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WDR45L大鼠同源基因编码区cDNA的克隆及生物信息学分析
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作者 王海涛 畅继武 郭志 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第14期1050-1053,共4页
目的:克隆肿瘤相关基因WDR45L的大鼠同源基因,并进行初步的生物信息学分析。方法:以人WDR45L同源氨基酸序列(CAJ57996.1)作为查询序列,利用TBLASTN和BLASTN软件搜索数据库中与大鼠WDR45L基因同源的cDNA和EST序列。把检出序列组装为连续... 目的:克隆肿瘤相关基因WDR45L的大鼠同源基因,并进行初步的生物信息学分析。方法:以人WDR45L同源氨基酸序列(CAJ57996.1)作为查询序列,利用TBLASTN和BLASTN软件搜索数据库中与大鼠WDR45L基因同源的cDNA和EST序列。把检出序列组装为连续体(Contig),在UCSC程序上进行EST连续体序列的拼接和基因组序列与EST序列的双重校对。克隆基因采用RT-PCR测序证实,并进行核酸与蛋白质特性的生物信息学分析。结果:综合利用基因组和EST序列信息成功克隆了大鼠WDR45L基因(GenBank登记号:AM182327和NM_001039587.1)。RT-PCR测序结果与计算机克隆结果完全一致。生物信息学分析显示:WDR45L基因定位于染色体10q32.3区,含11个外显子和10个内含子,ORF为1035bp,编码344个氨基酸;在种属中高度保守;WDR45L基因在胃癌、结肠癌、乳腺癌、卵巢癌、肾癌和胰腺癌等恶性肿瘤中表达上调。结论:综合利用基因组和EST序列信息是更为科学的计算机克隆方法,进一步深入研究WDR45L基因的功能具有重要生物学意义。 展开更多
关键词 生物信息学 计算机克隆 种属同源基因 wdr45L
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p53基因突变对胶质母细胞瘤细胞Connexin45蛋白表达影响
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作者 刘欣然 郇雪洁 +3 位作者 杜希恂 陈曦 焦倩 姜宏 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2024年第4期475-477,共3页
目的探究p53基因突变对胶质母细胞瘤细胞连接蛋白45(Connexin45)表达的影响。方法培养胶质母细胞瘤细胞U87细胞(p53野生型)和U251细胞(p53突变型),使用免疫印迹法检测两种细胞P53和Con-nexin45蛋白的表达。结果与U87细胞相比,U251细胞中... 目的探究p53基因突变对胶质母细胞瘤细胞连接蛋白45(Connexin45)表达的影响。方法培养胶质母细胞瘤细胞U87细胞(p53野生型)和U251细胞(p53突变型),使用免疫印迹法检测两种细胞P53和Con-nexin45蛋白的表达。结果与U87细胞相比,U251细胞中P53蛋白和Connexin45蛋白的表达均明显降低,差异均有统计学意义(t=6.054、4.199,P<0.05)。结论p53突变可能会引起胶质母细胞瘤细胞Connexin45蛋白的表达降低。 展开更多
关键词 基因 p53 突变 胶质母细胞瘤 细胞 连接蛋白45
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A Novel WDR45 Mutation in a 9-Month-Old Male Infant with Epileptic Spasms
3
作者 Wan-Ting Liu Qian Chen +3 位作者 Zhi-Jie Gao Xin-Na Ji Ke-Ming Xu Yan-Yan Cao 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 2018年第24期2991-2992,共2页
To the Editor:Neurodegeneration with brain iron accumulation (NBIA)comprises a group of disorders that manifest as early-or late-onset parkinsonism,dystonia,spasticity,and cognitive impairment, One subtype of NBIA,β-... To the Editor:Neurodegeneration with brain iron accumulation (NBIA)comprises a group of disorders that manifest as early-or late-onset parkinsonism,dystonia,spasticity,and cognitive impairment, One subtype of NBIA,β-propeller protein-associated neurodegeneration (BPAN),is caused by mutation of the WDR45 gene.To date,59 novel WDR45 mutations have been reported.The literature indicates that it is difficult to detect the disorder in early childhood because no specific clinical or imaging features exist. In this report,we describe the case of a 9-month-old male Chinese infant with a novel mutation (c.977-1 C >T)in the WDR45 gene. 展开更多
