Gentiopicroside, originated from Gentiana macrophylla Pall, possesses antiarthritic efficacy in adjuvant-induced arthritis rats

OBJECTIVE This work aimed to investigate the anti-rheumatoid arthritic effect of gentio.picroside from Gentiana macrophylla Pall using an animal model of adjuvant induced arthritis.METH.ODS Adjuvant arthritis was induced in fifty SD male rats,which were randomly divided into five groups(n=10):control(0.5% CMC-Na) group,AIA(rats with CFA) group,dexamethasone(1 mg·kg^(-1)) group,gentiopicroside(50 mg·kg^(-1)) group,and gentiopicroside(100 mg·kg^(-1)) group.Rats were administered intragastrically with drugs or CMC-Na once a day for a period of 2 weeks.Paw swelling,arthritic index,histological changes were assessed to evaluate the anti-arthritic effect.Weight growth,spleen and thymus indexes were also investigated in.RESULTS Gentiopicroside at dose of 100 mg·kg^(-1) significantly inhibited the secondary paw swelling(P<0.05) and arthritis index(P<0.05),decreased synovial inflammatory infil.tration,synovial hyperplasia and bone erosion.Furthermore,gentiopicroside showed no immunosup.pressive adverse effects in body weight,index of spleen and thyums compared with dexamethasone administration(P<0.05,P<0.01).CONCLUSION Gentiopicroside possessed anti-arthritic efficacy in AIA rats without immunosuppressive effects.

Gentiana macrophylla Pall.:a review of the basic source,traditional use,chemical components,pharmacological activities and quality control

Gentiana macrophylla Pall.(G.macrophylla),whose genus and family belong to the Gentianaceae and Gentiana.The main distribution centers of G.macrophylla resources were the Loess Plateau and the eastern Qinghai-Tibet Plateau in China.G.macrophylla,as a traditional medicine,has a long history and was used in different ethnic medicines.Its roots were used in traditional Chinese medicine,which had the effect of anti-inflammatory,anti-rheumatism,antiviral,promote blood circulation,eliminate swelling and pain,while its flowers were used in traditional Mongolian medicine,which had the effect of removing“Xieriwusu”(“Xieriwusu”means rheumatism),antiviral,reducing swelling.From previous studies,it could be found that there were more than forty components isolated and identified from G.macrophylla.The main chemical components were iridoids,flavonoids,triterpenoids,steroids,phenylpropanoids,and alkaloids.Iridoid terpenoid components represented by gentiopicroside and Loganic acid were the main components of the root of G.macrophylla,which had anti-inflammatory,antioxidant,hepatoprotective,analgesic,antibacterial and promote gastrointestinal tract activities.The flower mainly contains isoorientin and isovitexin as the representative of flavonoids.They have anti-tumor,liver protection,heart protection,inhibition of acetylcholinesterase and inhibition of melanin.It could be seen from previous studies that the research on G.macrophylla was mainly focused on the root,and the flower was rarely studied.It was reported that the experimental data of the anti-inflammatory and anti-tumor effects of G.macrophylla flowers show that its curative effect was very good.Therefore,the flowers of the flower of G.macrophylla can be used as potential medicinal parts for research.Given that flavonoids are mostly found in flowers and exhibit a range of functions,it is possible to investigate the flowers in order to learn more about G.macrophylla’s potential medical benefits.Based on botanical books,Chinese classic texts,medical monographs and academic search engines(Google,Google Scholar,Web of Science,SciFinder,Pubmed,CNKI,Sci-hub,Elsevier and Wanfang),the data and information on G.macrophylla in the past 20 years are inquired and summarized comprehensively.The basic source,traditional use,chemical composition,biological activity,pharmacodynamics and quality control of G.macrophylla was systematically reviewed,in order to provide reliable basis for the subsequent development and utilization of G.macrophylla.

