Exploring the anti-hepatoma effect and potential targets of the active components from Gentiana rhodantha Franch ex Hemsl

The screening of lead compounds in plants is an important way to develop new drugs.Gentiana rhodantha Franch ex Hemsl,belonging to genus Gentiana of Gentianaceae family,has the functions of clearing heat and drying dampness,detoxifying and purging fire,relieving cough and so on.Previous studies have shown that many compounds in G.rhodantha have antitumor activities,but the mechanism is still unclear.The purpose of this study was to investigate the anti-hepatoma activity of the compounds in G.rhodantha by using the knowledge of network pharmacology.A compound-cancer target network with 57 candidate molecules and 38 potential targets was constructed.Analysis of the models showed that the most effective compound in this plant might be compound 47(rhyncoside D)ether,and the most potential target might be GMP synthase(2vxo).We believe that the present study can provide important clues for the study of anti-hepatoma activity.

A review of phytochemistry and pharmacology perspectives of Gentiana rhodantha Franch.ex Hemsl.

Gentiana rhodantha Franch.ex Hemsl.(G.rhodantha)is a perennial herb distributed in southwest China,belonging to the Gentiana genus of Gentianaceae family.Previous research indicated that G.rhodantha contains flavonoids,anthraquinones,terpenes and other compounds,which possess the effects of antioxidant,antibacterial,and antitumor.Besides,its dry herb is used as antiphlogistic and antitussive remedy for the treatment of lung,liver,and gallbladder diseases.This review outlines the chemical constituents and biological activities of G.rhodantha,which will be useful for the further research on this plant.

滇龙胆的本草考证

目的:研究历代典籍对滇龙胆的文献记载,对滇龙胆进行本草考证,以期为滇龙胆的开发利用提供参考。方法:通过查阅历代本草典籍,结合现代研究文献,对滇龙胆的名称、基原、产地变迁、采收加工以及品质评价进行系统的梳理、考证。结果:经考证,滇龙胆始载于《滇南本草》,别名坚龙胆、龙胆草、苦草等,为龙胆科龙胆属植物,基原植物为滇龙胆,是《中华人民共和国药典》龙胆药材的基原植物之一;主产于云南,临沧是其道地产区;滇龙胆一般于秋冬两季采收;加工多以产地初加工为主,即将滇龙胆清洗后阴干或晒干;历代本草典籍中对其质量评价的记载非常少,以“形如枯骨”“根肥长”“脂润”“味苦”“粘牙”作为质量好坏的评价标准,现代主要以龙胆苦苷含量作为龙胆药材质量评价的主要手段之一,辅助以外观性状等的观测。结论:考证结果将为今后滇龙胆的开发利用提供参考。

基于高通量测序分析滇龙胆根际土壤微生物群落特征

【目的】了解滇龙胆根际土壤微生物群落结构,为充分利用微生物资源,培育品质优良的滇龙胆提供科学有效的理论依据。【方法】利用高通量测序技术比较分析不同产地滇龙胆根际土壤微生物的多样性和群落结构差异,并结合土壤理化性质,分析滇龙胆根际土壤微生物群落丰度变化与土壤养分含量间的相关性。【结果】不同地区滇龙胆根际土壤微生物的多样性和丰富度存在差异,其中以样品BS2的Chao1、Ace、Shannon指数最大。群落组成分析发现,细菌域微生物属于136门、86纲、188目、409科、1793属,其中样品DL2、LC的优势菌门为变形菌门,相对丰度分别为64.74%、56.00%;样品DL1、BS1、BS2、GZ的优势菌门为酸杆菌门,相对丰度分别为42.02%、24.40%、41.44%、71.30%。真菌分属于5门、28纲、63目、124科、181属,其中样品BS2的优势菌门为担子菌门(42.65%),其余5个样品优势菌门均为子囊菌门(48.50%~88.92%)。根际微生物与土壤理化性质的相关性分析发现,土壤pH与链霉菌属的相对丰度呈显著正相关,与Candidatus-Sulfotelmatobacter呈极显著负相关;有机质含量与Edaphobacter、Granulicella的相对丰度呈显著正相关;水解性氮、有效磷、速效钾等土壤养分与罗河杆菌属的相对丰度呈显著或极显著正相关。【结论】产地因素对滇龙胆根际土壤微生物多样性及群落结构有一定的影响。综合比较,样品BS2根际土壤微生物的丰度和多样性最高。变形菌门、酸杆菌门、放线菌门和绿弯菌门是各样品中均存在的优势细菌,而子囊菌门和担子菌门为优势真菌群落。

