转染成功后用CCK8检测细胞增殖能力,qPCR、Western blot法检测TRPM8与SCN5A的表达情况,中性红染色计算肥大细胞脱颗粒百分率,比色法测定β-氨基己糖苷酶释放率。结果TRPM8基因过表达及SCN5A干扰载体成功构建;与空白对照组相比,过表达TRPM8与干扰SCN5A后均抑制了HMC-1细胞的增殖能力,过表达TRPM8对HMC-1细胞增殖能力的抑制作用低于干扰SCN5A组(P<0.05);与干扰SCN5A组相比,干扰SCN5A的同时过表达TRPM8后对HMC-1细胞增殖能力的抑制作用有所降低(P<0.05);与空白对照组相比,过表达TRPM8降低HMC-1细胞脱颗粒反应和β-氨基己糖苷酶释放率,干扰SCN5A后增强了HMC-1细胞脱颗粒反应和β-氨基己糖苷酶释放率(P<0.05);与干扰SCN5A后相比,在干扰SCN5A的同时过表达TRPM8可降低HMC-1细胞脱颗粒反应和β-氨基己糖苷酶释放率(P<0.05);干扰SCN5A后可下调HMC-1细胞中TRPM8的表达(P<0.05)。结论TRPM8可以抑制SCN5A错义突变后对肥大细胞的激活作用,并可能通过调控SCN5A来减缓肠易激综合征患者疼痛等不适症状。 展开更多
关键词 HMC-1细胞 瞬时受体电位阳离子通道M 8 基因scn5a
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Analysis of functional hub genes indicates DLGAP5 is linked to lung adenocarcinoma prognosis
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作者 HAOSHENG ZHENG RUIJUN LIN +7 位作者 WEIJIE CAI YUZHEN ZHENG XINGPING YANG ZUI LIU FEI QIN YONGJIE CAI XIANYU QIN HONGYING LIAO 《BIOCELL》 SCIE 2023年第11期2453-2469,共17页
Introduction:The difficulty in treating lung adenocarcinoma(LUAD)is caused by a shortage of knowledge about the biological mechanisms and a lack of treatment choices.Objectives:The aim of this study was to identify a ... Introduction:The difficulty in treating lung adenocarcinoma(LUAD)is caused by a shortage of knowledge about the biological mechanisms and a lack of treatment choices.Objectives:The aim of this study was to identify a valuable molecular target for the treatment of LUAD.Methods:Using multiple databases,we screened for hub genes in LUAD using Cytoscape and explored the expression and prognosis of DLG associated protein 5(DLGAP5)in LUAD.We investigated the genetic variation,functional enrichment,and epigenetic activity of DLGAP5.Furthermore,we evaluated the relationship between the tumor microenvironment(TME)and DLGAP5.Results:Our study identified 10 hub genes in LUAD:CDC45,KIAA0101,DLGAP5,CDT1,NCAPG,CCNB1,CDCA5,CDC20,KIF11,and AURKA.We discovered that DLGAP5 was overexpressed and associated with poor prognosis in LUAD.DLGAP5 exhibited an overall genetic variation frequency of 2%,and its DNA promoter was hypomethylated in LUAD(p<0.05).The expression of DLGAP5 in LUAD showed a positive correlation with the majority of N6-methyladenosine(m6A)-methylation genes.Additionally,DLGAP5 was primarily associated with the cell cycle in LUAD.Notably,there was a significant favorable association between DLGAP5 and CD274,CTLA4,HAVCR2,and LAG3 in LUAD.Conclusion:DLGAP5 may be a therapeutic target for LUAD,as it affects cancer cells proliferation and development through the regulation of cell-cycle checkpoints and modulation of immune cell infiltration and immune checkpoints in the TME. 展开更多
