基于质量源于设计理念的小儿腹痛草标准汤剂的制备工艺及质量标准

目的运用质量源于设计理念(QbD),优化小儿腹痛草标准汤剂的制备工艺,并建立其质量标准。方法根据中药质量标志物理论预测分析关键质量属性;采用失效模型与影响分析筛选关键工艺参数(CPPs);建立关键质量属性的测定方法;根据单因素实验确定初步范围后使用Box-Behnken实验优化提取工艺;以熵值法进行综合评分;建立设计空间,选取较优操作空间进行工艺验证;以最佳工艺制备15批不同产地小儿腹痛草饮片的标准汤剂,最终建立其出膏率、浸出物、薄层色谱、指纹图谱、含量及含量转移率的质量标准。结果以獐牙菜苦苷含量、龙胆苦苷含量及出膏率为关键质量属性;以浸泡时间、加水量、煎煮时间为关键工艺参数;所建立的模型差异有统计学意义;筛选的最佳工艺为:浸泡时间90 min、加水量15倍、煎煮时间30 min(第二煎20 min);出膏率21.13%~30.73%;浸出物含量在82.00%~88.00%;薄层色谱中獐牙菜苦苷斑点清晰;15批样品与参照图谱的相似度均>0.85;獐牙菜苦苷含量250.64~385.21 mg·g^(-1),转移率43.76%~77.73%;龙胆苦苷含量0.69~2.70 mg·g^(-1),转移率56.02%~105.29%。结论基于以上方法及技术筛选出小儿腹痛草标准汤剂制备工艺,可为其配方颗粒的制剂开发及质量控制提供参考。

HPLC法同时测定金胆片中龙胆苦苷等4种主成分的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定金胆片中4种主要活性成分含量的方法。方法:采用Agilent Eclipse X DB C_(18)(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈(A)-0.1%磷酸溶液(B)为流动相梯度洗脱,检测波长为270 nm;柱温为30℃;流速1.0 mL•min^(-1)。结果:龙胆苦苷、虎杖苷、槲皮素和大黄素质量浓度分别在7.875~78.75μg•mL^(-1)(r=0.9999)、6.75~67.50μg•mL^(-1)(r=0.9997)、7.726~77.26μg•mL^(-1)(r=0.9994)、3.809~38.09μg•mL^(-1)(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.31%、99.21%、99.04%、99.59%(n=6),RSD分别为1.86%、1.24%、1.37%、1.15%。结论:该实验方法准确性可靠、重复性和稳定性良好,专属性强,可为金胆片的质量控制和标准提升提供参考依据。

基于随机森林算法的秦艽龙胆苦苷含量快速检测

【目的】基于近红外光谱技术,运用随机森林算法实现秦艽中龙胆苦苷含量的快速、准确、无损检测。【方法】采用HPLC法测定秦艽中龙胆苦苷的含量,正交信号校正结合小波压缩对原始光谱进行预处理,以抽取的小波系数作为光谱特征建立秦艽近红外光谱和龙胆苦苷含量之间的随机森林定量分析模型,同时对4种模型的预测结果进行了对比分析。【结果】原始光谱正交信号校正预处理后分别建立偏最小二乘和随机森林定量分析模型,偏最小二乘回归模型在验证集上的均方根误差(RMSEP)和决定系数(R2)分别为0.2469和0.9368,随机森林定量分析模型在验证集上的均方根误差(RMSEP)和决定系数(R2)分别为0.2075和0.9695。原始光谱正交信号校正后进行离散小波分解,抽取63个中低频小波系数分别建立偏最小二乘和随机森林定量分析模型,偏最小二乘回归模型在验证集上的均方根误差(RMSEP)和决定系数(R2)分别为0.2126和0.9503,随机森林定量分析模型在验证集上的均方根误差(RMSEP)和决定系数(R2)分别为0.1663和0.9804。【结论】通过小波多尺度分解降低了决策树之间的相关性,进一步提高了随机森林定量分析模型的泛化能力和稳健性,该定量分析模型可用于秦艽中龙胆苦苷含量的快速准确检测。

