基于NF-κB信号通路探讨湿生扁蕾乙酸乙酯提取物对NCM460细胞凋亡的影响

目的探讨湿生扁蕾乙酸乙酯提取物对人正常结肠上皮细胞NCM460凋亡的影响。方法采用10 g/mL脂多糖(LPS)诱导NCM460细胞建立炎症模型,给予湿生扁蕾乙酸乙酯提取物(50、100、200 g/mL)干预24 h,采用CCK-8试剂盒检测细胞存活率,ELISA法检测细胞中炎症因子IL-1β、IL-6水平,TUNEL染色技术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9及NF-κB信号通路相关蛋白NF-κB、p-NF-κB、IKKα/β、p-IKKα/β、IκBα、p-IκBα蛋白表达,免疫荧光技术观察NF-κB在细胞核中的表达。结果与对照组比较,LPS处理NCM460细胞24 h后细胞存活率降低(P<0.01),细胞凋亡加重(P<0.01),细胞中IL-1β、IL-6水平升高(P<0.01),Bax、caspase-3、caspase-9、p-IKKα/β/IKKα/β、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),并促进NF-κB入核;与LPS组比较,湿生扁扁蕾乙酸乙酯提取物干预24 h后细胞存活率升高(P<0.05,P<0.01),细胞凋亡减轻(P<0.01),IL-1β、IL-6水平降低(P<0.01),Bax、caspase-3、caspase-9、p-IKKα/β/IKKα/β、p-IκBα/IκBα、p-NF-κB/NF-κB蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2蛋白表达升高(P<0.01),并抑制NF-κB入核。结论湿生扁蕾乙酸乙酯提取物可能通过调控NF-κB信号通路改善LPS诱导的NCM460细胞凋亡。

湿生扁蕾质量标准研究

目的:建立湿生扁蕾的质量控制方法。方法:采用薄层色谱法对湿生扁蕾中有效成分熊果酸进行定性鉴别,采用HPLC法测定湿生扁蕾中有效成分木犀草素、当药醇苷、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基[口山]酮和芒果苷的含量。结果:在TLC色谱中,熊果酸色谱鉴别斑点清晰,且阴性对照无干扰;HPLC测定木犀草素、当药醇苷、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基[口山]酮和芒果苷四种成分线性关系良好(r≥0.9998),平均加样回收率分别为99.85%、97.35%、97.06%、97.81%,RSD分别为0.72%、0.85%、0.79%、0.80%。结论:该文建立的质量方法专属性强,简便可行、重现性好,可用于湿生扁蕾的质量控制。

HPLC法测定藏药湿生扁蕾中2种有效成分的含量

目的:建立同时测定藏药湿生扁蕾中木犀草素和1,7-二羟基-3,8-二甲氧基(口山)酮的含量测定方法。方法:采用Hypersil BDS-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.4%磷酸水溶液(B)梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为260 nm。结果:木犀草素在1.2～48μg·mL^(-1)范围内线性良好,回归方程为 Y=54.311X-31.725(r=0.9993),平均回收率为96.3%;1,7-二羟基-3,8-二甲氧基(口山)酮在2.4～96μg·mL^(-1)范围内线性良好,回归方程为 Y=109.9X-111.99(r=0.9999),平均回收率为97.5%。结论:该法简便,准确,重现性好,适用于湿生扁蕾中木犀草素和1,7-二羟基-3,8-二甲氧基(口山)酮的定量分析。

藏药湿生扁蕾的研究进展

从生物学及生态学研究、中药化学成分研究、药剂毒副作用及药理和临床应用等方面,系统阐述了近年来湿生扁蕾(Gentianopsis paludosa Ma)的研究进展。

不同产地藏药材湿生扁蕾中活性成分含量的研究

目的:通过测定不同产地、不同采收时期湿生扁蕾中木犀草素和1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮的含量,考察湿生扁蕾的最佳采收期与最佳产地。方法:用RP-HPLC法,样品直接用70%乙醇提取进样,ZORBAXSB-C18柱,检测波长为260nm,柱温30℃,甲醇-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱,流速1mL·min-1。分析了甘肃15个不同产地湿生扁蕾药材中木犀草素和1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮的含量。结果:15个不同产地湿生扁蕾药材中木犀草素和1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮的含量差别较大,其中木犀草素最高为1.79mg·g-1,最低为0.24mg·g-1,1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮最高为0.68mg·g-1,最低为0.13mg·g-1。结论:同一产地以8月份采收的湿生扁蕾中木犀草素和1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮的含量最高;甘肃15个产地中以临潭县下拉地村产湿生扁蕾中木犀草素和1,7-二羟基-3,8-二甲氧基酮的含量最高。