关键词 DLGAP5 Lung adenocarcinoma PROGNOSIS Tumor microenvironment Hub genes
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国人SCN5A基因新的同义突变位点 被引量:7
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作者 任法鑫 杨钧国 +4 位作者 李伟 胡骏 袁国会 杜戎 桂乐 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2004年第5期370-372,共3页
目的研究中国人心原性猝死相关基因SCN5A突变位点。方法采用聚合酶链反应和DNA测序对1例RQT间期综合征(LQTs)和2例特发性J波患者SCN5A基因进行突变检测。结果①3例患者在国内、外已知的SCN5A突变位点上,均未发现有突变。②发现1个新的... 目的研究中国人心原性猝死相关基因SCN5A突变位点。方法采用聚合酶链反应和DNA测序对1例RQT间期综合征(LQTs)和2例特发性J波患者SCN5A基因进行突变检测。结果①3例患者在国内、外已知的SCN5A突变位点上,均未发现有突变。②发现1个新的同义突变(T990C),位于钠通道α-亚基的DⅠ区段S5~S6胞外环上。结论这个新的同义突变可能通过影响门控性钠通道的跨膜电流而与恶性心律失常的发生相关。 展开更多
关键词 scn5a基因 同义突变位点 心原性猝死 RQT间期综合征
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Nav1.5/SCN5A基因新的变构体编码人脑组织Nav1.5 Na^+通道 被引量:6
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作者 欧绍武 宗志红 +1 位作者 王军 王运杰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第9期935-944,共10页
河豚毒-抵抗性(TTX-R)Nav1.5 Na+通道是心肌的特异性Na+通道,虽然研究发现神经元中也存在河豚毒-抵抗性Na+电流及Nav1.5/SCN5A mRNA的表达,但其确切的cDNA序列尚不清楚.采用RT-PCR法对人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA进行克隆发现:人脑组... 河豚毒-抵抗性(TTX-R)Nav1.5 Na+通道是心肌的特异性Na+通道,虽然研究发现神经元中也存在河豚毒-抵抗性Na+电流及Nav1.5/SCN5A mRNA的表达,但其确切的cDNA序列尚不清楚.采用RT-PCR法对人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA进行克隆发现:人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA有2种变构体,hB1和hB2(accession number EF629346,EF629347),其中hB1全长6201个碱基,其开放读码框架(ORF)参与编码2016个氨基酸,和人心肌Nav1.5 Na+通道氨基酸序列相同率高达98%,共有28个不同的氨基酸,其中7个集中位于第6A外显子与第6外显子编码区.与人心肌Nav1.5/SCN5A基因cDNA不同的是,在对人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA的克隆中未发现该基因第18外显子的选择性剪接,但却发现其第24外显子的选择性剪接,2种选择性剪接体(hB1和hB2)在脑组织中基本同时表达,表达比率接近1∶1,但在心脏中二者的表达比率却与年龄有关.人Nav1.5/SCN5A基因的第24外显子定位于染色体3P21区,共有54个碱基,参与编码18个氨基酸.RT-PCR法证实第24外显子的选择性剪接也可发生在大鼠心脑之外的其他组织中,竞争性PCR法证明,不同组织中2种选择性剪接体的表达比率不同,且随着周龄的增加,2种选择性剪接体在各组织中表达的变化趋势不同.此外,RT-PCR法还发现Wistar大鼠全身16种组织中均可检测到Nav1.5/SCN5A mRNA的表达.上述实验结果说明,Nav1.5 Na+通道在全身组织中分布广泛,但编码人脑组织Nav1.5 Na+通道与心肌组织该离子通道的cDNA序列不同,是Nav1.5/SCN5A基因的2种变构体,这为深入研究不同组织中Nav1.5 Na+通道的功能提供了基础. 展开更多