关键词 wdr45 MUTATION MALE INFANT Epileptic SPASMS
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Chronology of Bioactive Glass Development and Clinical Applications 被引量:2
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作者 Larry L. Hench 《New Journal of Glass and Ceramics》 2013年第2期67-73,共7页
The key research and development steps for bioactive glass (45S5 Bioglass) are documented from the date of discovery in 1969 through FDA approvals of the first dental, ENT, maxillo-facial and orthopedic clinical produ... The key research and development steps for bioactive glass (45S5 Bioglass) are documented from the date of discovery in 1969 through FDA approvals of the first dental, ENT, maxillo-facial and orthopedic clinical products. Understanding the mechanisms and quantifying the rapid surface reactions to form a bone-bonding hydroxyl-carbonate apatite (HCA) layer on the bioactive glass in contact with living bone was a vital part of the early development of this class of biomaterials. A key later discovery was enhanced osteogenesis and in situ bone regeneration by controlled release of ionic dissolution products from the bioactive glass particulates that leads to up-regulation and activation of seven families of genes, a process called osteostimulation. 展开更多
关键词 Bioactive Glass 45S5 BIOGLASS Hydroxyl-Carbonate Apatite (HCA) Bone-Bonding OSTEOgenesIS Regeneration genes Dental ENT Maxillo-Facial ORTHOPEDICS Clinical Osteostimulation
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2例神经退行性变伴脑铁沉积症5型患儿临床及遗传学分析 被引量:1
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作者 赵敏 冯英 +4 位作者 陈玉霞 刘玲 黄琴蓉 肖农 江伟 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第11期820-823,830,共5页
目的探讨神经退行性变伴脑铁沉积症5型(NBIA5)患儿的临床及遗传学特征。方法分析2例NBIA5患儿临床表现及影像学结果,并用全外显子检测技术对患儿及家系进行WDR45基因测序。结果患儿分别为10个月男性和3岁10个月女性,均有全面性发育迟缓... 目的探讨神经退行性变伴脑铁沉积症5型(NBIA5)患儿的临床及遗传学特征。方法分析2例NBIA5患儿临床表现及影像学结果,并用全外显子检测技术对患儿及家系进行WDR45基因测序。结果患儿分别为10个月男性和3岁10个月女性,均有全面性发育迟缓。1例有疑似癫痫发作史,MRI提示脑实质进行性萎缩;另1例有癫痫病史,MRI提示双侧苍白球T2WI及T2Flair上信号稍高。基因测序显示均存在WDR45基因突变,1例为未见报道的第6外显子c.276-c 277 insC移码突变,另1例为已有报道的第3外显子c. 19 C>T提前终止;2例患儿父母均为WDR45野生型。结论 WDR45全外显子基因测序结合病史及MRI可诊断NBIA5。 展开更多
