Study on the Flower Bud Differentiation Process of Gentiana triflora Pall.

[Objective] This study was to obseve the flower bud differentiation process of Gentiana triflora Pall., and to clarify the flower bud development law and the correlation between flower buds differentiation and external morphology. [Method] The paraffin section method was used to observe the flower bud of Gentiana triflora un- der microscope. [Result] The flower bud differentiation process of Gentiana triflora could be divided into six stages： the undifferentiated stage, initial differentiation stage, sepal primordia differentiation stage, petal primordia differentiation stage, stamen pri- mordia differentiation stage and the pistil primordia differentiation stage. The flower bud differentiation started from early May, when the plant had 10-11 stem nodes, and completed in early June, lasted about 40 d. The effect of plant height on flower bud differentiation was not significant. [Conclusion] The study provided theoretical basis for the high-yield cultivation, variety selection and flowering regulation of Gentiana triflora.

Gentiana macrophylla Pall.:a review of the basic source,traditional use,chemical components,pharmacological activities and quality control

Gentiana macrophylla Pall.(G.macrophylla),whose genus and family belong to the Gentianaceae and Gentiana.The main distribution centers of G.macrophylla resources were the Loess Plateau and the eastern Qinghai-Tibet Plateau in China.G.macrophylla,as a traditional medicine,has a long history and was used in different ethnic medicines.Its roots were used in traditional Chinese medicine,which had the effect of anti-inflammatory,anti-rheumatism,antiviral,promote blood circulation,eliminate swelling and pain,while its flowers were used in traditional Mongolian medicine,which had the effect of removing“Xieriwusu”(“Xieriwusu”means rheumatism),antiviral,reducing swelling.From previous studies,it could be found that there were more than forty components isolated and identified from G.macrophylla.The main chemical components were iridoids,flavonoids,triterpenoids,steroids,phenylpropanoids,and alkaloids.Iridoid terpenoid components represented by gentiopicroside and Loganic acid were the main components of the root of G.macrophylla,which had anti-inflammatory,antioxidant,hepatoprotective,analgesic,antibacterial and promote gastrointestinal tract activities.The flower mainly contains isoorientin and isovitexin as the representative of flavonoids.They have anti-tumor,liver protection,heart protection,inhibition of acetylcholinesterase and inhibition of melanin.It could be seen from previous studies that the research on G.macrophylla was mainly focused on the root,and the flower was rarely studied.It was reported that the experimental data of the anti-inflammatory and anti-tumor effects of G.macrophylla flowers show that its curative effect was very good.Therefore,the flowers of the flower of G.macrophylla can be used as potential medicinal parts for research.Given that flavonoids are mostly found in flowers and exhibit a range of functions,it is possible to investigate the flowers in order to learn more about G.macrophylla’s potential medical benefits.Based on botanical books,Chinese classic texts,medical monographs and academic search engines(Google,Google Scholar,Web of Science,SciFinder,Pubmed,CNKI,Sci-hub,Elsevier and Wanfang),the data and information on G.macrophylla in the past 20 years are inquired and summarized comprehensively.The basic source,traditional use,chemical composition,biological activity,pharmacodynamics and quality control of G.macrophylla was systematically reviewed,in order to provide reliable basis for the subsequent development and utilization of G.macrophylla.

Gentiopicroside, originated from Gentiana macrophylla Pall, possesses antiarthritic efficacy in adjuvant-induced arthritis rats

OBJECTIVE This work aimed to investigate the anti-rheumatoid arthritic effect of gentio.picroside from Gentiana macrophylla Pall using an animal model of adjuvant induced arthritis.METH.ODS Adjuvant arthritis was induced in fifty SD male rats,which were randomly divided into five groups(n=10):control(0.5% CMC-Na) group,AIA(rats with CFA) group,dexamethasone(1 mg·kg^(-1)) group,gentiopicroside(50 mg·kg^(-1)) group,and gentiopicroside(100 mg·kg^(-1)) group.Rats were administered intragastrically with drugs or CMC-Na once a day for a period of 2 weeks.Paw swelling,arthritic index,histological changes were assessed to evaluate the anti-arthritic effect.Weight growth,spleen and thymus indexes were also investigated in.RESULTS Gentiopicroside at dose of 100 mg·kg^(-1) significantly inhibited the secondary paw swelling(P<0.05) and arthritis index(P<0.05),decreased synovial inflammatory infil.tration,synovial hyperplasia and bone erosion.Furthermore,gentiopicroside showed no immunosup.pressive adverse effects in body weight,index of spleen and thyums compared with dexamethasone administration(P<0.05,P<0.01).CONCLUSION Gentiopicroside possessed anti-arthritic efficacy in AIA rats without immunosuppressive effects.