五岭龙胆化学成分及其抗炎活性研究

研究五岭龙胆(Gentiana davidii Franch.)的化学成分及其体外抗炎活性。综合应用硅胶柱色谱、反相ODS柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱等分离技术,对五岭龙胆70%乙醇提取物的乙酸乙酯和正丁醇萃取部位进行系统分离纯化,并结合化合物理化性质、波谱数据及与文献数据比对等进行结构鉴定,从中共分离鉴定15个化合物,分别为熊果酸(1)、乌发醇(2)、ursaldehyde(3)、28-norurs-12-en-3β-ol(4)、齐墩果酸(5)、β-amyrin-n-nonyl ether(6)、vanillyl glycol(7)、β-谷甾醇(8)、β-胡萝卜苷(9)和anemarrhenoside B(10)、正二十六烷(11)、正三十一烷醇(12)、1,5-bisβ-D-glucopyranosyloxy-2-(3′,3′-dimethylallyl)benzene(13)、2,4-二叔丁基苯酚(14)和2,2′-oxybis(1,4-di-tert-butylbenzene)(15)。化合物7、14和15为龙胆属首次分离得到,所有化合物均为五岭龙胆首次分离得到。对化合物1~15进行抗炎活性筛选发现,与模型组比较,化合物1、5和9对脂多糖诱导的RAW 264.7细胞释放的NO有显著抑制作用。

不同初加工方法对滇龙胆药材品质的影响

采集临沧云县产新鲜滇龙胆,采用9种不同初加工方法,以滇龙胆的根及根茎为研究对象,测定干燥后滇龙胆样品中龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷和当药苷含量,以及总灰分、酸不溶性灰分和浸出物等指标,依据《中华人民共和国药典》标准,对药材品质进行综合评价。结果表明,不同加工方法滇龙胆有效成分含量有一定差异,其中水洗烘干(SXHG)处理样品龙胆苦苷和马钱苷酸的含量显著高于其他处理,同时,所需干燥时间最短,仅为12 h,远低于其他处理;水洗烘干(SXHG)处理样品的总灰分、酸不溶性灰分和浸出物均达到《中华人民共和国药典》标准;主成分分析可知,水洗烘干(SXHG)滇龙胆样品综合质量最好,免洗阴干(MXYG)综合质量次之,但该方法加工的样品总灰分和浸出物未达到《中华人民共和国药典》标准,水洗阴干(SXYG)在传统生产中农户广泛使用,可根据天气、场地等实际情况在产地加工中作为辅助干燥方法。综合考虑,滇龙胆药材产地加工方法以水洗烘干为宜;若药材加工量较大,可根据天气、场地等实际情况采用水洗阴干方法进行加工。

滇龙胆花化学成分的分离与鉴定

目的:对滇龙胆花的化学成分进行了初步研究,明确滇龙胆花的化学成分并加以充分利用,为最大限度地提高滇龙胆种植产业效益提供科学依据。方法:采用硅胶、葡聚糖凝胶LH-20等色谱法分离化合物,并通过与标准品TLC对照、核磁共振、质谱数据鉴定化合物的结构。结果:从滇龙胆花体积分数为95%的乙醇溶液提取物中分离鉴定了12个化合物,主要为小极性的三萜脂肪酸酯酸,含量最大的是乌苏烷型三萜。分别鉴定为软脂酸(1)、古柯二醇-3-棕榈酸酯(2)、羽扇豆醇棕榈酸酯(3)、α-香树脂醇(4)、熊果醇-3-棕榈酸酯(5)、β-谷甾醇(6)、熊果酸(7)、胡萝卜苷(8)、2α-羟基-熊果酸(9)、β-香树脂醇棕榈酸酯(10)、α-香树脂醇棕榈酸酯(11)、β-香树脂醇(12)。结论:对滇龙胆花化学成分进行研究,分离鉴定了12个单体化合物,化合物1~6、8~12均为首次从龙胆花中分离得到。