关键词 神经退行性变伴脑铁沉积症5型 wdr45基因 基因突变 全外显子测序 X连锁显性遗传
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45,X,der(Y)t(Y;13)不育男性患者的临床细胞和分子遗传学研究 被引量:9
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作者 崔英霞 夏欣一 +7 位作者 卢洪涌 潘连军 邵永 姚兵 戈一峰 王国洪 李晓军 黄宇烽 《医学研究生学报》 CAS 2008年第11期1168-1171,I0015,共5页
目的:了解核型为45,X,der(Y)t(Y;13)(q11.1;q12),-13伴无精子症、双侧乳腺轻微发育和多发性皮下结节男性患者的分子遗传学特点。方法:进行常规染色体核型分析,用荧光原位杂交(FISH)进一步确定患者核型。用PCR-STSs以确定Yq上的断裂点。... 目的:了解核型为45,X,der(Y)t(Y;13)(q11.1;q12),-13伴无精子症、双侧乳腺轻微发育和多发性皮下结节男性患者的分子遗传学特点。方法:进行常规染色体核型分析,用荧光原位杂交(FISH)进一步确定患者核型。用PCR-STSs以确定Yq上的断裂点。用DNA多态性方法检测位于13q12上的BRCA 2基因拷贝数。对患者的睾丸和皮下结节进行活检。结果:细胞遗传学和FISH证实患者SRY基因和Y染色体着丝粒位于13号染色体上。因此,患者核型为45,X,der(Y)t(Y;13)(q11.1;q12),-13.ish der(Y)(SRY+,DYZ3+,wcp13+)。Y染色体长臂上的AZFa,b,和C区域全部丢失,断裂点位于sY82以下。BRCA2基因的多态性检测无拷贝数的丢失。睾丸活检结果为唯支持细胞综合征。皮下结节病理检查为血管脂肪瘤。结论:患者的男性表型是由于基因组中存在SRY基因。无精子症、睾丸体积小与病理结果一致,是由于Y染色体Yq11.1→Yqter片段丢失所致。但血管脂肪瘤的分子机制仍然不清楚。 展开更多
关键词 45 X男性 Y常/染色体易位 无精子症 SRY基因 血管脂肪瘤 不育男性患者 分子遗传学
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电离辐射对人外周血淋巴细胞GADD45基因表达的影响 被引量:17
7
作者 徐丽昕 艾辉胜 +5 位作者 蒋本荣 姚波 余长林 郭梅 黄雅静 孙琪云 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期111-114,共4页
观察生长抑制和DNA损伤基因45(Growth arrest and DNA damage gene 45,GADD45)X射线照射后表达的改变,并研究其与照射剂量之间的关系。外周血给予0-5 GyX线照射后分离出单个核细胞并培养,在不同时间点上用反转录聚合酶链反应(Reverse tr... 观察生长抑制和DNA损伤基因45(Growth arrest and DNA damage gene 45,GADD45)X射线照射后表达的改变,并研究其与照射剂量之间的关系。外周血给予0-5 GyX线照射后分离出单个核细胞并培养,在不同时间点上用反转录聚合酶链反应(Reverse transcriptase-Polymerase clain reaction,RT-PCR)的方法测定 GADD45基因的相对表达量,分析该基因的剂量、效应关系。照射后GADD45基因在转录水平表达呈剂量依赖性增加,照射后4h达峰值,以后开始下降,但在24h仍未恢复到初始水平。 展开更多
关键词 研究生长抑制 DNA损伤基因45 生物剂量计 基因表达 反转录聚合酶链反应
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血管形成抑制因子tumstatin_(45-132)的基因克隆、表达和生物学活性 被引量:3
8
作者 罗以勤 王梁华 +1 位作者 球谊 焦炳华 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期141-143,共3页
 目的: 克隆人tumstatin全长编码区基因及编码tum statin45-132的基因, 在大肠杆菌中表达。方法: 采用RT PCR从人胚肾细胞系 293细胞中克隆人的tumstatin全长编码基因, 继以PCR扩增tumstatin45-132 (45 -132位氨基酸 )编码基因, PCR产...  目的: 克隆人tumstatin全长编码区基因及编码tum statin45-132的基因, 在大肠杆菌中表达。方法: 采用RT PCR从人胚肾细胞系 293细胞中克隆人的tumstatin全长编码基因, 继以PCR扩增tumstatin45-132 (45 -132位氨基酸 )编码基因, PCR产物克隆到pBV220载体中, 测序证实后, 转化E.coliBL21, 于 42℃进行热诱导表达。用SDS -PAGE分析表达产物, 对重组蛋白纯化后用内皮细胞增殖试验测定其生物学活性。结果: RT- PCR扩增出tumstatin全长编码基因, 以PCR扩增出tumstatin45-132的编码基因, 经序列分析证实与GenBank中的序列完全一致。以含有tumstatin45-132编码基因的表达载体转化E.coliBL21后, 可表达出相对分子质量(Mr)为 9 600的重组蛋白。表达产物的蛋白量占菌体蛋白量的 10%, 纯化后能抑制内皮细胞的增殖。结论: 成功克隆全长tumstatincDNA, 并在大肠杆菌中表达重组tumstatin45-132蛋白, 证实其具有抑制内皮细胞增殖的活性。 展开更多