LX-70大孔树脂纯化秦艽中龙胆苦苷工艺研究

目的:筛选适合分离纯化秦艽中龙胆苦苷的大孔树脂并确定纯化工艺参数。方法:以大孔树脂对龙胆苦苷的吸附量和解析率为指标,选择最佳的树脂进行富集。采用单因素实验法对上样浓度、醇洗脱浓度、吸附时间、洗脱体积和流速进行考察,从而确定最佳纯化工艺。结果:LX-70型大孔树脂的吸附和解析效果最佳,其动态饱和吸附量为45.41 mg/g,最佳工艺参数为:龙胆苦苷上样液的质量浓度为30.20 mg/mL,吸附1.5 h,洗脱剂为30%乙醇,乙醇洗脱4B V,洗脱流速1~1.5 BV/h,龙胆苦苷的纯度可达到66.54%,龙胆苦苷的转移率大于95%。结论:LX-70型树脂对龙胆苦苷有较高的吸附量和解析率,洗脱溶剂的用量也更少,其工艺参数可供放大生产参考。

基于GC-MS的3种龙胆属植物的代谢差异分析

为明确中药龙胆的可入药植物即龙胆、三花龙胆及条叶龙胆根部活性成分的差异及3种龙胆的叶片是否具有开发利用价值,通过气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术进行相关代谢物数据采集,根据非靶向代谢组学对3种龙胆根部及叶片的化学组成成分进行研究。采用无监督模式的主成分分析(PCA)、单变量与多元统计分析相结合的偏最小二乘法(PLS-DA)分析和差异代谢物相对含量的聚类分析。结果表明,PCA可对3种龙胆根部及3种龙胆叶片进行明显的区分;PLS-DA分析及聚类分析结果显示在龙胆、三花龙胆、条叶龙胆根部发现了58种差异代谢物,叶片中发现了46种差异代谢物,其中大部分代谢物在龙胆中的积累量高于三花龙胆及条叶龙胆。通过KEGG富集通路分析发现L-脯氨酸和L-丙氨酸均参与了ABC转运蛋白途径,且这2种代谢物在龙胆根部及叶片中均表现为上调,龙胆在抗逆性能及抵御外界病菌能力上优于三花龙胆及条叶龙胆,因此累积下来的化学成分含量也高于三花龙胆及条叶龙胆。研究结果为中药龙胆药原植物的开发利用提供了理论依据。

蒙药材白花龙胆的化学成分研究

目的研究蒙药材白花龙胆的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型高效液相色谱等手段进行分离纯化,并通过波谱数据及质谱数据鉴定化合物结构。结果从白花龙胆花中分离得到8个化合物,分别鉴定为L-焦谷氨酸(1)、焦谷氨酸乙酯(2)、芹菜素(3)、β-谷甾醇(4)、熊果酸(5)、獐牙菜苷(6)、落干酸(7)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-1-羟基-7-甲氧基酮(8)。结论化合物1、2为首次从该属植物中分离得到,化合物1、2、3、8均为首次从该植物中分离得到。

三花龙胆化学成分及抗肿瘤活性研究

目的探讨三花龙胆(Gentiana triflora Pall.)的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法采用95%乙醇对三花龙胆根茎进行回流提取,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,萃取物用硅胶柱色谱、制备型高效液相色谱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据对化合物进行结构鉴定;采用四氮唑盐还原法(MTT)评价各化合物的抗肿瘤活性。结果从乙酸乙酯和正丁醇萃取部位分离得到5个化合物,分别鉴定为globuloside A(1)、cornusoside A(2)、cornolactone A(3)、6,9-epi-8-O-Acetylshanziside methyl ester(4)、5,9-epi-Penstemoside(5);抗肿瘤活性实验表明,化合物1对HepG2细胞的体外增殖具有一定的抑制作用,IC50值为6.7μmol/L。结论所有化合物均首次从该植物中分离得到;化合物1对HepG2细胞的增殖具有明显的抑制活性。