关键词 Nav1.5/scn5a基因 基因克隆 选择性剪接 脑组织
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Brugada综合征SCN5A基因G1712C突变的功能分析 被引量:4
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作者 陈燕玉 刘深荣 +5 位作者 谢亮真 朱庭延 陈益臻 邓晓江 孟素荣 彭健 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期256-260,共5页
目的探讨Brugada综合征SCN5A基因新突变G1712C的电生理机制。方法采用体外定点诱变法构建携带有基因突变G1712C的p Rc/CMV-h H1的表达载体,lipo3000脂质转染法建立稳定表达p GFP-IRES-hβ1质粒的HEK293细胞系,并用G418进行筛选鉴定。分... 目的探讨Brugada综合征SCN5A基因新突变G1712C的电生理机制。方法采用体外定点诱变法构建携带有基因突变G1712C的p Rc/CMV-h H1的表达载体,lipo3000脂质转染法建立稳定表达p GFP-IRES-hβ1质粒的HEK293细胞系,并用G418进行筛选鉴定。分别做野生型的p Rc/CMV-h H1(h H1)和携带有基因突变G1712C的p Rc/CMV-h H1(mh H1)瞬时转染表达。进行全细胞膜片钳实验记录钠通道电流。实验结果由Patch Master以及IGOR Pro 6.0软件分析。结果 G1712C位于Na+通道蛋白α亚单位的DⅣ区S5与S6之间的P-loop上。在瞬时转染野生型的h H1的细胞系中,指令电位从-60 m V逐渐上升时,钠电流也渐变大,在-20 m V时完全激活;激活电压在-60 m V到-50 m V,反转电位在50 m V左右。在瞬时转染突变型G1712C的细胞系中,没有发现钠电流。结论野生型h H1所表达的钠通道蛋白与正常心肌细胞钠通道电生理特性相似。SCN5A基因G1712C突变导致Nav1.5通道失去功能,可能是该家系Brugada综合征的病因。 展开更多
关键词 BRUGADA综合征 scn5a基因 G1712C 钠电流
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Brugada综合征一家系中2例患者的SCN5A基因突变及意义 被引量:2
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作者 田莉 张凌 +2 位作者 祝建芳 杜戎 柯琴梅 《山东医药》 CAS 2013年第41期11-12,15,共3页
目的观察Brugada综合征一家系中2例患者的SCN5A基因突变情况,并探讨其意义。方法选择Brugada综合征一家系2例患者,采用直接测序法对其SCN5A基因突变进行检测。结果该家系中发现1个纯合变异,即SCN5A基因第28外显子上的同义变异(C5457T),... 目的观察Brugada综合征一家系中2例患者的SCN5A基因突变情况,并探讨其意义。方法选择Brugada综合征一家系2例患者,采用直接测序法对其SCN5A基因突变进行检测。结果该家系中发现1个纯合变异,即SCN5A基因第28外显子上的同义变异(C5457T),其所编码的1819位天冬氨酸密码子没有发生改变。结论该Brugada综合征家系2例患者的SCN5A基因上存在1个同义变异,但SCN5A基因不是患者的致病基因。 展开更多
关键词 BRUGADA综合征 scn5a基因 突变
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硒对异丙肾上腺素致损伤大鼠心肌SCN5A基因表达的影响 被引量:3
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作者 李凤兰 李晖 +5 位作者 范启明 杨宝峰 于卓 陈诗慧 金剑峰 马宁 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期285-287,共3页
目的研究异丙肾上腺素(ISP)致大鼠心肌损伤模型中,编码电压门控Na+通道α亚单位基因SCN5A表达的变化,以及硒对其表达的影响。方法24只Wistar大鼠雌雄各半,随机分为3组,即对照组、ISP组、硒+ISP组。测定心肌丙二醛(MDA)的水平;采用逆转... 目的研究异丙肾上腺素(ISP)致大鼠心肌损伤模型中,编码电压门控Na+通道α亚单位基因SCN5A表达的变化,以及硒对其表达的影响。方法24只Wistar大鼠雌雄各半,随机分为3组,即对照组、ISP组、硒+ISP组。测定心肌丙二醛(MDA)的水平;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blot方法检测心肌SCN5A基因的表达变化。结果与ISP组比较,硒+ISP组MDA显著降低(P<0.05),但高于对照组(P<0.05);ISP组SCN5A基因mRNA和蛋白的表达均较对照组显著增加,而硒+ISP组降低其表达。结论异丙肾上腺素可使心肌SCN5A基因mRNA和蛋白的表达显著增高;硒对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤有保护作用并能逆转ISP引起的SCN5A基因表达的改变。 展开更多