RP-HPLC法测定湿生扁蕾中当药黄素的含量

[目的]建立反相高效液相色谱法测定湿生扁蕾中有效成分当药黄素含量的方法。[方法]采用Kromasil-C18（250 mm×4.6 mm,5μm.）色谱柱,52%甲醇/水（含0.04%H3PO4）为流动相,流速0.8 ml/min,检测波长270 nm,柱温30℃。[结果]当药黄素在10 min内与其他组分达均到基线分离,当药黄素的线性范围是0.338-2.025μg（r=0.999 5）,加标回收率为103.3%（RSD=3.2%）。[结论]该方法测定快速,结果准确、可靠。

藏药湿生扁蕾药材反相高效液相层析指纹图谱的研究

目的建立藏药湿生扁蕾药材反相高效液相色谱指纹图谱分析方法,为有效控制湿生扁蕾药材的质量奠定基础。方法采用反相高效液相层析(RP-HPLC)技术,选用ZORBAX SB-C18色谱柱,甲醇-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱,紫外检测波长为260nm,流速为1.0mL/min,记录时间为60min,分析了10批湿生扁蕾药材的HPLC指纹图谱。结果在选定的色谱条件下通过相似度分析,确定10个色谱峰构成湿生扁蕾药材指纹图谱的特征峰。结论采用RP-HPLC所建立的指纹图谱具有稳定、重复性好的特点,可用于湿生扁蕾药材的质量控制。

聚酰胺树脂分离纯化藏药湿生扁蕾总黄酮的工艺研究

目的考察聚酰胺树脂分离纯化藏药湿生扁蕾总黄酮的最佳工艺。方法 70%乙醇回流提取湿生扁蕾,提取液回收乙醇后上聚酰胺树脂柱吸附,用不同体积分数乙醇洗脱,比色法检测洗脱液总黄酮的含量。结果聚酰胺树脂能很好地吸附湿生扁蕾中的总黄酮,70%乙醇洗脱总黄酮的回收率为90.32%。聚酰胺树脂在适当处理后可重复利用,但随着重复利用次数的增加,聚酰胺树脂对黄酮的吸附力不断下降。结论湿生扁蕾提取物经聚酰胺树脂分离纯化能得到较纯的总黄酮,且工艺简便易行,得率高,为工业化生产提供了参考依据。

高速逆流色谱法分离纯化藏药湿生扁蕾有效成分

本文以藏药湿生扁蕾为研究对象,利用不同的溶剂体系,采用高速逆流色谱法(HSCCC)对其甲醇粗提物的石油醚和二氯甲烷萃取部位中的化学成分进行分离纯化,结果分离得到化合物7个,经鉴定为齐墩果酸(I)、熊果酸(II)、1,8-二羟基-3,7-二甲氧基口山酮(III)、1,7-二羟基-3,8-二甲氧基口山酮(IV)、1-羟基-3,7,8-三甲氧基口山酮(V)、1,7,8-三羟基-3-甲氧基口山酮(VI)、木犀草素(VII),其中化合物VI为首次在湿生扁蕾中发现.

RP-HPLC法测定湿生扁蕾中当药黄素和当药醇苷的含量

[目的]建立反相高效液相色谱法，同时测定湿生扁蕾中有效成分当药黄素、当药醇苷含量。[方法]采用Kromasil-C18（250mm×4．6mm，5um）色谱柱，流动相甲醇和水（含0．04％H3PO4），在0～20min甲醇：水由40：60～63：37线性梯度洗脱，流速0．8ml／min，检测波长254ml，柱温30℃。[结果]当药黄素、当药醇苷2种有效成分都在17min内均达到基线分离，当药黄素、当药醇苷的线性范围分别是0．338～2．025ug（r=0．9995）、0．275～1．650ug（r=0．9995），加标回收率为103．30％（RSD=3．20％）、99．60％（RSD=2．70％）。[结论]该方法快速，结果准确、可靠。