关键词 tumstatin45-132基因 表达 生物学活性
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乳酸乳球菌Lactococcus lactis 1.2472 usp 45基因的克隆与原核表达 被引量:3
9
作者 叶飞 李昌 +4 位作者 任大勇 秦艳青 朱翯 杜寿文 金宁一 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2014年第7期36-38,41,共4页
从乳酸乳球菌Lactococcus lactis 1.2472基因组中PCR扩增usp 45基因,与pMD-18T载体连接获pT-usp 45质粒;酶切鉴定并测序正确后,将usp 45基因克隆入原核表达载体pET-28a,获重组质粒pET-28a-usp 45,转入E.coli BL21(DE3);经IPTG诱导表达... 从乳酸乳球菌Lactococcus lactis 1.2472基因组中PCR扩增usp 45基因,与pMD-18T载体连接获pT-usp 45质粒;酶切鉴定并测序正确后,将usp 45基因克隆入原核表达载体pET-28a,获重组质粒pET-28a-usp 45,转入E.coli BL21(DE3);经IPTG诱导表达及镍亲和层析纯化,由SDS-PAGE和Westren blot进行鉴定。结果表明,本试验获得1 371 bp长度的usp 45基因,构建pET-28a-usp 45质粒,诱导表达并纯化分子量约50 kDa的目的蛋白,为进一步研究usp 45蛋白奠定基础。 展开更多
关键词 乳酸菌 USP 45基因 分泌蛋白 原核表达
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恶性疟原虫杂合45肽抗原与乙肝病毒表面抗原融合基因在酵母中表达 被引量:6
10
作者 陈爱社 管惟滨 +1 位作者 方振伟 王昌才 《中国寄生虫病防治杂志》 CSCD 1997年第3期161-164,共4页
通过PCR扩增HBsAg基因的S片段,然后将S基因与恶性疟原虫杂合45肽基因连接并克隆到酵母表达质粒pYEUra3上。重组质粒被转化到酵母受体菌中。融合基因在酵母中获得表达,表达产物HBsAg/45肽,该融合蛋白经亲... 通过PCR扩增HBsAg基因的S片段,然后将S基因与恶性疟原虫杂合45肽基因连接并克隆到酵母表达质粒pYEUra3上。重组质粒被转化到酵母受体菌中。融合基因在酵母中获得表达,表达产物HBsAg/45肽,该融合蛋白经亲合层析后被纯化。电镜观察到HBsAg/45肽呈颗粒状。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 融合基因 HBsAg/45肽 酵母表达
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脂联素基因多态性与新疆地区哈萨克族2型糖尿病的相关性研究 被引量:6
11
作者 康小龙 唐孝龙 何承辉 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期454-457,共4页
目的研究脂联素基因(APM-1)45T/G单核苷酸多态性(SNPs)与新疆地区哈萨克族人2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法采用病例—对照研究方法,应用聚合酶链反应—限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,比较新疆地区哈萨克族人正常糖耐量组(N... 目的研究脂联素基因(APM-1)45T/G单核苷酸多态性(SNPs)与新疆地区哈萨克族人2型糖尿病(T2DM)的相关性。方法采用病例—对照研究方法,应用聚合酶链反应—限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,比较新疆地区哈萨克族人正常糖耐量组(NGT)和T2DM组APM-1 SNP45基因型与等位基因分布频率差异;比较不同基因型血清APM-1水平以及NGT组不同基因型体测与生化指标的差异。结果 NGT组与T2DM组相比较,APM-1 SNP45位点基因型与等位基因频率以及血清APM-1水平差异均无统计学意义(P>0.05);NGT组TG+GG基因型者体质指数(BMI)、腰围(WAIST)、腰臀比(WHR)及血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(CH)和低密度脂蛋白(LDL)水平显著高于TT基因型者(P<0.05),高密度脂蛋白(HDL)水平显著低于TT基因型者(P<0.01)。结论 APM-1 SNP45T/G多态位点可能与新疆地区哈萨克族T2DM无相关性。 展开更多
关键词 脂联素基因 单核苷酸多态性 2型糖尿病 哈萨克族
