Minor antifungal aromatic glycosides from the roots of Gentiana rigescens(Gentianaceae)

Two new phenolic glycosides, 2,3-dihydroxybenzoic acid methyl ester 3-O-β-o-glucopyranosyl-（1-6）-β-D-glucopyranoside （1） and 2,5-dihydroxylbenzofuran 5-O-β-D-xylopyranosyl-（1-6）-O-β-D-glucopyranoside （2）, were isolated as the minor chemical constituents from the roots of Gentiana rigescens, along with 15 known compounds. Their structures were elucidated by detailed spectroscopic analysis, including 1D, 2D NMR and chemical method. All of these compounds were isolated for the first time from the title plant. Moreover, compounds 1 and 2 were tested for the antifungal activities on three plant pathogens Peronophythora litchi, Glomerella cingulata, and Glorosprium musarum.

Exploring the anti-hepatoma effect and potential targets of the active components from Gentiana rhodantha Franch ex Hemsl

The screening of lead compounds in plants is an important way to develop new drugs.Gentiana rhodantha Franch ex Hemsl,belonging to genus Gentiana of Gentianaceae family,has the functions of clearing heat and drying dampness,detoxifying and purging fire,relieving cough and so on.Previous studies have shown that many compounds in G.rhodantha have antitumor activities,but the mechanism is still unclear.The purpose of this study was to investigate the anti-hepatoma activity of the compounds in G.rhodantha by using the knowledge of network pharmacology.A compound-cancer target network with 57 candidate molecules and 38 potential targets was constructed.Analysis of the models showed that the most effective compound in this plant might be compound 47(rhyncoside D)ether,and the most potential target might be GMP synthase(2vxo).We believe that the present study can provide important clues for the study of anti-hepatoma activity.

A review of phytochemistry and pharmacology perspectives of Gentiana rhodantha Franch.ex Hemsl.

Gentiana rhodantha Franch.ex Hemsl.(G.rhodantha)is a perennial herb distributed in southwest China,belonging to the Gentiana genus of Gentianaceae family.Previous research indicated that G.rhodantha contains flavonoids,anthraquinones,terpenes and other compounds,which possess the effects of antioxidant,antibacterial,and antitumor.Besides,its dry herb is used as antiphlogistic and antitussive remedy for the treatment of lung,liver,and gallbladder diseases.This review outlines the chemical constituents and biological activities of G.rhodantha,which will be useful for the further research on this plant.

滇龙胆的本草考证

目的:研究历代典籍对滇龙胆的文献记载,对滇龙胆进行本草考证,以期为滇龙胆的开发利用提供参考。方法:通过查阅历代本草典籍,结合现代研究文献,对滇龙胆的名称、基原、产地变迁、采收加工以及品质评价进行系统的梳理、考证。结果:经考证,滇龙胆始载于《滇南本草》,别名坚龙胆、龙胆草、苦草等,为龙胆科龙胆属植物,基原植物为滇龙胆,是《中华人民共和国药典》龙胆药材的基原植物之一;主产于云南,临沧是其道地产区;滇龙胆一般于秋冬两季采收;加工多以产地初加工为主,即将滇龙胆清洗后阴干或晒干;历代本草典籍中对其质量评价的记载非常少,以“形如枯骨”“根肥长”“脂润”“味苦”“粘牙”作为质量好坏的评价标准,现代主要以龙胆苦苷含量作为龙胆药材质量评价的主要手段之一,辅助以外观性状等的观测。结论:考证结果将为今后滇龙胆的开发利用提供参考。