湿生扁蕾的利胆有效成分研究

目的研究了湿生扁蕾Gentianopsis paludosa Ma的利胆活性部位及化学成分。方法通过提取纯化出不同的极性部位,采用胆管引流法筛选湿生扁蕾利胆作用的有效部位;再利用硅胶柱层析、ODS、Sephadex LH-20等对有效部位进行分离,通过1 H-NMR、13 C-NMR等波谱技术对化合物进行结构鉴定。结果从活性部位分离得到了10个化合物,分别为2,3,5-trimethoxy-1-O-primeverosyloxyxanthone(1),2,3,4,5-tetramethoxy-1-O-primeverosyloxyxanthone(2),1,8-二羟基-3,5二甲氧基口山酮(3),2,3,4,7-tetramethoxy-1-O-primeverosyloxyxanthone(4),1-羟基-3,7,8三甲氧基口山酮(5),1,7-二羟基-3,8二甲氧基口山酮(6),齐墩果酸(7),熊果酸(8),芹菜素(9),1-羟基-2,3,5三甲氧基口山酮(10)。结论其中化合物1,2,3,4为首次从湿生扁蕾中分离得到。

湿生扁蕾不同提取物抗氧化活性与主要成分相关性研究

目的探究湿生扁蕾不同提取物抗氧化活性与其中所含当药黄素、当药醇苷、木犀草素的相关性。方法采用高效液相色谱(HPLC)法同时检测湿生扁蕾不同提取物中当药黄素、当药醇苷、木犀草素含量;通过DPPH·清除实验和ABTS+自由基清除实验两种体系,评价各提取物的抗氧化活性;采用Pearson相关性分析和灰色关联分析法,研究湿生扁蕾不同提取物中当药黄素、当药醇苷、木犀草素含量与抗氧化活性之间的相关性。结果湿生扁蕾乙酸乙酯提取物中当药黄素含量最高,为68.19 mg·g^-1;95%乙醇提取物中当药醇苷含量最高,为21.03 mg·g^-1;正丁醇提取物中木犀草素含量最高,为19.38 mg·g^-1。95%乙醇提取物对DPPH·清除能力最强,IC 50值为0.124 mg·mL^-1;正丁醇提取物对ABTS^+自由基清除能力最强,IC 50值为0.036 mg·mL^-1。Pearson相关性分析发现,与木犀草素相比,当药醇苷含量与DPPH·清除能力、ABTS^+清除能力相关性较好,相关系数R 2分别为0.994、0.823;而木犀草素相关系数分别为0.875、0.746。然而,灰色关联分析结果表明木犀草素含量和当药醇苷含量与DPPH·清除能力、ABTS^+清除能力均有较强的关联度。结论湿生扁蕾提取物中的当药醇苷和木犀草素与其体外抗氧化性有较好的相关性,当药醇苷含量可作为评价湿生扁蕾提取物体外抗氧化性的主要指标性成分。

湿生扁蕾酮对UC肠纤维化大鼠肠上皮细胞间质转化的影响

目的探讨湿生扁蕾酮对溃疡性结肠炎(UC)肠纤维化大鼠肠上皮细胞间质转化的影响。方法通过2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化模型,利用湿生扁蕾酮干预溃疡性结肠炎肠纤维化模型大鼠,采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(S-P)法检测上皮表型标记蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)和间质表型标记蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测E-钙黏蛋白、α-平滑肌肌动蛋白mRNA的表达情况。结果与模型组相比,湿生扁蕾酮显著增加溃疡性结肠炎肠纤维化大鼠肠上皮细胞E-钙黏蛋白的表达,抑制α-平滑肌肌动蛋白的表达。结论湿生扁蕾酮可通过抑制结肠上皮细胞间质转化作用,明显改善2,4,6-三硝基苯磺酸诱导的大鼠溃疡性结肠炎肠纤维化。

藏药湿生扁蕾的配伍研究进展

现代藏药在预防和治疗多种疾病中发挥了不可替代的重要作用,而各种药物配伍使用更好地发挥药物治疗作用。近年来针对藏药湿生扁蕾的配伍运用愈加广泛,广大的植物药学研究工作者对藏药湿生扁蕾的配伍方面进行了研究。本文主要收集了近年来关于藏药湿生扁蕾配伍研究的相关文献,对其临床配伍应用研究成果和理论研究成果进行分析整理为湿生扁蕾的临床应用和研究提供了参考。