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45S rDNA基因的不稳定性及其与转录的相关性 被引量:3
12
作者 黄敏 周玲 +2 位作者 黄婧 徐安莉 王平 《激光生物学报》 CAS 2017年第2期151-155,共5页
45S rDNA基因由串联重复序列构成,是遗传不稳定性的热点区域,易于发生DNA断裂和重组。以Hela和CHO细胞系为研究对象,运用荧光原位杂交技术检测有丝分裂不同时期的45S rDNA基因的不稳定性表型。结果表明,位点特异性的染色体浓缩失败是其... 45S rDNA基因由串联重复序列构成,是遗传不稳定性的热点区域,易于发生DNA断裂和重组。以Hela和CHO细胞系为研究对象,运用荧光原位杂交技术检测有丝分裂不同时期的45S rDNA基因的不稳定性表型。结果表明,位点特异性的染色体浓缩失败是其在中期染色体上不稳定性的主要表型。具有这种表型的染色体在后期可能会出现落后或粘连现象,甚至有可能引发断裂,形成卫星核。同时,免疫荧光双染色技术检测表明DNA双链断裂的标记蛋白(γH2AX)和RNA聚合酶I的上游结合因子(UBF)在有丝分裂的不同时期都存在共定位现象。该结果为探讨45S rDNA基因的不稳定性与转录的关系提供了直观的细胞学证据。 展开更多
关键词 45S RDNA基因 不稳定性 转录 荧光原位杂交技术 免疫荧光双染色技术
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普通烟草WDR基因的克隆与序列分析
13
作者 雷波 陈伟 +2 位作者 王茂胜 潘文杰 李继新 《中国烟草科学》 CSCD 北大核心 2010年第4期14-19,共6页
在烟草腺毛的发育中,WD40-bHLH-MYB复合体起着重要的调控作用。利用RT-PCR从云烟85中克隆得到一条普通烟草(Nicotiana tobacum)WDR(NtWDR)全长cDNA序列,GeneBank登录号为GQ260131。NtWDR基因cDNA全长1433bp,具有一个1029bp的开放阅读框(... 在烟草腺毛的发育中,WD40-bHLH-MYB复合体起着重要的调控作用。利用RT-PCR从云烟85中克隆得到一条普通烟草(Nicotiana tobacum)WDR(NtWDR)全长cDNA序列,GeneBank登录号为GQ260131。NtWDR基因cDNA全长1433bp,具有一个1029bp的开放阅读框(ORF)、一个147bp的5′非翻译区和一个257bp的3′非翻译区。该基因编码一个342aa的蛋白质,预测的分子量为38.49kDa,等电点为4.81。BLASTs和NCBI保守域收索表明,NtWDR是AN11/TTG1型WD40蛋白。系统进化和结构特征分析表明,NtWDR基因是PhAN11和Le113964R基因的垂直同源基因。 展开更多
关键词 普通烟草 WDR 腺毛 基因克隆
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Polymorphism of Intron 14 of Porcine CACNA2D1 Gene and Effects on Muscular pH_(45)
14
作者 李建华 吕帮玉 杨明生 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2009年第2期1-4,共4页
[ Objective] To detect polymorphism of intron 14 of porcine CACNA2Dt gene and thus provide conditions for the marker-assisted selec- tion of pork quality traits. [Method] The polymorphism of the exon 14 and intron 14 ... [ Objective] To detect polymorphism of intron 14 of porcine CACNA2Dt gene and thus provide conditions for the marker-assisted selec- tion of pork quality traits. [Method] The polymorphism of the exon 14 and intron 14 of porcine CACNA2D1 gene was detected in six breeds by PCR- SSCP. The genetic effects of different genotypes on the pH45 value of eye muscle and ham joint muscle were also analyzed. I-Result] There were three kinds of genotypes, namely, AA, AG and GG, in the intron 14 of porcine CACNA2 DI gene. The polymorphic locus ( G --~ A) was at the 1 145 nt of the sequence (GenBank Accepted No. FJ156361 ). The results of X2 test showed that the distribution of these three kinds