关键词 异丙肾上腺素 亚硒酸钠 大鼠 心肌 scn5a 基因表达 心肌细胞
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心脏传导阻滞SCN5A基因L1001Q突变体构建和功能研究 被引量:2
13
作者 周熙惠 惠智艳 +4 位作者 史瑞明 高锦伟 梁潇 李溪 肖丹丹 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期593-597,616,共6页
目的对作者发现的一个中国3代人心脏传导阻滞家系SCN5A基因新突变L1001Q,构建突变表达载体,利用分子生物学方法和全细胞膜片钳技术观察L1001Q突变的功能。方法一步定点诱变法构建pEGFP-L1001Q-SCN5A突变体;激光共聚焦和Western blottin... 目的对作者发现的一个中国3代人心脏传导阻滞家系SCN5A基因新突变L1001Q,构建突变表达载体,利用分子生物学方法和全细胞膜片钳技术观察L1001Q突变的功能。方法一步定点诱变法构建pEGFP-L1001Q-SCN5A突变体;激光共聚焦和Western blotting技术检测突变蛋白定位和表达;全细胞膜片钳技术观察突变体钠电流。结果野生型和L1001Q突变均表达在细胞膜上,且表达量无明显变化。二者最大激活电流分别为(148.34±0.77)pA/pF和(132.59±0.96)pA/pF(P>0.05),L1001Q突变半失活电压V1/2为(-73.25±0.87)mV,较野生型正向转移约3.5mV[V1/2为(-76.71±0.73)mV,P<0.05],L1001Q突变失活后恢复时间常数较野生型稍减小,差异无统计学意义(WT tau=16.8ms,L1001Qtau=14.1ms,P>0.05)。结论 L1001Q突变未影响钠通道蛋白的表达和转运,主要通过改变钠通道门控特性引起钠通道功能减弱进而导致心脏传导阻滞。 展开更多
关键词 钠通道 scn5a 心脏传导阻滞 膜片钳 基因突变 基因表达载体
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低氧对大鼠心肌细胞蛋白激A活性与SCN5A基因表达的影响 被引量:2
14
作者 马宁 李凤兰 +3 位作者 陈诗慧 李金波 刘端阳 李晖 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 北大核心 2009年第1期1-4,8,共5页
目的研究低氧对培养大鼠心肌细胞蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)与SCN5A基因表达的影响。方法将原代培养的大鼠乳鼠心肌细胞随机分为5组:对照组、低氧(5%CO2+2%O2+93%N2)培养1h组、6 h组、12 h组和24 h组,利用非放射性方法测定各组细... 目的研究低氧对培养大鼠心肌细胞蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)与SCN5A基因表达的影响。方法将原代培养的大鼠乳鼠心肌细胞随机分为5组:对照组、低氧(5%CO2+2%O2+93%N2)培养1h组、6 h组、12 h组和24 h组,利用非放射性方法测定各组细胞内PKA活性,利用RT-PCR和Western blot等方法检测各组SCN5A基因表达情况。结果各组PKA活性:低氧1h组和低氧6 h组高于正常组(P<0.01),低氧12 h组和24 h组低于正常组(P<0.01)。SCN5AmRNA相对表达量与蛋白质表达量:低氧1h组和低氧6h组显著高于对照组;低氧12 h组和低氧24 h组显著低于对照组。结论低氧对培养细胞内PKA活性与SCN5A基因的表达有一定调节作用,且对PKA的作用早于对SCN5A基因表达的作用,PKA可能参与影响大鼠心肌细胞缺氧后SCN5A基因的表达。 展开更多
关键词 蛋白激酶A 心肌细胞 低氧 scn5a
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钠通道重叠综合征相关基因SCN5A在H9C2细胞中的表达 被引量:2
15
作者 高洁 史瑞明 +3 位作者 吕颖 张军波 马爱群 孙超峰 《新乡医学院学报》 CAS 2015年第11期975-980,共6页
目的构建表型重叠家系相关基因SCN5A del QKP1507-1509突变型真核表达载体,研究其在H9C2细胞中的表达。方法一步法定点诱变技术构建SCN5A基因del QKP1507-1509突变型真核表达载体,电穿孔方法将野生型和突变型质粒转染至H9C2细胞,应用实... 目的构建表型重叠家系相关基因SCN5A del QKP1507-1509突变型真核表达载体,研究其在H9C2细胞中的表达。方法一步法定点诱变技术构建SCN5A基因del QKP1507-1509突变型真核表达载体,电穿孔方法将野生型和突变型质粒转染至H9C2细胞,应用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)及Western blot技术检测其mRNA及蛋白表达情况。