秦艽与小秦艽光合日变化的研究

运用光合作用测定系统,对野生秦艽(Gentiana macrophylla Pall．)和小秦艽(G．dahurica Fisch．)的开花期的光合特性进行研究。结果表明,2种秦艽的净光合速率、蒸腾速率、气孔导度日变化曲线都呈双峰型,有明显的光合“午休”现象。小秦艽的光合速率、蒸腾速率、气孔导度照著高于秦艽,分别高出2．7 μmolCO2·m-2·s-1、1．5 mmol·m-2·s-1和140．7 mmol．m-2·s-1而叶温则低于秦艽2．8C。相关分析表明,开花期的温度、光照对2种秦艽的光合都有一定影响,蒸腾速率、气孔导度调节光合作用,而引起2种秦艽光合速率降低的主要因素为非气孔因素。

超声提取-HPLC法测定秦艽中龙胆苦苷的含量

目的 用高效液相色谱法测定秦艽样品中龙胆苦苷的含量。方法 采用水提法为对比,以水、乙醇和甲醇为溶剂,用频率为20kHz的超声波提取秦艽中的龙胆苦苷,并用HPLC法测定样品中龙胆苦苷的含量,并对两种工艺的秦艽样品的主体成分龙胆苦苷进行定量比较。结果 表明超声提取能够明显地提高秦艽中龙胆苦苷的浸出率。结论 通过运用正交试验法,确定了秦艽的粒径大小(目数)、超声波处理时间(min)以及水剂量(mL)3个因素的最佳组合。

龙胆多糖对小鼠免疫功能的影响

目的:研究龙胆多糖对小鼠免疫功能的影响;方法:腹腔注射龙胆多糖,测定胸腺,脾脏重量并计算脏器指教;采用碳粒廓清实验和测定血清溶血素含量研究龙胆多糖对小鼠免疫功能的影响;结果:20、40mb.kg-1的龙胆多糖能够不同程度地增加小鼠胸腺和脾脏指数,提高正常小鼠的吞噬指数,促进小鼠抗体生成。结论:龙胆多糖对小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能均具有一定的促进作用。

不同产地秦艽的质量和遗传多样性研究

目的:对不同产地秦艽的质量和遗传多样性进行研究。方法:使用性状、显微鉴别方法进行鉴别研究,采用高效液相色谱法进行龙胆苦苷含量测定,利用RAPD技术对其遗传多样性和遗传结构进行研究。结果:表明不同产地秦艽的性状、显微特征具有差异,其有效成分龙胆苦苷的含量也具有一定的差异,各种群的遗传多样性水平依次为湟中种群(K)>环县种群(J)>子午岭种群(H)。结论:对不同地区秦艽药材的外部形态、内部构造、有效成分含量和遗传水平的顺序,为保护野生品种、确保引种栽培秦艽药材的质量提供了科学依据。

陕西产秦艽脂溶部位化学成分研究

目的对陕西产秦艽Gentianamacrophylla的化学成分进行系统研究。方法利用硅胶柱及其他多种色谱手段对秦艽的化学成分进行分离;用UV、IR、MS、1H-NMR、13C-NMR等技术及与对照品对照进行鉴定。结果从脂溶部位得到5个化合物,分别鉴定为:N-正二十五烷基-2-羧基苯甲酰胺(N-pentacosyl-2-carboxy-benzoylamide,)、5-羧基-3,4-二氢-1H-2-苯并吡喃-1-酮(5-carboxyl-3,4-dihydrogen-1H-2-benzopyran-1-one,)、红百金花内酯(erythrocentaurin,)、栎瘿酸(roburicacid,),齐墩果酸(oleanolicacid,)。结论、为两个新化合物,分别命名为秦艽酰胺和红百金花酸,为首次从本属植物中分得。

秦艽提取物抗病毒的药效学实验研究

目的研究中药秦艽在体内对流感病毒的防治作用。方法复制乙型流感病毒感染小鼠肺部感染性疾病动物模型,以利巴韦林为阳性对照,观察秦艽对乙型流感病毒感染小鼠的保护作用。结果秦艽提取物可明显延长乙型流感病毒感染小鼠存活天数和存活率;对乙型流感病毒感染小鼠肺指数、肺组织形态学都有保护作用,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05)。结论秦艽具有较好的抗乙型流感病毒感染的作用。

秦艽愈伤组织的培养及其龙胆苦苷含量的研究

目的:为扩大和提高甘肃道地药材秦艽资源的利用效率。方法:以秦艽种子的萌发所获得的幼芽作为外植体,诱导形成愈伤组织;筛选诱导愈伤组织产生的不同培养基和培养条件,并继代培养;应用HPLC法测定龙胆苦苷的含量。结果:秦艽愈伤组织生长的最佳培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L),最佳继代培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.5 mg/L),最佳继代时间为30 d。龙胆苦苷积累量在指数生长后期(28～30 d)达最高,为0.78 mg/g DW。结论:筛选出了适宜的秦艽愈伤组织培养方法。秦艽愈伤组织在固体培养基上的生长曲线呈"S"型,且愈伤组织中龙胆苦苷的积累量随愈伤组织增殖而不断增加。