基于高通量测序分析滇龙胆根际土壤微生物群落特征

【目的】了解滇龙胆根际土壤微生物群落结构,为充分利用微生物资源,培育品质优良的滇龙胆提供科学有效的理论依据。【方法】利用高通量测序技术比较分析不同产地滇龙胆根际土壤微生物的多样性和群落结构差异,并结合土壤理化性质,分析滇龙胆根际土壤微生物群落丰度变化与土壤养分含量间的相关性。【结果】不同地区滇龙胆根际土壤微生物的多样性和丰富度存在差异,其中以样品BS2的Chao1、Ace、Shannon指数最大。群落组成分析发现,细菌域微生物属于136门、86纲、188目、409科、1793属,其中样品DL2、LC的优势菌门为变形菌门,相对丰度分别为64.74%、56.00%;样品DL1、BS1、BS2、GZ的优势菌门为酸杆菌门,相对丰度分别为42.02%、24.40%、41.44%、71.30%。真菌分属于5门、28纲、63目、124科、181属,其中样品BS2的优势菌门为担子菌门(42.65%),其余5个样品优势菌门均为子囊菌门(48.50%~88.92%)。根际微生物与土壤理化性质的相关性分析发现,土壤pH与链霉菌属的相对丰度呈显著正相关,与Candidatus-Sulfotelmatobacter呈极显著负相关;有机质含量与Edaphobacter、Granulicella的相对丰度呈显著正相关;水解性氮、有效磷、速效钾等土壤养分与罗河杆菌属的相对丰度呈显著或极显著正相关。【结论】产地因素对滇龙胆根际土壤微生物多样性及群落结构有一定的影响。综合比较,样品BS2根际土壤微生物的丰度和多样性最高。变形菌门、酸杆菌门、放线菌门和绿弯菌门是各样品中均存在的优势细菌,而子囊菌门和担子菌门为优势真菌群落。

氮磷钾配比对组培滇龙胆生长及有效成分的影响

为了分析培养基中不同氮、磷、钾营养水平对滇龙胆组培苗生长及有效成分含量的影响,本研究以滇龙胆组培苗为材料,采用L 9(33)正交设计,研究培养基中氮、磷、钾不同用量与配比对滇龙胆生长指标及主要有效成分龙胆苦苷、獐芽菜苦苷、当药苷含量的影响。结果表明,由不同氮、磷、钾配方培养的滇龙胆组培苗在生长性状及有效成分含量的方面均表现出显著差异性,3种营养元素中,氮元素对滇龙胆组培苗的茎粗、根长、生根数、分支数及折干率影响最为明显,磷元素对根粗、单株鲜重及龙胆苦苷和当药苷含量影响最明显,钾元素对茎长、叶片数獐芽菜苦苷含量影响最显著。在滇龙胆组织培养过程中,可根据组培苗用途对培养基中的氮、磷、钾进行调整,从而降低生产成本,提高生产效率。

不同初加工方法对滇龙胆药材品质的影响

采集临沧云县产新鲜滇龙胆,采用9种不同初加工方法,以滇龙胆的根及根茎为研究对象,测定干燥后滇龙胆样品中龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷和当药苷含量,以及总灰分、酸不溶性灰分和浸出物等指标,依据《中华人民共和国药典》标准,对药材品质进行综合评价。结果表明,不同加工方法滇龙胆有效成分含量有一定差异,其中水洗烘干(SXHG)处理样品龙胆苦苷和马钱苷酸的含量显著高于其他处理,同时,所需干燥时间最短,仅为12 h,远低于其他处理;水洗烘干(SXHG)处理样品的总灰分、酸不溶性灰分和浸出物均达到《中华人民共和国药典》标准;主成分分析可知,水洗烘干(SXHG)滇龙胆样品综合质量最好,免洗阴干(MXYG)综合质量次之,但该方法加工的样品总灰分和浸出物未达到《中华人民共和国药典》标准,水洗阴干(SXYG)在传统生产中农户广泛使用,可根据天气、场地等实际情况在产地加工中作为辅助干燥方法。综合考虑,滇龙胆药材产地加工方法以水洗烘干为宜;若药材加工量较大,可根据天气、场地等实际情况采用水洗阴干方法进行加工。