结果琼脂糖凝胶电泳法及DNA直接测序法均表明定点突变成功,RFQ-PCR及Western blot结果显示,野生组、突变组和混合组SCN5A基因mRNA相对表达量分别为1.089±0.459、1.011±0.840和1.069±0.492,3组SCN5A基因mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。野生组、突变组和混合组SCN5A蛋白在H9C2细胞的相对表达量分别为3.781±0.221、3.466±0.176和3.714±0.198,3组SCN5A蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功构建钠通道基因del QKP1507-1509突变型真核表达载体并转染至H9C2细胞,该突变未引起钠通道在细胞膜的异常表达,为进一步功能研究提供了研究基础及方向。 展开更多
关键词 钠通道 scn5a基因 重叠综合征 H9C2细胞
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国人确诊及疑似Brugada综合征患者SCN5A基因变异筛查 被引量:4
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作者 仇晓亮 刘文玲 +4 位作者 胡大一 路亚枫 李蕾 孙艺红 李翠兰 《中国心脏起搏与心电生理杂志》 北大核心 2009年第3期204-208,共5页
目的探讨国人Brugada综合征(BrS)患者及疑似者中SCN5A基因变异情况。方法对5例确诊和12例疑似BrS患者及部分家属进行临床分析并随访,用直接测序法检测SCN5A基因多态/突变情况。结果在1例确诊者中发现R1913C错义突变;在17例患者中共发现1... 目的探讨国人Brugada综合征(BrS)患者及疑似者中SCN5A基因变异情况。方法对5例确诊和12例疑似BrS患者及部分家属进行临床分析并随访,用直接测序法检测SCN5A基因多态/突变情况。结果在1例确诊者中发现R1913C错义突变;在17例患者中共发现10种单核苷酸多态性(SNPs)位点,分别为G87A、703+130G>A、1141-3C>A、A1673G、G3578A、3840+73G>A、4245+81G>T、4245+82A>G、4299+53T>C、T5457C。其中在1例疑似患者中发现的位点4245+81G>T为首次报道。结论首次在BrS患者中发现R1913C突变;同时在一例疑似患者中发现了1种新SNP4245+81G>T。 展开更多
关键词 心血管病学 BRUGADA综合征 scn5a 突变 单核苷酸多态性
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青壮年不明原因夜间睡眠中猝死SCN5A基因型研究 被引量:2
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作者 侯一丁 刘超 +3 位作者 唐双柏 李越 刘长晖 成建定 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期124-130,共7页
【目的】研究中国汉族人群青壮年不明原因夜间睡眠中猝死(SMDS)病例的SCN5A基因型特征。【方法】选取120例中国汉族人群散发SMDS病例,提取其基因组DNA,对PCR产物(包含编码区及外显子-内含子拼接区)进行直接测序。鉴定基因内的遗传变异,... 【目的】研究中国汉族人群青壮年不明原因夜间睡眠中猝死(SMDS)病例的SCN5A基因型特征。【方法】选取120例中国汉族人群散发SMDS病例,提取其基因组DNA,对PCR产物(包含编码区及外显子-内含子拼接区)进行直接测序。鉴定基因内的遗传变异,以相同人群健康组作对照。【结果】120例SMDS散发病例中共发现SCN5A的11个突变位点,其中,Y1434Y、L1566L为编码区同义突变,V95I、R121Q、R367H、R1512W为已报道的错义突变,R513H、D870H、V1202M、V1764D、S1937F为本研究新发现的错义突变。【结论】首次较全面地获得了中国人SMDS病例SCN5A基因型特征,丰富了SMDS的分子病理学数据库,同时,为进一步探索心脏钠离子通道功能异常与SMDS发病机制的相关性提供了新的信息。 展开更多
关键词 青壮年不明原因夜间睡眠中猝死 scn5a基因 突变
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表达心脏SCN5A基因的人胚肾细胞钠电流特性及其对钠通道阻滞剂的反应性 被引量:2
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作者 刘洋 Hector Barajas-Martinez +5 位作者 阮磊 全小庆 张存泰 王琳 胡丹 白融 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期1-7,共7页