海拔对苍山地区野生滇龙胆品质的影响

目的:本论文旨在研究海拔对苍山地区野生滇龙胆(Gentiana rigescens Franch.)品质的影响。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法对滇龙胆根茎叶中龙胆苦苷的含量进行测定,并将各部分龙胆苦苷含量与海拔高度进行相关性分析。结果:苍山地区滇龙胆品质优良,根茎叶三部分龙胆苦苷含量均超过《中国药典》规定,根部龙胆苦苷含量在3.9%~8.2%之间。此外,根部龙胆苦苷含量与海拔高度有显著线性相关性,其线性拟合方程为y = −0.2752 + x * 1.35048E−4。结论:苍山地区野生滇龙胆品质优良;在海拔2325.3~2599.7 m区间内,滇龙胆品质随海拔上升而升高;苍山地区海拔2400~2700 m范围内,是潜在的优良人工滇龙胆种植区。

云南栽培滇龙胆炭疽病病原鉴定

对栽培滇龙胆炭疽病的病害症状、病菌形态、病菌培养性状、致病性等进行研究。结果表明,不同症状的2种滇龙胆炭疽病分别由胶孢炭疽菌[Colletotrichum gloeosporioides(Penz.)Sacc.]的2个种(分化型)侵染所致,2种胶孢炭疽菌的菌落形态、分生孢子及附着孢形状等方面有差异,且有性阶段的子囊、子囊孢子也有一定差异。病菌有性阶段为小丛壳菌属(Glomerella Spauldinget Schrenk)。

藏药提宗龙胆花的化学成分研究

从传统藏药提宗龙胆(Gentiana tizuensisFranch.)花的乙醇提取物中分离得到3个化合物,利用波谱方法鉴定为熊果酸(ursolic acid,1)、异荭草苷(isooreintin,2)、日本獐牙菜素(swertiajaponin,3).其中,化合物2为首次从该植物中发现,化合物3为龙胆属植物中首次发现.

不同林药复合种植模式滇龙胆有效成分含量研究

【目的】以云南林药复合种植滇龙胆为研究材料,探讨不同种植模式滇龙胆有效成分积累特征。【方法】采用高效液相色谱法测定滇龙胆根茎部位中龙胆苦苷、马钱苷酸、獐牙菜苦苷和当药苷4种有效成分含量。【结果】7种复合种植模式滇龙胆中龙胆苦苷含量的平均值为67.95mg/g,当药苷含量的平均值为1.85mg/g,獐牙菜苦苷含量的平均值为9.69mg/g,马钱苷酸含量的平均值为7.19mg/g。其中滇龙胆-尼泊尔桤木复合种植龙胆苦苷含量最高,为(85.99±9.58)mg/g;滇龙胆-杉木复合种植当药苷含量最高,为(2.05±0.23)mg/g;滇龙胆-核桃复合种植獐牙菜苦苷含量最高,为(10.10±0.95)mg/g;滇龙胆-核桃复合种植马钱苷酸含量最高,为(9.74±1.94)mg/g。不同林药复合种植模式滇龙胆有效成分的相关性分析结果显示,龙胆苦苷和獐牙菜苦苷含量呈极显著正相关(R=0.35,P<0.01),当药苷分别与马钱苷酸和獐牙菜苦苷含量呈极显著正相关(R=0.49,P<0.01;R=0.41,P<0.01)。【结论】不同林药复合种植模式下滇龙胆有效成分含量不同,其有效成分含量变化可能与其生长的小环境有关。