湿生扁蕾不同提取部位对肺纤维化模型大鼠肺功能的影响

目的:比较湿生扁蕾不同极性溶剂提取部位对博莱霉素诱导肺纤维化大鼠肺功能的影响。方法:制备纯水、95%乙醇、乙酸乙酯、正丁醇、石油醚不同极性溶剂的湿生扁蕾提取部位,给予博莱霉素诱导的肺纤维化模型大鼠灌胃给药,观察大鼠脏器系数、肺功能及血气指标的变化。结果:湿生扁蕾不同极性溶剂提取部位均能降低博莱霉素诱导肺纤维化大鼠肺系数、脾系数,其中以湿生扁蕾乙醇部位组肺系数下降最为明显(P<0.05)。肺功能方面,湿生扁蕾水提部位组、乙醇部位组、正丁醇部位组、石油醚部位组可显著增加大鼠潮气量(TV)、呼气量(EV)、每分通气量(MV)、最大吸气流速(PIF)、最大呼气流速(PEF)(P<0.05),湿生扁蕾正丁醇部位组可显著增加PEF(P<0.05),湿生扁蕾水提部位组、乙醇部位组、正丁醇部位组、石油醚部位组可显著降低呼吸频率(f)(P<0.05)。湿生扁蕾各组均可显著升高呼气时间(TE)(P<0.01),对50%呼气流速(EF50)影响不明显,湿生扁蕾水提部位组、乙醇部位组、正丁醇部位组可显著升高吸气时间(TI)(P<0.01),湿生扁蕾水提部位组、乙醇部位组、正丁醇部位组、石油醚部位组可显著升高松弛时间(RT)(P<0.05),湿生扁蕾水提部位组、乙醇部位组、正丁醇部位组显著升高动态顺应性(Cdyn)(P<0.05);湿生扁蕾水提部位组、乙醇部位组、石油醚部位组可显著降低被迫呼吸间隙(Penh)(P<0.05)。血气分析表明,湿生扁蕾各组中二氧化碳分压(PCO_(2))、碳酸氢根离子(HCO~-3)均显著降低(P<0.01),氧分压(PO_(2))及血氧饱和度(SaO_(2))均显著升高(P<0.01或P<0.05),其中以湿生扁蕾乙醇部位组最为显著。湿生扁蕾各组中PH、总二氧化碳(TCO_(2))、剩余碱(BE)未见显著变化(P>0.05)。结论:湿生扁蕾不同极性溶剂提取部位均可改善博莱霉素诱导的肺纤维化大鼠肺功能,而在血气分析方面以乙醇提取部位最为显著,推测乙醇提取部位可能为湿生扁蕾抗纤维化的有效部位。

RP-HPLC法测定湿生扁蕾中当药醇苷的含量

采用反相高效液相色谱法测定湿生扁蕾中有效成分当药醇苷的含量.色谱条件Kromasil-C18(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇和水(含0.04%H3PO4)55∶45等度洗脱,流速0.8ml/min,检测波长254nm,柱温30℃.当药醇苷与其它组分达到基线分离,当药醇苷的线性范围为0.275-1.65μg(r=0.9997),加标回收率为99.6%(RSD=2.7%).该方法测定快速,结果准确,可靠.

藏药湿生扁蕾抗纤维化的研究进展

近年来广大的药学工作者对藏药湿生扁蕾抗纤维化方面进行了很多研究,表明藏药湿生扁蕾中的化学成分在抗结肠纤维化、抗肺纤维化、抗肝纤维化三个方面有显著疗效。本文收集了近几年来关于藏药湿生扁蕾的文献,对藏药湿生扁蕾关于抗纤维化方面研究的文献进行整理和分析,并系统阐述了藏药湿生扁蕾抗纤维化的研究进展。

藏药湿生扁蕾对IL-6诱导SW480细胞SATA3活化作用的影响

目的探讨藏药湿生扁蕾对白细胞介素-6(IL-6)诱导SW480细胞信号转录和转录激活因子(STAT3)活化作用的影响。方法选用SW480细胞为实验对象,以不同质量浓度(0,250,500,1 000μg/mL)的湿生扁蕾干预,采用Bio-plex悬液芯片法检测SW480细胞STAT3磷酸化的水平。结果不同质量浓度的湿生扁蕾均有抑制SW480细胞STAT3活化的作用,与对照组比较差异有统计意义(P<0.05),并呈质量浓度-剂量依赖关系。结论湿生扁蕾抗结肠癌的作用与其抑制IL-6介导的STAT3信号通路的活化有关。

藏药湿生扁蕾药理作用研究进展

查阅相关文献,从抗肿瘤,止泻,保肝、利胆,抑菌,抗结肠纤维化,抗炎、镇痛,抗氧化及其他等8个方面对藏药湿生扁蕾的药理作用进行概述,为其临床应用及后续的进一步研究开发提供理论依据。