目的利用人胚肾293细胞表达心脏钠通道SCN5A基因并研究其钠电流特性和对钠通道阻滞剂的反应性。方法野生型SCN5A基因和SCN1B基因共表达于人胚肾293细胞,应用全细胞膜片钳技术记录给药(氟卡尼与利多卡因)前后的钠电流。结果 SCN5A基因转... 目的利用人胚肾293细胞表达心脏钠通道SCN5A基因并研究其钠电流特性和对钠通道阻滞剂的反应性。方法野生型SCN5A基因和SCN1B基因共表达于人胚肾293细胞,应用全细胞膜片钳技术记录给药(氟卡尼与利多卡因)前后的钠电流。结果 SCN5A基因转染效率约为60%;测试电压为-40mV时记录到钠电流峰值大小约为-8nA;100μmol/L的氟卡尼轻度抑制钠电流,使钠电流峰值减少(21.1±4.6)%[(-435.8±30.5)pA/pF vs.(-343.9±27.1)pA/pF,P<0.01];氟卡尼使钠通道激活曲线和失活曲线均呈负向移动,改变的幅值分别是-6.08mV[(-51.88±1.20)mVvs.(-57.96±0.79)mV,P<0.05]和-9.08mV[(-94.12±0.13)mVvs.(-103.20±0.11)mV,P<0.05];1Hz和10Hz频率刺激时,氟卡尼使钠电流分别减少(64.5±10.7)%和(83.5±12.2)%(P<0.01);30μmol/L利多卡因使钠通道失活后快恢复时间常数和慢恢复时间常数分别延长2倍和3倍。结论表达心脏钠通道SCN5A基因的人胚肾293细胞模型可用于基因特异性的钠通道阻滞剂安全性与药效学筛查。 展开更多
关键词 人胚肾细胞 心脏钠通道 scn5a基因 钠通道阻滞剂 细胞模型
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遗传性长QT综合征HERG基因及SCN5A基因新突变 被引量:4
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作者 艾旭光 李凌 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2009年第5期619-623,共5页
目的:研究长QT综合征患者基因突变、致病机制及其与临床表型之间的关系。方法:分析长QT综合征患者的临床表现、心电图特点,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增长QT综合征的常见突变基因KCNQ1,HERG,SCN5A的全部外显子及外显子与内含子连接部位,... 目的:研究长QT综合征患者基因突变、致病机制及其与临床表型之间的关系。方法:分析长QT综合征患者的临床表现、心电图特点,应用聚合酶链式反应(PCR)扩增长QT综合征的常见突变基因KCNQ1,HERG,SCN5A的全部外显子及外显子与内含子连接部位,DNA直接测序检测基因突变位点。应用实时定量PCR方法测定一个家系的成员基因表达量,以探讨其可能的致病机制。结果:在5个长QT综合征家系中,发现2个HERG基因突变位点及1个SCN5A基因突变位点,分别为HERG基因C1848A、G1120T和SCN5A基因G638T。其中HERG基因C1848A突变引起616位酪氨酸转变为终止密码子(Y616X),G1120T突变引起374位缬氨酸转变为苯丙氨酸(V374F);SCN5A基因G638T突变引起213位甘氨酸转变为缬氨酸(G213V)。HERG基因Y616X突变患者家族成员外周血mRNA表达量分析,发现其HERG基因mRNA表达量明显低于无突变者。结论:发现3个长QT综合征相关的基因新突变位点,两个突变位于HERG基因,另一个位于SCN5A基因。其中HERG基因无义突变Y616X引起mRNA表达量减少,可能受无义突变介导的RNA降解(Nonsense Mediated Decay,NMD)机制有关,从而引起较轻微的临床症状。 展开更多
关键词 长QT综合征 HERG scn5a 突变 无义突变 NMD
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中国汉族人Brugada综合征患者SCN5A基因Ⅳ区一个新的突变 被引量:1
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作者 黄峥嵘 陈良龙 +6 位作者 李卫华 谢强 范林 方军 吴钢 唐其柱 黄从新 《中华高血压杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1018-1022,共5页
背景 Brugada 综合征是一种易导致猝死的具有遗传倾向的疾病,与编码心肌钠通道的基因突变有关。目的研究中国 Brulgada 综合征患者 SCN5A 基因的碱基改变情况。方法对15例先证者及家系进行直接SCN5A 基因测序。DNA 来源于患者外周血白... 背景 Brugada 综合征是一种易导致猝死的具有遗传倾向的疾病,与编码心肌钠通道的基因突变有关。目的研究中国 Brulgada 综合征患者 SCN5A 基因的碱基改变情况。方法对15例先证者及家系进行直接SCN5A 基因测序。DNA 来源于患者外周血白细胞。全部28个外显子通过设计的40对引物进行 PCR 扩增,扩增后的产物直接测序。结果在一个家系上发现了一个错义突变,即 G5080A(R1628Q),该突变导致心肌细胞钠通道的α亚基第Ⅳ结构域的第4片段发生改变。在150个正常对照者未发现此碱基改变。结论 G5080A(R1628Q)可能是中国 Brugada 综合征患者 SCN5A 基因新的突变位点。 展开更多
关键词 BRUGADA综合征 scn5a基因 钠通道 猝死
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