中药材滇龙胆资源调查和分析研究

采取文献调查、走访调查、样方调查、市场调查等方法,对四川、云南、贵州省区野生滇龙胆资源地理分布、生态环境及云南家种滇龙胆人工栽培现状、市场及开发利用情况等方面进行调查,在此基础上对滇龙胆野生资源蕴藏量进行了估算,并对滇龙胆在药材资源、药材品质、人工种植等方面存在问题进行分析,提出了相应的对策与建议,为促进滇龙胆资源可持续利用提供依据。

藏药提宗龙胆和线叶龙胆花中四种苦苷类成分的HPLC测定

应用HPLC分析方法同时测定藏药提宗龙胆和线叶龙胆两种植物花中落干酸、獐牙菜苦苷、龙胆苦苷、獐牙菜苷4种苦苷类成分的含量。采用Econosphere C18色谱柱(250×4.6mm,5μm),以甲醇-0.5%乙酸为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL/min;检测波长为245nm。结果表明,除提宗龙胆中未检出獐牙菜苦苷外,其它成分均在两种植物中存在,但含量存在一定的差异。

云南栽培滇龙胆病害种类及生态治理

目的:了解栽培滇龙胆病害种类,为预防提供参考。方法:通过田间调查、症状观察、样本采集、病原菌分离、形态鉴定及柯赫氏验证程序来鉴定确诊。结果:栽培滇龙胆的病害为炭疽病(Colletotrichum gloeosporioides)、灰霉病(Botrytis cinerea)、褐斑病(Alternaria tenuis)、锈病(Aecidiumpers)、圆斑枯病(Pestalotiopsis)、匐柄霉叶枯病(Stemphylium sp.)、壳二孢叶枯病(Ascochyta sp.)、格孢腔菌(多胞菌)叶枯病(Pleospora sp.)及胞囊线虫病(Hetero-dera spp.)和根结线虫病(Meloidogyne spp.)。其中以炭疽病为主要病害,发病株率40%以上,严重度达4～5级;其次是锈病,发病株率10%以下;其他病害发病株率在2%以下。结论:滇龙胆以上几种病害为首次报道,滇龙胆是这些病原菌的新记录寄主。针对这些病害提出了相应的防治措施。

贵州产坚龙胆组织培养体系的建立

以贵州野生坚龙胆(Gentiana rigescens Franch)带有顶芽或腋芽的茎段作为外植体,建立坚龙胆的组织培养体系。结果表明,适宜的不定芽诱导培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,最佳的增殖培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.10 mg/L NAA,最适生根培养基为1/2MS+0.1 mg/L IBA。在组织培养过程中还观察到了瓶苗开花的现象。

不同树龄茶树套种滇龙胆对药材矿质元素含量的影响

采用电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）测定滇龙胆（Gentiana rigescens Franch.ex Hemsl.）与不同树龄（3年、4年、5年、9年、12年和15年）茶树（Camellia sinensis）套种后其根、茎、叶3个部位及生长土壤中7种矿质元素（B、Ca、Cu、Fe、Mn、Ni和Zn）的含量。结果显示,滇龙胆中矿质元素平均含量高低顺序为Ca（5 238±2 111）μg/g、Fe（622±238）μg/g、Mn（379±301）μg/g、Cu（75±9.1）μg/g、Zn（46±13）μg/g、B（17±4.9）μg/g、Ni（5.6±3.1）μg/g,与土壤矿质元素含量变化趋势基本一致。根部的B、Ca、Fe、Mn、Ni元素在树龄15年茶树-滇龙胆套种后含量最高,分别为18、3 797、1 050、254、11μg/g,Cu、Zn元素在树龄12年的茶树-滇龙胆套种中含量最高,分别为244、38μg/g。相同营养器官不同树龄的茶树-滇龙胆套种后矿质元素含量具有差异,以根部的Cu、Mn元素含量差异显著,变化范围分别为19~244μg/g和79~254μg/g,分别相差12.8倍和3.2倍;树龄15年、9年的茶树-滇龙胆套种后茎部的Cu含量分别为177、11μg/g,相差16.1倍;树龄3年、5年的茶树-滇龙胆套种后叶部的Cu含量分别为325、11μg/g,相差29.5倍。不同树龄的茶树-滇龙胆套种后根部与土壤矿质元素的相关性以及生物富集系数不同,树龄15年的茶树-滇龙胆套种后根部对Ca、Cu、Mn、Ni、Zn元素的富集能力较强,生物富集系数分别达21.0、3.3、2.2、1.8和4.7。说明茶树复合种植可改变土壤矿质元素的分布,自身生物学特性与复合种植的生态环境共同影响了滇龙胆对矿质元素吸收与运输的能力。