LX-70大孔树脂纯化秦艽中龙胆苦苷工艺研究

目的:筛选适合分离纯化秦艽中龙胆苦苷的大孔树脂并确定纯化工艺参数。方法:以大孔树脂对龙胆苦苷的吸附量和解析率为指标,选择最佳的树脂进行富集。采用单因素实验法对上样浓度、醇洗脱浓度、吸附时间、洗脱体积和流速进行考察,从而确定最佳纯化工艺。结果:LX-70型大孔树脂的吸附和解析效果最佳,其动态饱和吸附量为45.41 mg/g,最佳工艺参数为:龙胆苦苷上样液的质量浓度为30.20 mg/mL,吸附1.5 h,洗脱剂为30%乙醇,乙醇洗脱4B V,洗脱流速1~1.5 BV/h,龙胆苦苷的纯度可达到66.54%,龙胆苦苷的转移率大于95%。结论:LX-70型树脂对龙胆苦苷有较高的吸附量和解析率,洗脱溶剂的用量也更少,其工艺参数可供放大生产参考。

秦艽与小秦艽光合日变化的研究

运用光合作用测定系统,对野生秦艽(Gentiana macrophylla Pall．)和小秦艽(G．dahurica Fisch．)的开花期的光合特性进行研究。结果表明,2种秦艽的净光合速率、蒸腾速率、气孔导度日变化曲线都呈双峰型,有明显的光合“午休”现象。小秦艽的光合速率、蒸腾速率、气孔导度照著高于秦艽,分别高出2．7 μmolCO2·m-2·s-1、1．5 mmol·m-2·s-1和140．7 mmol．m-2·s-1而叶温则低于秦艽2．8C。相关分析表明,开花期的温度、光照对2种秦艽的光合都有一定影响,蒸腾速率、气孔导度调节光合作用,而引起2种秦艽光合速率降低的主要因素为非气孔因素。

超声提取-HPLC法测定秦艽中龙胆苦苷的含量

目的 用高效液相色谱法测定秦艽样品中龙胆苦苷的含量。方法 采用水提法为对比,以水、乙醇和甲醇为溶剂,用频率为20kHz的超声波提取秦艽中的龙胆苦苷,并用HPLC法测定样品中龙胆苦苷的含量,并对两种工艺的秦艽样品的主体成分龙胆苦苷进行定量比较。结果 表明超声提取能够明显地提高秦艽中龙胆苦苷的浸出率。结论 通过运用正交试验法,确定了秦艽的粒径大小(目数)、超声波处理时间(min)以及水剂量(mL)3个因素的最佳组合。

秦艽提取物抗病毒的药效学实验研究

目的研究中药秦艽在体内对流感病毒的防治作用。方法复制乙型流感病毒感染小鼠肺部感染性疾病动物模型,以利巴韦林为阳性对照,观察秦艽对乙型流感病毒感染小鼠的保护作用。结果秦艽提取物可明显延长乙型流感病毒感染小鼠存活天数和存活率;对乙型流感病毒感染小鼠肺指数、肺组织形态学都有保护作用,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论秦艽具有较好的抗乙型流感病毒感染的作用。

不同产地秦艽的质量和遗传多样性研究

目的:对不同产地秦艽的质量和遗传多样性进行研究。方法:使用性状、显微鉴别方法进行鉴别研究,采用高效液相色谱法进行龙胆苦苷含量测定,利用RAPD技术对其遗传多样性和遗传结构进行研究。结果:表明不同产地秦艽的性状、显微特征具有差异,其有效成分龙胆苦苷的含量也具有一定的差异,各种群的遗传多样性水平依次为湟中种群(K)>环县种群(J)>子午岭种群(H)。结论:对不同地区秦艽药材的外部形态、内部构造、有效成分含量和遗传水平的顺序,为保护野生品种、确保引种栽培秦艽药材的质量提供了科学依据。

大叶秦艽的组织培养与植株再生

以秦艽的叶和下胚轴为外植体,成功地诱导出愈伤组织和再生植株.诱导愈伤组织最合适的培养基为附加2 m g·L- 1 2 ,4 - D和0 .5 mg·L- 1 6 - BA的MS培养基,诱导率可达到10 0 % .愈伤组织转移到附加2 mg·L- 12 ,4 - D和0 .5 mg·L- 1 KT和5 0 0 m g·L- 1 L H的MS培养基上进行继代培养,增殖后的愈伤组织转移到附加0 .1mg·L- 1 2 ,4 - D和0 .5 m g·L- 1 6 - BA的MS分化培养基上进行分化,其分化率可达到86 .6 7% ,将分化出的芽转接到不加激素的MS上,结果可生长出大量的分化苗.