五岭龙胆化学成分及其抗炎活性研究

研究五岭龙胆(Gentiana davidii Franch.)的化学成分及其体外抗炎活性。综合应用硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱等分离技术,对五岭龙胆70%乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇萃取部位进行系统分离纯化,并结合化合物理化性质、波谱数据及与文献数据比对等进行结构鉴定,从中共分离鉴定15个化合物,分别为熊果酸(1)、乌发醇(2)、ursaldehyde(3)、28-norurs-12-en-3β-ol(4)、齐墩果酸(5)、β-amyrin-n-nonyl ether(6)、vanillyl glycol(7)、β-谷甾醇(8)、β-胡萝卜苷(9)和anemarrhenoside B(10)、正二十六烷(11)、正三十一烷醇(12)、1,5-bisβ-D-glucopyranosyloxy-2-(3′,3′-dimethylallyl)benzene(13)、2,4-二叔丁基苯酚(14)和2,2′-oxybis(1,4-di-tert-butylbenzene)(15)。化合物7、14和15为龙胆属首次分离得到,所有化合物均为五岭龙胆首次分离得到。对化合物1~15进行抗炎活性筛选发现,与模型组比较,化合物1、5和9对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞释放的NO有显著抑制作用。

海拔对苍山地区野生滇龙胆品质的影响

目的:本论文旨在研究海拔对苍山地区野生滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.)品质的影响。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法对滇龙胆根茎叶中龙胆苦苷的含量进行测定,并将各部分龙胆苦苷含量与海拔高度进行相关性分析。结果:苍山地区滇龙胆品质优良,根茎叶三部分龙胆苦苷含量均超过《中国药典》规定,根部龙胆苦苷含量在3.9%~8.2%之间。此外,根部龙胆苦苷含量与海拔高度有显著线性相关性,其线性拟合方程为y = −0.2752 + x * 1.35048E−4。结论:苍山地区野生滇龙胆品质优良;在海拔2325.3~2599.7 m区间内,滇龙胆品质随海拔上升而升高;苍山地区海拔2400~2700 m范围内,是潜在的优良人工滇龙胆种植区。

不同加工和干燥方式对滇龙胆品质的影响

为研究不同产地初加工方法对滇龙胆品质的影响。对药材分别进行不同条件的清洗、修剪、干燥处理,采用HPLC法测定龙胆苦苷含量,烘干法测定水分含量,总灰分测定法测定灰分含量,热浸法测定水溶性浸出物含量。结果显示,所有处理条件下,滇龙胆药材的龙胆苦苷、水分、灰分、浸出物含量均达到药典规定,清洗处理快洗与浸泡2 h,修剪处理保留2 cm芦头,干燥处理烘箱60℃冻干条件下,样品中的龙胆苦苷含量最高。可考虑将修剪保留2 cm芦头后浸泡2 h清洗擦干、烘箱60℃烘干作为滇龙胆产地初加工的标准处理方式。

氮磷钾配方施肥对滇龙胆光合特性及主要性状的影响

【目的】研究氮、磷、钾配方施肥对滇龙胆光合特性、主要性状以及药材品质的影响,为滇龙胆的高效施肥提供参考。【方法】以1年生的滇龙胆种苗为试验材料,采用“3414”盆栽施肥试验方案,通过对氮(N)、磷(P)、钾(K)肥料进行配比组合,测定其在不同配方施肥处理条件下(T1~T14)的生长指标和光合生理指标,并通过隶属函数法筛选出最佳氮、磷、钾施用配比。【结果】滇龙胆植株性状及龙胆苦苷含量在各施肥处理间具有显著差异(P<0.05,下同)。其中T3处理(N_(1)P_(2)K_(2))滇龙胆净光合速率(P_(n))、根长、根粗、根干重、龙胆苦苷含量达到最大值,分别为10.88μmol/(m^(2)·s)、27.44 cm、1.89 mm、1.05 g、7.93%,分别是T1(CK)处理(N_(0)P_(0)K_(0))的1.87、2.07、1.54、3.09、1.17倍。通过隶属函数法对主要性状进行综合评价,在各处理中T3处理的综合表现最佳。氮、磷、钾3因素对滇龙胆P_(n)、气孔导度(G_(s))的影响排序为K>N>P,对胞间CO_(2)浓度(C_(i))的影响排序为K>P>N,对蒸腾速率(T_(r))的影响排序为N>P>K;对滇龙胆的株高、茎粗、茎重、叶重、根长、根干重的影响排序为N>K>P,对叶长、叶宽、根粗的影响排序为P>N>K,对分枝数、龙胆苦苷量的影响排序为K>N>P,对叶片数的影响排序为K>P>N。【结论】各施肥处理均有助于提高滇龙胆的光合参数、农艺性状、产量以及有效成分含量,结合隶属函数分析结果综合评价,T3处理((N_(1)P_(2)K_(2),即施用N 1.5 g/m^(2)、P_(2)O_(5)3 g/m^(2)、K_(2)O 3 g/m^(2))可作为盆栽滇龙胆的最佳参考配方。