尿素态氮对滇龙胆漂浮育苗幼苗生长和生理特性的影响

以滇龙胆成熟种子为试材,采用漂浮育苗法及植物生理学实验方法研究了尿素态氮对浮育苗幼苗生长和生理特性的影响。结果表明:尿素态氮浓度在25～50mg/L范围内,有利于幼苗茎叶生长;尿素态氮浓度为25mg/L时有利于根生长;同时叶片中叶绿素含量、硝酸还原酶(NR)活性、根系活力极显著(P<0.01)高于未施氮和其它浓度处理;与对照相比,当尿素态氮浓度为100mg/L时,幼苗的生长受到明显抑制,叶片中绿素含量和NR活性降低,根系活力也显著下降。

不同产地滇龙胆地上部分龙胆苦苷的含量测定

目的：测定并比较不同产地滇龙胆地上部分龙胆苦苷的含量，评价其利用价值。方法：建立高效液相色谱方法以测定样品龙胆苦苷含量，并依据其含量来评价开发利用价值。结果：不同产地滇龙胆地上部分龙胆苦苷的含量在0．13％～6．39％之间，平均含量1．95％．结论：滇龙胆地上部分含有约2％的龙胆苦苷，具有综合开发利用价值。

红花龙胆的药用民族植物学及质量评价

采用药用民族植物学的文献研究和调查编目等方法对涉及红花龙胆的文献进行系统梳理,对采集和收集的样品进行鉴定;运用高效液相色谱法对采集和收集样品中的芒果苷进行含量测定.结果显示,红花龙胆分布区内的苗族、土家族及汉族等民族均将红花龙胆用作清热、消炎、止咳之草药,用于治疗肺及肝胆疾病;12批样品中的芒果苷含量平均2.8%,传统应用全草的样品含量均超过2.0%,地区之间的含量没有显著差异.研究表明,芒果苷可视为红花龙胆的药效物质基础;芒果苷限量标准的制订可为以红花龙胆为原料的新药和成药标准的提升提供参考.

滇龙胆种质资源筛选及离体培养的初步研究

以不同居群、同一居群不同滇龙胆植株为试材,采用HPLC法对滇龙胆根茎中龙胆苦苷含量进行测定,再以龙胆苦苷含量≥8.0%的感通、湾桥和蝴蝶泉居群茎尖为外植体,研究了培养基、培养温度对滇龙胆离体培养及植株再生的影响。结果表明:大理苍山滇龙胆不同居群根茎中龙胆苦苷含量差异达到显著或极显著水平,其中,感通居群、中和居群、湾桥居群和蝴蝶泉居群根茎中龙胆苦苷含量较高,达到8.0%以上;上关居群根茎中龙胆苦苷含量最低,为(5.849±0.01493)%。滇龙胆同一居群不同植株根茎中龙胆苦苷含量差异较小,喜洲居群不同植株根茎中龙胆苦苷含量差异达到显著水平(P<0.05),中和居群不同植株根茎中龙胆苦苷含量差异达到极显著水平(P<0.01),其它居群不同植株根茎中龙胆苦苷含量无显著差异。滇龙胆茎尖生长点离体培养及植株再生的最适宜培养基为1/2MS培养基,再生植株诱导率可达80.00%,不定芽高(5.6±0.2)cm,最佳培养条件是20℃/25℃变温培养,再生植株诱导率可达87.78%,不定芽高(7.5±0.2)cm。