of genotypes was significantly different in the six breeds (P〈0.05). The pH45 values of eye muscle and ham joint muscle were significantly different between geno- type AA and genotype AG of pigs in F2 generation from the Jianhua x Pietrain resource family ( P 〈 0.05). [Conclusion ] The polymorphism of the in- tron 14 of porcine CACNA2D1 gene has effects on the pH45 values of eye muscle and ham joint muscle. 展开更多
关键词 PIG CACNA2D1 gene PCR-SSCP pH45
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水稻抗旱相关基因OsDR1的克隆、鉴定及表达分析
15
作者 周立国 刘灶长 +4 位作者 孔德艳 徐凯 夏辉 吴金红 罗利军 《上海农业学报》 2022年第4期76-83,共8页
根据基因表达谱芯片结果,在陆稻品种‘IRAT109’中筛选到抗旱相关基因OsDR1,利用5’-RACE和3’-RACE方法,克隆OsDR1基因的全长cDNA序列,明确基因的转录起始和终止位点。结果显示:OsDR1基因编码的蛋白是卤酸脱卤素酶,具体分子功能未知。q... 根据基因表达谱芯片结果,在陆稻品种‘IRAT109’中筛选到抗旱相关基因OsDR1,利用5’-RACE和3’-RACE方法,克隆OsDR1基因的全长cDNA序列,明确基因的转录起始和终止位点。结果显示:OsDR1基因编码的蛋白是卤酸脱卤素酶,具体分子功能未知。qPCR定量表达分析结果表明,OsDR1基因受低温、盐、PEG模拟干旱等多种逆境诱导表达;在叶片中表达受光照诱导和调节,并且在24 h光周期内呈节律性变化。 展开更多
关键词 节水抗旱稻 OsDR1基因 卤酸脱卤素酶 抗旱性
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PPARγ激动剂对MKN-45胃癌细胞系增殖及MMP-7基因表达的影响
16
作者 江洁 刘顺英 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2005年第4期247-249,共3页
目的:研究过氧化物酶增殖因子激活受体γ(peroxisomeproliferatorsactivatedreceptorγ,PPARγ)激活剂罗格列酮对人胃癌细胞系MKN45增殖和MMP7基因表达的影响。方法:不同浓度罗格列酮干预细胞后,用台盼蓝拒染法检测胃癌细胞株增殖活性,... 目的:研究过氧化物酶增殖因子激活受体γ(peroxisomeproliferatorsactivatedreceptorγ,PPARγ)激活剂罗格列酮对人胃癌细胞系MKN45增殖和MMP7基因表达的影响。方法:不同浓度罗格列酮干预细胞后,用台盼蓝拒染法检测胃癌细胞株增殖活性,用RTPCR法检测MMP7基因表达情况。结果:罗格列酮作用24h明显降低MKN45细胞的存活率,与对照组比较有显著差异(P<0.05),细胞存活率随着药物浓度增加而降低;MMP7基因表达随着药物浓度增加而下降。结论:在胃癌细胞株MKN45中,罗格列酮与PPARγ作用而激活下级信号传导,抑制胃癌细胞的增殖,且下调MMP7基因的表达。 展开更多
关键词 噻唑类 过氧化物酶类 细胞系 肿瘤 MKN-45细胞 MMP-7基因
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The histone deacetylase inhibitor trichostatin A induces cell cycle arrest and rapid upregulation of gadd45β in LS174T human colon cancer cells
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作者 Tomoyuki Taniguchi Jun Iwashita +2 位作者 Jun Murata Kenji Ueda Tatsuya Abe 《Advances in Biological Chemistry》 2012年第1期43-50,共8页