滇龙胆野生种质资源的表型多样性与综合评价

探讨滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.)表型多样性并建立优良种源综合评价方法。采集分布于云南的477株个体19个性状数据,结合遗传多样性指数、主成分分析、隶属函数、偏最小二乘等方法,开展滇龙胆种质资源评价。结果显示477株滇龙胆根、茎、叶性状遗传多样性指数范围:1.59~2.06;各性状中根粗(H’=2.00)、茎粗(H’=2.00)、根质比(H’=2.02)和根含水量(H’=2.06)遗传多样性指数较高,地上部分干重遗传多样性指数最低(H’=1.59)。不同地理来源的滇龙胆植株性状差异较大(P<0.05),分布于滇南的滇龙胆根部产量性状数值显著高于其他分布区的植株(P<0.05)。综合得分D值计算显示,477株滇龙胆D值变化范围:0.50~2.45,采自滇西、滇西北(D=1.17±0.03)及滇南(D=1.19±0.37)的植株综合评分较高,滇中(D=1.00±0.30)和滇东南(D=1.00±0.32)样品综合评分较低;云县居群植株综合评分高(D=1.24±0.14),且居群内个体间性状差异小(CV=11.02%),属最优种源。偏最小二乘-回归分析(PLS-R)与偏最小二乘-判别分析(PLS-DA)发现,根鲜重、根干重、全草干重、分枝数、根数、地上部分干重、茎粗及叶长是区分优劣种源的关键性状(VIP>1.00);土壤属性、生长期降水、最干季平均气温等环境因子则与滇龙胆高产性状的形成紧密相关(VIP>1.00);土壤沙土含量过高、粘土含量过低,干旱高温可能促使根鲜重、干重和根数数值呈降低趋势;4月、5月及11月降水增加则对根部性状提高有积极作用。

不同间作模式对滇龙胆产量及品质的影响

为了分析不同间作模式对滇龙胆生长状态、产量及品质的影响,选择茶树、核桃树、黄豆、薏仁、黑豆、蚕豆6种作物材料,组成滇龙胆单作和间作7种种植模式,通过检测旺盛生长期和采收期滇龙胆的生长指标(株高、株幅、叶长、叶宽、茎粗),根部产量及品质指标(干重、须根数、根长、根粗、龙胆苦苷含量),探讨不同间作模式对滇龙胆产量和品质的影响。结果表明:滇龙胆与核桃树和茶树间作地上部分的生长状态优于与黄豆、薏仁、黑豆、蚕豆间作的滇龙胆植株,其中与核桃树间作极显著促进滇龙胆植株株高的生长,而与茶树间作滇龙胆株幅大,叶片展开度高,植株健壮。不同间作栽培的滇龙胆产量依次为:茶树间作>核桃树间作>黄豆间作>黑豆间作>对照(单作)>蚕豆间作>薏苡间作,与茶树间作的滇龙胆产量最高,产量为142.4 kg/hm^(2),比对照处理高46.87%。在不同的间作模式中,滇龙胆与茶树间作后须根数最多,每株须根约6~9根,极显著高于对照的须根数。不同间作模式下,滇龙胆的龙胆苦苷含量多少依次为:茶树间作>核桃树间作>蚕豆间作>黑豆间作>黄豆间作>对照(单作)>薏苡间作>药典(1.5%),与茶树间作的根茎的龙胆苦苷含量最高,为3.36%±0.07%,显著高于对照和与薏苡间作。相关性分析表明,滇龙胆根茎的品质和产量与地上部分植株的株幅、叶长具有显著正相关关系,而与滇龙胆株高无显著相关性。通过隶属函数对根茎进行综合打分表明:茶树间作>核桃树间作>蚕豆间作>黄豆间作>黑豆间作>对照>薏苡间作,与茶树间作、核桃树间作、蚕豆间作、黄豆间作和黑豆间作的滇龙胆综合品质均优于对照,其中与茶树间作的综合评分最高,达到0.99。