陕西产秦艽脂溶部位化学成分研究

目的对陕西产秦艽Gentianamacrophylla的化学成分进行系统研究。方法利用硅胶柱及其他多种色谱手段对秦艽的化学成分进行分离;用UV、IR、MS、1H-NMR、13C-NMR等技术及与对照品对照进行鉴定。结果从脂溶部位得到5个化合物,分别鉴定为:N-正二十五烷基-2-羧基苯甲酰胺(N-pentacosyl-2-carboxy-benzoylamide,)、5-羧基-3,4-二氢-1H-2-苯并吡喃-1-酮(5-carboxyl-3,4-dihydrogen-1H-2-benzopyran-1-one,)、红百金花内酯(erythrocentaurin,)、栎瘿酸(roburicacid,),齐墩果酸(oleanolicacid,)。结论、为两个新化合物,分别命名为秦艽酰胺和红百金花酸,为首次从本属植物中分得。

藏药粗茎秦艽、蓝玉簪龙胆的生药学鉴定

采用原植物、性状、显微、薄层鉴定的方法对藏药粗茎秦艽、蓝玉簪龙胆进行系统的生药学鉴定,为其鉴别及应用提供科学依据。结果表明:通过原植物、性状、显微、薄层色谱图研究能够很好地鉴定原植物。

CO_2激光对大叶龙胆种子萌发及幼苗生长的影响

目的 研究 CO2 激光对大叶龙胆种子萌发及幼苗生长的影响。方法 使用不同剂量的 CO2 激光辐照大叶龙胆湿种子 ,观察不同光照条件下种子的萌发情况 ,并研究激光处理后的幼苗生长情况。结果 光照条件下 ,激光可提高大叶龙胆种子的发芽势及发芽率 ,但对黑暗条件培养的种子无明显促萌发作用。低剂量激光还可提高大叶龙胆幼苗的叶绿素和可溶性蛋白含量 ,促进幼苗生长。结论 低剂量的 CO2

二十一种中药对小鼠免疫药理作用的初步研究

海藻等２１种中药水煎剂，３０ｇ／ｋｇ×７ｄ，ｐｏ，对正常小鼠免疫功能影响的研究结果表明：海藻、龟版、草 及柴胡能明显促进绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）所致的小鼠迟发超敏反应（ＤＴＨ）；木瓜、牛膝、山萸肉及秦 能明显抑制ＳＲＢＣ所致的小鼠ＤＴＨ；野菊花、沙参及牛膝能明显促进小鼠凝集素抗体的产生；木瓜、草 、龟版、天麻及鳖甲对小鼠单核吞噬系统的功能有明显的促进作用，山萸肉能明显抑制小鼠单核吞噬系统的功能；海藻、野菊花能明显增加小鼠的脾脏及胸腺指数，柴胡也能明显增加小鼠的胸腺指数，木瓜、山萸肉、牛膝、秦 及葛根能明显降低小鼠的胸腺指数。本研究结果提示，中药免疫药理作用可能是多方面的。

秦艽愈伤组织的培养及其龙胆苦苷含量的研究

目的:为扩大和提高甘肃道地药材秦艽资源的利用效率。方法:以秦艽种子的萌发所获得的幼芽作为外植体,诱导形成愈伤组织;筛选诱导愈伤组织产生的不同培养基和培养条件,并继代培养;应用HPLC法测定龙胆苦苷的含量。结果:秦艽愈伤组织生长的最佳培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L),最佳继代培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.5 mg/L),最佳继代时间为30 d。龙胆苦苷积累量在指数生长后期(28～30 d)达最高,为0.78 mg/g DW。结论:筛选出了适宜的秦艽愈伤组织培养方法。秦艽愈伤组织在固体培养基上的生长曲线呈"S"型,且愈伤组织中龙胆苦苷的积累量随愈伤组织增殖而不断增加。

栽培因子对秦艽产量和龙胆苦苷含量的影响

[目的]研究不同的栽培因子对秦艽产量和有效成分龙胆苦苷含量的影响。[方法]进行了秦艽栽培密度试验、追施肥料试验、生长年限试验，并对秦艽产量和龙胆苦苷含量进行了测定。[结果]秦艽生长苗间距以8～10cm为最好的生长密度；追施肥料对秦艽生长有促进作用，综合来看，尿素对秦艽生长最有利；随着生长年限的增加，秦艽的产量和龙胆苦苷含量也在增加，4年生秦艽龙胆苦苷含量和产量最高。[结论]4年生秦艽最具有栽培价值，为秦艽的高效人工种植提供了依据。