Histone deacetylase (HDAC) inhibitors are considered as promising therapeutic agents against several malignant diseases because they inhibit cancer cell proliferation. The stress sensor genes of the growth arrest and ... Histone deacetylase (HDAC) inhibitors are considered as promising therapeutic agents against several malignant diseases because they inhibit cancer cell proliferation. The stress sensor genes of the growth arrest and DNA damage-inducible protein (gadd45) family exhibit disordered expression in several types of malignant diseases and are thus a novel target for cancer therapy. However, there have been only few investigations of whether HDAC inhibitors affect the expression of gadd45 genes. We examined the effects of a HDAC inhibitor, trichostatin A (TSA), on the time-dependent expression of gadd45 genes in the human colon cancer cell line LS174T. Addition of TSA to LS174T cells induced inhibition of cell proliferation by arresting the cell cycle. We found that TSA treatment of LS174T cells induced rapid upregulation of gadd45β mRNA expression within 15 min, reaching a peak level at 3 h. Although the time-dependent expression pattern of gadd45β mRNA was similar to that of gadd45β mRNA, the peak level of gadd45β was lower than that of gadd45β. TSA treatment also upregulated the mRNA level of p21Waf1/Cip1, a prolif- eration inhibitor, after 3 h, but downregulated the mRNA levels of cyclin D1, a proliferation inducer, after 3 h, and of c-Myc after 1 h. TSA treatment induced a certain level of apoptosis, but the mRNA level of p53, a potent apoptosis inducer, was down-regulated after 3 h. These results suggest that the up-regulation of p21Waf1/Cip1 and apoptosis was independent of p53 and that the early upregulation of gadd45β gene, which precedes the upregulation of p21Waf1/Cip1 and the downregulation of cyclin D1, are important in TSA-treated LS174T cells. 展开更多
关键词 HISTONE DEACETYLASE Inhibitor GADD45 genes TRICHOSTATIN A LS174T Cells
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载脂蛋白A5基因-1131T/C多态性与2型糖尿病血脂及其颈动脉内膜中层厚度相关性研究 被引量:4
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作者 乔彦 刘瑞 +3 位作者 田浩明 刘宇 强鸥 刘秉文 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期965-968,999,共5页
目的探讨载脂蛋白A5基因(ApoA5)-1131T/C多态性与成都地区汉族人群2型糖尿病(T2DM)患者血脂及其颈动脉内膜中层厚度(IMT)的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,分析154例T2DM... 目的探讨载脂蛋白A5基因(ApoA5)-1131T/C多态性与成都地区汉族人群2型糖尿病(T2DM)患者血脂及其颈动脉内膜中层厚度(IMT)的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)结合聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,分析154例T2DM患者和206例正常对照者ApoA5基因-1131T/C多态性。酶法测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。颈动脉超声多普勒检查T2DM患者的颈动脉内膜中层厚度。