相同产地3种龙胆属植物根及根茎中化学成分的差异分析

目的 为从龙胆属植物中挖掘坚龙胆可替代资源提供依据。方法 采用高效液相色谱(HPLC)法对3种龙胆属植物(坚龙胆、头花龙胆、微籽龙胆)根及根茎中4种活性成分(龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷)的含量进行测定;采用超高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间高分辨质谱联用(UPLC-ESI-Q-TOF-MS)技术对上述植物根及根茎中化学成分进行鉴定,并进行主成分分析(PCA)。结果 头花龙胆与坚龙胆根及根茎中均含有龙胆苦苷、獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷这4种活性成分,其中头花龙胆和坚龙胆根及根茎中龙胆苦苷含量均是2020年版《中国药典》(一部)限量标准的4倍以上;而微籽龙胆根及根茎中仅检测到獐牙菜苦苷、獐牙菜苷和苦龙胆酯苷,其中的獐牙菜苷和苦龙胆酯苷含量分别是坚龙胆的34.12、8.81倍。通过UPLCESI-Q-TOF-MS技术从3种龙胆属植物根及根茎中共鉴定出33种化合物,主要为环烯醚萜类成分;此外,坚龙胆和头花龙胆中还含有酮类成分,微籽龙胆中还含有黄酮类成分。PCA结果显示,头花龙胆和坚龙胆差异较小,而微籽龙胆与坚龙胆差异较大。结论 同一产地头花龙胆与坚龙胆根及根茎的化学成分差异较小,存在可替代性;而微籽龙胆与坚龙胆根及根茎的化学成分差异较大,不能代替坚龙胆入药。

滇龙胆优质种源的性状特征与综合评价

为探讨野生滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.)优质高产植株性状特征,以采自不同地区的877株滇龙胆为研究材料,利用主成分分析(PCA)、层次聚类(HCA)、隶属函数等方法对有效成分产量性状进行评价。结果显示,17个性状中,根部龙胆苦苷产量多样性指数最高,叶部马钱苷酸和当药苷产量的多样性指数较低;结合隶属函数对所有样品进行评分,发现优质高产种源共214株,占总样品数的24.40%,分布于云南、四川和贵州;变量投影重要性准则(VIP)分析表明,云南与四川的优质种源主要性状特征较为接近,均为当药苷、马钱苷酸及6'-O-β-D-葡萄糖基龙胆苦苷高产;贵州优质种源则为獐牙菜苦苷高产。基于3种机器学习算法建立不同等级种源的鉴别模型,结果发现随机森林(RF)算法建立的判别模型的预测精度和稳定性较高,能对不同等级种源进行有效划分。

滇龙胆花化学成分的分离与鉴定

目的:对滇龙胆花的化学成分进行了初步研究,明确滇龙胆花的化学成分并加以充分利用,为最大限度地提高滇龙胆种植产业效益提供科学依据。方法:采用硅胶、葡聚糖凝胶LH-20等色谱法分离化合物,并通过与标准品TLC对照、核磁共振、质谱数据鉴定化合物的结构。结果:从滇龙胆花体积分数为95%的乙醇溶液提取物中分离鉴定了12个化合物,主要为小极性的三萜脂肪酸酯酸,含量最大的是乌苏烷型三萜。分别鉴定为软脂酸(1)、古柯二醇-3-棕榈酸酯(2)、羽扇豆醇棕榈酸酯(3)、α-香树脂醇(4)、熊果醇-3-棕榈酸酯(5)、β-谷甾醇(6)、熊果酸(7)、胡萝卜苷(8)、2α-羟基-熊果酸(9)、β-香树脂醇棕榈酸酯(10)、α-香树脂醇棕榈酸酯(11)、β-香树脂醇(12)。结论:对滇龙胆花化学成分进行研究,分离鉴定了12个单体化合物,化合物1~6、8~12均为首次从龙胆花中分离得到。