秦艽种子发芽特性的研究

目的 研究秦艽种子的发芽特性。方法 用热水浸泡 ,不同温度 ,不同浓度赤霉素处理秦艽种子 ,测定种子贮存条件。结果 秦艽种子发芽适温为 2 0℃ ,用 5 0 0× 10 - 6赤霉素浸种 1天 ,发芽率可达 90 .1%。低温 (0～ 4℃ )保存可延长种子寿命 ,春季解冻后播种出苗整齐健壮。

HPLC同步测定秦艽中龙胆苦苷和元胡中延胡索乙素的含量

目的:建立同时测定秦艽和元胡中的龙胆苦苷和延胡索素乙素含量的 RP-HPLC 分析方法。方法:采用 RP-C^(18)色谱柱,流动相:V(甲醇):V(0.1%醋酸缓冲液 pH=5.11)=30:70,等度10min,3min 梯度变成68:32,流速为1.0mL·min^(-1);紫外检测波长为230nm 和270nm。结果:龙胆苦苷和延胡索素乙素的标准曲线范围分别是4.5～449.5μg·mL^(-1)(r=0.9999,n=7)和4.9～493.5μg·mL^(-1)(r=0.9998,n=7);检测限分别是0.2245μg·mL^(-1)和0.0987μg·mL^(-1);加样回收率分别为98.9%-105.9%和97.1%～103.7%,RSD 均小于3.1%。结论:运用该方法测定龙胆苦苷和延胡索素乙素的含量稳定可靠,重现性好。

高效液相色谱法测定秦艽不同部位龙胆苦苷的含量

目的测定秦艽不同部位龙胆苦苷的含量。方法以C18反相柱为色谱柱,甲醇-水(1∶4)为流动相。检测波长254nm,用甲醇作提取剂。结果秦艽药材芦头中含有龙胆苦苷,但含量仅为根外皮部的10%,根心材龙胆苦苷约为外皮部的2倍。结论秦艽龙胆苦苷主要集中在根心材部分。

威灵仙、秦艽、桑寄生醇提物体外对淋巴细胞和环氧酶的影响

目的 :探讨威灵仙、秦艽和桑寄生提取物对淋巴细胞和环氧酶的影响。方法 :测定小鼠胸腺淋巴细胞和脾脏淋巴细胞增殖的变化 ,新生小公牛颈动脉内皮细胞的 6 keto PGF1α和小鼠腹腔巨噬细胞的PGE2 含量。结果 :威灵仙、秦艽和桑寄生对小鼠胸腺淋巴细胞和脾脏淋巴细胞的增殖有抑制作用 ,三种药物对环氧酶 1(COX 1)和氧化酶 2 (COX 2 )有不同程度的抑制。结论 :三种药物的祛风湿的部分机理可能是由于抑制淋巴细胞增殖和环氧酶而介导的。

不同年限秦艽产量及各部位活性成分质量分数的动态变化

通过测定宁夏隆德地区不同生长年限秦艽根干质量,利用高效液相色谱(HPLC)对不同年限秦艽的产量和不同部位活性成分质量分数的动态变化研究,确定秦艽的最佳采收期,探索其全草的药用价值。结果表明,地下营养器官(根)是秦艽有效成分的主要积累部位,质量分数可达9.43%,地上部分有效成分质量分数依次为花(4.90%)>叶(3.96%)>茎(3.84%)。对2a生、3a生和4a生栽培秦艽根的进一步研究发现,在一个生长季节中龙胆苦苷与马钱苷酸质量分数呈现不同的变化规律。研究表明,4a生秦艽在9月采收最佳,其花、茎、叶有效成分质量分数较高,值得开发利用。

黄管秦艽UPLC指纹图谱研究

目的：建立黄管秦艽和大叶秦艽的UPLC指纹图谱,对两者指纹图谱进行相似度评价,为其质量控制提供有力依据。方法：超高效液相色谱法建立指纹图谱,色谱柱ACQUITY UPLCBEH C18柱（50 mm×2.1 mm,1.7μm）,流动相甲醇-0.04%磷酸溶液梯度洗脱,流速0.3 m L/min,检测波长242 nm,柱温30℃。采用＂中药色谱指纹图谱相似度评价系统＂（2004 A版）分析指纹区和特征峰。结果：标定了黄管秦艽13个共有峰,13批黄管秦艽药材都有较高的相似度（0.976~0.997）,用于指纹图谱适用性检验的大叶秦艽与黄管秦艽也有较高的相似度（0.998）。结论：该方法准确可靠,可用于黄管秦艽药材的质量控制。