三花龙胆化学成分及抗肿瘤活性研究

目的探讨三花龙胆(Gentiana triflora Pall.)的化学成分及其体外抗肿瘤活性。方法采用95%乙醇对三花龙胆根茎进行回流提取,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,萃取物用硅胶柱色谱、制备型高效液相色谱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据对化合物进行结构鉴定;采用四氮唑盐还原法(MTT)评价各化合物的抗肿瘤活性。结果从乙酸乙酯和正丁醇萃取部位分离得到5个化合物,分别鉴定为globuloside A(1)、cornusoside A(2)、cornolactone A(3)、6,9-epi-8-O-Acetylshanziside methyl ester(4)、5,9-epi-Penstemoside(5);抗肿瘤活性实验表明,化合物1对HepG2细胞的体外增殖具有一定的抑制作用,IC50值为6.7μmol/L。结论所有化合物均首次从该植物中分离得到;化合物1对HepG2细胞的增殖具有明显的抑制活性。

龙胆多糖对小鼠免疫功能的影响

目的:研究龙胆多糖对小鼠免疫功能的影响;方法:腹腔注射龙胆多糖,测定胸腺,脾脏重量并计算脏器指教;采用碳粒廓清实验和测定血清溶血素含量研究龙胆多糖对小鼠免疫功能的影响;结果:20、40mb.kg-1的龙胆多糖能够不同程度地增加小鼠胸腺和脾脏指数,提高正常小鼠的吞噬指数,促进小鼠抗体生成。结论:龙胆多糖对小鼠非特异性免疫和特异性免疫功能均具有一定的促进作用。

HPLC分析秦艽多糖的单糖组成

采用水提醇沉法提取陕西产秦艽多糖,经三氟乙酸水解,水解产物用衍生化试剂1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮柱前衍生化后进行高效液相色谱分析.结果表明,秦艽多糖含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖七种单糖,其摩尔比为0.06∶0.25∶0.03∶1.00∶1.23∶0.87∶3.52.

微波辅助双水相萃取龙胆中黄酮化合物

目的:以龙胆中总黄酮含量为指标,采用乙醇-硫酸铵双水相体系结合微波辅助萃取法,运用正交试验法优化出最佳的提取工艺。方法:采用紫外分光光度法,以芦丁作为对照品,测定龙胆中总黄酮的含量,利用单因素试验和正交试验设计方法优化乙醇质量分数、微波功率、萃取时间、液料比等萃取条件。结果:优化的最佳条件为:双水相的组成为35%乙醇-20%硫酸铵,微波功率420W,萃取时间25min,液料比80∶1,药材颗粒度100目。结论:本实验采用正交试验法对龙胆中的总黄酮提取工艺进行了优化,该方法合理可行,对龙胆中黄酮类化合物的提取具有一定的指导意义。

秦艽多糖体外抗肿瘤的量效与时效关系研究

目的:研究秦艽多糖的体外抗肿瘤活性。方法:采用MTT法研究秦艽多糖在不同浓度和时间条件下,对人肝癌细胞SMMC7402、人胃癌细胞BGC-803、人肺癌细胞A549、人肾癌细胞HEK293的抑制作用。结果:秦艽多糖对人肝癌细胞SMMC7402、人肺癌细胞A549抑制作用明显,但对人胃癌细胞BGC-803、人肾癌细胞HEK293的抑制作用较弱;秦艽多糖对4种肿瘤细胞的抑制作用表现出一定的量效关系及时效关系。结论:秦艽多糖具有较好的体外抗肿瘤活性。

不同采收期三花龙胆中龙胆苦苷含量测定

目的 研究不同时节采收的三花龙胆中龙胆苦苷的含量。方法 采用 HPL C法 ,以甲醇 -水 ( 6 0∶4 0 )为流动相 ,2 74 nm为检测波长。结果 三花龙胆中龙胆苦苷的含量随采收月份不同而各异 ,地下部分根中龙胆苦苷的含量以新生根含量较高 ,药用价值最大。结论 采收期为春季的三花龙胆中龙胆苦苷含量最高。

秦艽多糖通过调控STMN1表达影响肺癌细胞增殖、迁移及侵袭

目的:探讨秦艽多糖是否可通过调控微管不稳定性蛋白1(STMN1)表达而抑制肺癌细胞增殖、迁移及侵袭。方法:体外培养肺癌细胞A549,随机分为对照组、秦艽多糖低、中、高浓度组(25,50,100μg·ml^(-1));采用甲基噻唑基四唑(MTT)与平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;pcDNA 3.1-STMN1转染至A549细胞,采用上述方法检测细胞增殖、迁移及侵袭;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测STMN1、增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki67)、神经型钙黏蛋白(N-cadherin)、上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)的表达量。结果:与对照组比较,秦艽多糖中、高浓度组细胞活力、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数及STMN1、Ki67、N-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05),E-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),且秦艽多糖各浓度组间的指标差异均有统计学意义(P<0.05);与高浓度秦艽多糖+pcDNA 3.1组比较,高浓度秦艽多糖+pcDNA 3.1-STMN1组细胞活力、克隆形成数、迁移细胞数、侵袭细胞数及STMN1、Ki67、N-cadherin蛋白水平显著升高(P<0.05),E-cadherin蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论:秦艽多糖可能通过下调STMN1的表达从而抑制肺癌细胞增殖、迁移及侵袭。