E1B缺失腺病毒瘤内注射治疗恶性肿瘤的安全性研究

背景及目的:具有复制能力的病毒(或称溶瘤病毒)用于治疗恶性肿瘤的研究近年来发展相当迅速,E1B缺失腺病毒是目前研究最多、进展最快的溶瘤病毒之一。本研究目的是观察瘤内注射E1B缺失腺病毒注射液(H101)治疗恶性肿瘤的安全性。方法:按入选标准筛选肿瘤患者15例,给予H101瘤内注射,注射剂量在每人每天5×107～1.5×1012颗粒数,采用5个剂量级进行爬升,连续5天为一疗程。治疗前对患者进行全面体检,治疗期间密切观察患者的生命体征和不良反应,治疗后不同时间采集患者的血、尿、咽拭子及注射部位拭子进行腺病毒DNA测定(PCR法)。结果:15例患者均可进行毒性评价。所有患者对H101瘤内注射耐受性良好,在整个治疗过程中,没有观察到剂量限制性毒性(DLT),也未见严重不良事件,主要不良反应为注射局部疼痛(60.0%)和发热(33.3%)。血、尿、咽拭子及注射部位拭子中均未检测到腺病毒DNA。结论:E1B缺失腺病毒注射液(H101)瘤内注射毒副作用较低,患者耐受性良好,也未发现H101向体外播散的证据。因此,H101瘤内注射具有良好的安全性。

基因工程腺病毒H101逆转A549/DDP细胞对顺铂耐药性的实验研究

背景及目的:耐药性产生是化疗失败的主要原因之一,克服耐药性的方法之一是使用逆转剂。目前尚无一种理想的、可应用于临床的顺铂(DDP)耐药逆转剂。本研究探讨基因工程腺病毒H101对DDP耐药性的逆转作用及其机制。方法:体外利用人肺腺癌细胞株A549的DDP耐药模型A549/DDP,采用MTT法检测H101对A549/DDP细胞耐药性的逆转作用。用流式细胞仪(FCM)测定细胞多药耐药蛋白1(multidrugresistantprotein1,MRP1)、谷胱甘肽鄄S鄄转移酶(GST)及TOPO鄄Ⅱ蛋白表达量,荧光鄄考马斯亮蓝法检测细胞内GSH含量,原子吸收法测定细胞内铂浓度。结果:A549/DDP细胞对DDP的耐药指数为14.3。加入H101后,DDP对A549/DDP的半数抑制浓度(IC50)由352.4μmol/L降至61.6μmol/L,逆转倍数为5.7倍。FCM检测结果显示,A549/DDP细胞的GST和TOPO鄄Ⅱ蛋白水平均较A549细胞高,而两种细胞内均未检测到MRP1的表达,经H101处理后的A549/DDP细胞胞内GST蛋白和TOPO鄄Ⅱ蛋白水平均明显下降。A549/DDP胞内GSH含量比A549高2倍多;H101感染A549/DDP细胞后,胞内的GSH含量下降,随着H101剂量的增加,胞内GSH含量逐渐下降,达A549细胞内GSH水平。原子吸收法测定细胞内铂含量的结果显示,A549细胞内铂含量是A549/DDP细胞内铂含量的3倍,加入H101后,A549细胞内铂的含量无明显变化,但A549/DDP细胞内铂的含量明显增加。结论:H101能逆转A549/DDP对DDP的耐药性,H101逆转DDP耐药性的机制可能是减少A549/DDP细胞内GSH和TOPOⅡ蛋白的水平,增加了A549/DDP细胞内铂的蓄积。