相同产地3种龙胆属植物根及根茎中化学成分的差异分析

目的 为从龙胆属植物中挖掘坚龙胆可替代资源提供依据。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法对3种龙胆属植物(坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆)根及根茎中4种活性成分(龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷)的含量进行测定;采用超高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间高分辨质谱联用(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对上述植物根及根茎中化学成分进行鉴定,并进行主成分分析(PCA)。结果 头花龙胆与坚龙胆根及根茎中均含有龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷这4种活性成分,其中头花龙胆和坚龙胆根及根茎中龙胆苦苷含量均是2020年版《中国药典》(一部)限量标准的4倍以上;而微籽龙胆根及根茎中仅检测到獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷,其中的獐牙菜苷和苦龙胆酯苷含量分别是坚龙胆的34.12、8.81倍。通过UPLCESI-Q-TOF-MS技术从3种龙胆属植物根及根茎中共鉴定出33种化合物,主要为环烯醚萜类成分;此外,坚龙胆和头花龙胆中还含有酮类成分,微籽龙胆中还含有黄酮类成分。PCA结果显示,头花龙胆和坚龙胆差异较小,而微籽龙胆与坚龙胆差异较大。结论 同一产地头花龙胆与坚龙胆根及根茎的化学成分差异较小,存在可替代性;而微籽龙胆与坚龙胆根及根茎的化学成分差异较大,不能代替坚龙胆入药。

微籽龙胆中黄酮苷类化学成分及其抗氧化活性研究

为研究药用植物微籽龙胆(Gentiana delavayi Franch)的活性物质基础,采用多种色谱技术(硅胶、ODS、MCI和Sephadex LH-20等)从微籽龙胆中抗氧化活性最好的正丁醇部位分离得到8个黄酮苷类化合物.通过核磁共振技术和文献数据对比,将其分别鉴定为:木犀草素-6-O-β-D-葡萄糖苷(1),牡荆苷(2),芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷(3),异牡荆素(4),葛根素(5),hypolaetin-8-O-β-D-glucoside(6),荭草素(7)和异荭草素(8),化合物1和6为首次从该属植物中分离得到.此外,测试了微籽龙胆各萃取部位和上述化合物的抗氧化活性.黄酮苷类化合物6和7表现出显著的DPPH自由基清除能力,其中化合物7的活性与阳性对照相当,其IC50值为(9.74±0.05)μg/mL.

三种龙胆属白族药用植物的品质评价及质量等同性

以坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆为试材,采用HPLC法,测定了坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆根及根茎中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷、苦龙胆酯苷的含量,并用单因素方差分析、聚类分析、色谱法分析对其品质及质量等同性进行评价。结果表明:微籽龙胆根及根茎中龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、獐芽菜苷、苦龙胆酯苷含量(P<0.01)与坚龙胆、头花龙胆具有极显著差异,而坚龙胆与头花龙胆无显著差异且龙胆苦苷含量均超过国家药典标准的5倍,微籽龙胆根及根茎中未检测到龙胆苦苷;坚龙胆和头花龙胆根及根茎HPLC色谱图相似度均达0.997,微籽龙胆相似度仅为0.015;坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆根及根茎中主要活性成分含量及其总含量聚类分析结果相同,坚龙胆和头花龙胆聚为一类,微籽龙胆单独为一类。头花龙胆可以替代坚龙胆入药,但其药理性、毒理性等还需进一步的研究;微籽龙胆不能替代坚龙胆入药。

微籽龙胆氯仿部位中三萜类成分研究

采用多种色谱技术(硅胶、ODS、MCI和SephadexLH-20等)从微籽龙胆氯仿部位分离得到9个三萜类化合物,通过核磁共振技术和文献数据对比,分别鉴定为:α-香树脂醇(1)、3β,28-二羟基乌苏烷(2)、3β-羟基-12-烯-28-醛乌苏烷(3)、乌苏酸(4)、3β-hydroxy-urs-11-en-13β,28-olide(5)、2α-羟基乌苏酸(6)、obtusalin(7)、桦木酸(8)和2α,3α,24-三羟基齐墩果酸(9)。化合物(7)和(9)为首次从该属植物中分离得到。

微籽龙胆氯仿提取物对APP/PS1 CHO细胞APP加工的影响

目的:在分子细胞水平上初步观察微籽龙胆(Gentiana delavayi Franch.,G.delavayi)氯仿提取物对β淀粉样蛋白前体蛋白(amyloid precursor protein,APP)加工过程的影响。方法:不同浓度(0.05,0.5,5,50和500μg·L^(-1))的微籽龙胆氯仿提取物与APP/PS1 CHO细胞共同孵育24 h,MTT法测APP/PS1 CHO细胞的存活率;ELISA试剂盒检测细胞上清液中Aβ40,Aβ42的含量以及β-位淀粉样前体蛋白裂解酶1(β-site amyloid precursor protein cleaving enzyme 1,BACE1)的活性;Western Blotting方法检测APP以及Aβ降解酶-脑啡肽酶的表达。结果:细胞毒性试验(MTT法)结果显示微籽龙胆氯仿提取物对细胞活力无显著影响(P>0.05)。当微籽龙胆氯仿提取物的浓度为50μg·L^(-1)时,能非常显著地降低APP/PS1 CHO细胞上清液中的Aβ42(P<0.01)的含量以及抑制BACE1(P<0.01)的活性;当微籽龙胆氯仿提取物的浓度为500μg·L^(-1)时,APP/PS1 CHO细胞上清液的Aβ40的含量以及脑啡肽酶的表达有非常显著差异(P<0.01)。结论:微籽龙胆氯仿提取物在体外能够抑制β淀粉样蛋白产生,同时又能够增加淀粉样蛋白降解酶的表达。该结果提示微籽龙胆有效成分有进一步向阿尔茨海默病防治药物开发的潜力。

3种龙胆属药用植物叶中主要有效成分的积累

采用高效液相色谱法测定同一产地的坚龙胆、头花龙胆和微籽龙胆叶中的龙胆苦苷(1)、獐芽菜苦苷(2)、獐芽菜苷(3)和苦龙胆酯苷(4),并将其叶的HPLC指纹图谱与坚龙胆根及根茎的指纹图谱进行对比,以单因素方差分析法分析其叶中主要有效成分的积累。结果表明坚龙胆和头花龙胆叶中的1、2含量极显著高于微籽龙胆(P<0.01),微籽龙胆叶中3、4含量极显著高于坚龙胆和头花龙胆(P<0.01)。坚龙胆根及根茎与坚龙胆、头花龙胆叶的指纹图谱相似度较高(0.999和0.991),成分差异较小;而与微籽龙胆叶指纹图谱相似度极低,成分差异较大。

微籽龙胆的生药学研究

目的对微籽龙胆进行系统的生药学研究。方法采用来源鉴定、性状鉴定、显微鉴定及理化鉴定的方法。结果详细描述了微籽龙胆的生药性状、横切面构造、粉末特征及理化鉴别的研究结果。结论实验结果可为该生药的鉴定、质量标准的制定和进一步开发利用提供理论依据。