结果ApoA5基因-1131T/C多态位点T、C等位基因频率在T2DM组和正常对照组分别为0.721、0.279和0.760、0.240。基因型频率分布符合Hardy-Weinberg平衡定律。ApoA5基因-1131T/C位点基因型频率和T、C等位基因频率在T2DM组和正常对照组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。CC纯合子患T2DM风险是TT纯合子的2.432倍(95%CI:1.081~5.473)。T2DM组ApoA5基因-1131T/C位点C等位基因携带者(TC基因型和CC基因型)的血清TG水平和TG/HDL-C比值均高于TT基因型携带者(P<0.05)。正常对照组TC基因型携带者的血清TG水平和TG/HDL-C比值较TT基因型携带者升高(P<0.05)。T2DM组颈动脉IMT ApoA5基因-1131T/C位点CC基因型亚组较TT基因型亚组有增加趋势(P=0.08)。结论ApoA5基因-1131T/C多态性与T2DM的发生无相关性,但CC基因型患T2DM的风险增加。ApoA5基因-1131T/C多态性与正常对照及T2DM患者的血清TG水平和TG/HDL-C比值增高有关,但与T2DM患者颈动脉IMT的相关性需进一步研究。 展开更多
关键词 2型糖尿病 载脂蛋白A5基因 甘油三酯 颈动脉内膜中层厚度
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实时定量聚合酶链反应法检测人周围血淋巴细胞受照后GADD45基因表达的改变 被引量:2
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作者 刘莉 佘义 +4 位作者 赵卫东 李进 王芹 田丽丽 姜恩海 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2008年第6期454-457,共4页
目的建立辐射诱导人淋巴细胞GADD45基因表达定量检测技术,探讨GADD45基因表达变化作为辐射生物剂量计的可行性。方法健康人周围血经X射线照射后分离淋巴细胞,提取总RNA,反转录成cDNA,利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测GADD45基... 目的建立辐射诱导人淋巴细胞GADD45基因表达定量检测技术,探讨GADD45基因表达变化作为辐射生物剂量计的可行性。方法健康人周围血经X射线照射后分离淋巴细胞,提取总RNA,反转录成cDNA,利用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测GADD45基因经不同剂量照射(0~8 Gy)、2 Gy照后不同时间(0~72 h)的mRNA表达水平,以管家基因GAPDH为内参进行定量分析。结果照射后GADD45基因在转录水平表达呈剂量依赖性增加,4 Gy照射时达到峰值,8 Gy仍然保持在较高水平,GADD45基因表达改变存在线性剂量-效应关系,其线性回归方程为y^=3.408+1.528x,R2=0.787。2 Gy照射后GADD45基因mRNA表达在照射后1 h呈现上升趋势,在4 h时达峰值,照射后72 h基因表达仍未恢复到初始水平。结论实时荧光定量PCR检测GADD45基因表达方法具有良好的敏感性、重复性和剂量-效应关系,有可能成为新的辐射生物剂量计。 展开更多
关键词 GADD45基因 生物剂量计 基因表达 实时荧光定量RCR
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吡格列酮对胃癌细胞生长的影响及其机制的研究 被引量:3
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作者 马建霞 刘顺英 《东南大学学报(医学版)》 CAS 2004年第3期176-179,共4页
目的 :研究过氧化物酶增殖因子活化受体γ(PPARγ)在人胃癌细胞株MKN 45的表达 ;观察PPARγ激活剂吡格列酮对胃癌细胞生长的影响以及是否引起凋亡基因c myc表达的变化 ,探讨其作用机制。方法 :采用RT PCR法检测PPARγ的表达 ,以不同浓... 目的 :研究过氧化物酶增殖因子活化受体γ(PPARγ)在人胃癌细胞株MKN 45的表达 ;观察PPARγ激活剂吡格列酮对胃癌细胞生长的影响以及是否引起凋亡基因c myc表达的变化 ,探讨其作用机制。方法 :采用RT PCR法检测PPARγ的表达 ,以不同浓度的吡格列酮干预细胞的生长 ,四甲基偶氮唑盐比色法检测吡格列酮激活剂对胃癌细胞株增殖活性的效应 ,RT PCR法检测药物干预前后c myc基因表达的变化。结果 :PPARγ在胃癌细胞株MKN 45中有表达。 0 .0 1μmol·L- 1 吡格列酮对MKN 45细胞的增殖无明显影响 ;1μmol·L- 1 吡格列酮作用 48h则明显降低MKN 45细胞的存活率 ,与不加吡格列酮的对照组比较有显著差异 (P <0 .0 5 ) ,随着药物浓度增加和培养时间延长 ,这一作用愈加明显。随着药物浓度的增加 ,c myc基因的表达呈下降趋势。结论 :PPARγ在胃癌细胞株MKN 45中有表达 ,PPARγ激活剂吡格列酮抑制胃癌细胞的生长 ,且引起c myc基因表达的下调 。 展开更多
关键词 吡格列酮 胃癌 癌细胞生长 过氧化物酶增殖因子活化受体γ C-MYC基因
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