大叶秦艽的组织培养与植株再生

以秦艽的叶和下胚轴为外植体,成功地诱导出愈伤组织和再生植株.诱导愈伤组织最合适的培养基为附加2 m g·L- 1 2 ,4 - D和0 .5 mg·L- 1 6 - BA的MS培养基,诱导率可达到10 0 % .愈伤组织转移到附加2 mg·L- 12 ,4 - D和0 .5 mg·L- 1 KT和5 0 0 m g·L- 1 L H的MS培养基上进行继代培养,增殖后的愈伤组织转移到附加0 .1mg·L- 1 2 ,4 - D和0 .5 m g·L- 1 6 - BA的MS分化培养基上进行分化,其分化率可达到86 .6 7% ,将分化出的芽转接到不加激素的MS上,结果可生长出大量的分化苗.

黄管秦艽UPLC指纹图谱研究

目的：建立黄管秦艽和大叶秦艽的UPLC指纹图谱,对两者指纹图谱进行相似度评价,为其质量控制提供有力依据。方法：超高效液相色谱法建立指纹图谱,色谱柱ACQUITY UPLCBEH C18柱（50 mm×2.1 mm,1.7μm）,流动相甲醇-0.04%磷酸溶液梯度洗脱,流速0.3 m L/min,检测波长242 nm,柱温30℃。采用＂中药色谱指纹图谱相似度评价系统＂（2004 A版）分析指纹区和特征峰。结果：标定了黄管秦艽13个共有峰,13批黄管秦艽药材都有较高的相似度（0.976~0.997）,用于指纹图谱适用性检验的大叶秦艽与黄管秦艽也有较高的相似度（0.998）。结论：该方法准确可靠,可用于黄管秦艽药材的质量控制。

秦艽种子发芽特性的研究

目的 研究秦艽种子的发芽特性。方法 用热水浸泡 ,不同温度 ,不同浓度赤霉素处理秦艽种子 ,测定种子贮存条件。结果 秦艽种子发芽适温为 2 0℃ ,用 5 0 0× 10 - 6赤霉素浸种 1天 ,发芽率可达 90 .1%。低温 (0～ 4℃ )保存可延长种子寿命 ,春季解冻后播种出苗整齐健壮。

秦艽中龙胆苦甙药代动力学研究

龙胆苦甙是中药秦艽的重要成分之一。在药代动力学研究中，由于它处于一个多组分的环境之中，因此其它有效成分对它的作用，就会使龙胆苦甙的吸收代谢受到影响。本文采用高灵敏的β－ＣＤ包含荧光法研究兔体内龙胆苦甙在多种成分影响下的药代动力学。结果为龙胆苦甙在兔体内符合二房室模型，各主要药代动力学参数ｔα１／２＝１．０１３４ｈ，ｔβ１／２＝６．７２５７ｈ，Ｔｍａｘ＝１．０３５ｈ，ＡＵＣ＝２７．６７μｇ·ｈ／ｍｌ。

三花龙胆地上、地下器官成分积累规律研究

研究三花龙胆地上器官、地下器官中龙胆苦苷的积累相关规律.采用甲醇超声波提取和高效液相色谱法分析.7月份以前根、茎、叶中龙胆苦苷的含量逐渐上升;7到8月份,根中龙胆苦苷的含量逐渐降低,茎、叶中龙胆苦苷的含量逐渐升高;8到9月份,叶、花中龙胆苦苷的含量逐渐降低,根、茎中龙胆苦苷的含量逐渐升高.以上变化可能与生长期及花期有关:生长期有效成分的含量逐渐升高,花期时有效成分向上输送,花期后有效成分向下输送.

大孔吸附树脂富集秦艽叶中龙胆苦苷的工艺研究

目的:优选用于富集秦艽叶中龙胆苦苷的大孔吸附树脂的型号,并研究其工艺条件和参数。方法:采用不同大孔吸附树脂对龙胆苦苷进行吸附及洗脱性能实验,同时采用高效液相色谱法进行分析检测。结果:筛选出效果较好的D-101大孔吸附树酯,确定了最佳工艺条件。结论:此法可较好的富集龙胆苦苷。