云南道地药材滇龙胆资源调查与评价

滇龙胆为云南重要道地药材,通过走访和实地调查对云南省38个县市龙胆资源分布范围及资源现状进行调查。结果表明,滇龙胆在云南省除昭通、德钦和西双版纳外,均有分布,适宜生境为海拔1350～2500m的荒坡或林下。所测种群滇龙胆根粗为0.33～0.44cm,根长7.03～19.79cm,根数为6.34～19.40,根生物量为0.27～1.40g,根中龙胆苦含量为3.56%～5.99%。聚类分析结果显示,除玉溪、昆明、楚雄等产区外,文山、怒江种群滇龙胆质量也较好,具较高开发、利用价值。目前野生滇龙胆生境遭到破坏,资源量锐减,亟待保护,本研究调查为云南滇龙胆资源的保护与利用提供建议和基础数据。

不同林药复合种植模式滇龙胆有效成分含量研究

【目的】以云南林药复合种植滇龙胆为研究材料,探讨不同种植模式滇龙胆有效成分积累特征。【方法】采用高效液相色谱法测定滇龙胆根茎部位中龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷和当药苷4种有效成分含量。【结果】7种复合种植模式滇龙胆中龙胆苦苷含量的平均值为67.95mg/g,当药苷含量的平均值为1.85mg/g,獐牙菜苦苷含量的平均值为9.69mg/g,马钱苷酸含量的平均值为7.19mg/g。其中滇龙胆-尼泊尔桤木复合种植龙胆苦苷含量最高,为(85.99±9.58)mg/g;滇龙胆-杉木复合种植当药苷含量最高,为(2.05±0.23)mg/g;滇龙胆-核桃复合种植獐牙菜苦苷含量最高,为(10.10±0.95)mg/g;滇龙胆-核桃复合种植马钱苷酸含量最高,为(9.74±1.94)mg/g。不同林药复合种植模式滇龙胆有效成分的相关性分析结果显示,龙胆苦苷和獐牙菜苦苷含量呈极显著正相关(R=0.35,P<0.01),当药苷分别与马钱苷酸和獐牙菜苦苷含量呈极显著正相关(R=0.49,P<0.01;R=0.41,P<0.01)。【结论】不同林药复合种植模式下滇龙胆有效成分含量不同,其有效成分含量变化可能与其生长的小环境有关。

云南滇龙胆居群表型多样性及其与环境关系研究

为揭示滇龙胆天然居群表型变异程度和变异规律,以云南省5个区域天然分布的20个野生居群400个单株20个表型性状指标为调查研究对象,并用变异系数、Shannon-Weiner多样性指数和巢式方差分析对滇龙胆居群间和居群内的表型变异进行分析,用相关性分析对滇龙胆表型性状与地理气象因子间的变异格局进行分析,用类平均聚类法对20个滇龙胆居群进行分类.结果表明:5个区域的滇龙胆以楚雄地区变异最大,变异系数为39.8%,变异最小的是昆明地区,为31.4%;不同居群的20个表型性状变异程度差异明显,变异系数在14.4%～91.8%之间,平均为40.4%,20个居群的平均变异为26.8%～37.0%;滇龙胆地理居群的表型分化较高,20个性状居群间的分化系数平均为73.14%,变化范围为36.03%～91.94%,居群间变异高于居群内;滇龙胆20个表型性状的总的多样性指数平均为2.547,5个不同分布区域多样性指数存在差异,最大为楚雄(1.271 4),最小为玉溪(1.266 7);表型性状变异受经度和降雨量影响较大,与纬度、海拔和温度相关性不显著;通过UPGMA聚类,滇龙胆被分成3个组,性状的表型特征并没有依地理距离而聚类.研究发现滇龙胆表型变异式样丰富,对其资源的保护和利用具有重要意义.

中药材滇龙胆资源调查和分析研究

采取文献调查、走访调查、样方调查、市场调查等方法,对四川、云南、贵州省区野生滇龙胆资源地理分布、生态环境及云南家种滇龙胆人工栽培现状、市场及开发利用情况等方面进行调查,在此基础上对滇龙胆野生资源蕴藏量进行了估算,并对滇龙胆在药材资源、药材品质、人工种植等方面存在问题进行分析,提出了相应的对策与建议,为促进滇龙胆资源可持续利用提供依据。