龙胆苦苷的药理作用机制的研究进展

龙胆苦苷为为龙胆科植物龙胆(Gentiana scabra Bge)的主要活性成分。属于环烯醚萜苷类,有着多种药理学作用,本文就近年来龙胆苦苷的药理学作用机制的研究近况进行综述。分别介绍了龙胆苦苷在抗抑郁、保肝、抗肿瘤、抗炎、糖尿病和骨质疏松等方面的研究进展。为龙胆苦苷和龙胆的进一步研究提供参考。

超声提取-HPLC法测定秦艽中龙胆苦苷的含量

目的 用高效液相色谱法测定秦艽样品中龙胆苦苷的含量。方法 采用水提法为对比,以水、乙醇和甲醇为溶剂,用频率为20kHz的超声波提取秦艽中的龙胆苦苷,并用HPLC法测定样品中龙胆苦苷的含量,并对两种工艺的秦艽样品的主体成分龙胆苦苷进行定量比较。结果 表明超声提取能够明显地提高秦艽中龙胆苦苷的浸出率。结论 通过运用正交试验法,确定了秦艽的粒径大小(目数)、超声波处理时间(min)以及水剂量(mL)3个因素的最佳组合。

粗茎秦艽不同部位龙胆苦甙含量的分析

采用高压液相法分析了栽培粗茎秦艽不同部位的有效药用成分龙胆苦甙 (gentiopicrin)的含量 ,并与野生麻花秦艽、达乌里秦艽龙胆苦甙的含量相比较。结果表明粗茎秦艽根、茎、叶均具有较高的开发利用价值 ,为合理开发利用粗茎秦艽提供了科学依据。

高速逆流色谱结合大孔树脂从龙胆中快速分离高纯度龙胆苦苷

目的:建立龙胆中高纯度龙胆苦苷的快速分离制备方法。方法:药材醇提取液经D101大孔吸附树脂柱的层析物直接进行高速逆流色谱(high-speed counter-current chromatography,HSCCC)分离纯化,以醋酸乙酯-正丁醇-水(2∶1∶3)为溶剂系统,下相为流动相,流速1.5 mL.min-1,检测波长254 nm,分离温度30℃,所得产物经高效液相色谱与质谱分析检测,并与标准品对照。结果:在此条件下,经一步分离从300 mg粗提物中得到136 mg纯度为99.6%的龙胆苦苷。结论:该法简便、快速、所得产物纯度高,适合于龙胆苦苷标准品的制备。

龙胆药材中龙胆苦苷含量测定样品制备方法比较

目的 龙胆药材中龙胆苦苷的含量测定时样品的最佳制备方法。方法 采用高效液相色谱法 ,比较甲醇超声提取 (本法 )、甲醇冷浸提取 (2 0 0 0版药典龙胆项下方法 )、甲醇回流提取 (2 0 0 0版药典秦艽项下方法 )及甲醇索氏提取 4种样品制备方法对龙胆苦苷含量测定结果的影响。结果 甲醇超声提取法优于其它三种方法。结论 本方法操作简便易行 ,重现性好 ,准确度高 。

龙胆药材中龙胆苦苷的提取工艺研究

目的:筛选龙胆药材中龙胆苦苷的提取工艺。方法:以龙胆苦苷为指标,利用正交试验法进行提取工艺优选,并以薄层扫描法测定龙胆苦苷的含量。结果:乙醇用量及提取次数对龙胆苦苷的提取有显著性影响(P<0.05)。结论:最佳提取工艺为60%乙醇回流提取3次,每次2h,乙醇用量为药材的18倍。

HSCCC法分离制备龙胆有效成分龙胆苦苷

目的:采用高速逆流色谱技术(HSCCC)从龙胆中分离制备高纯度龙胆苦苷。方法:利用制备型高速逆流色谱仪,以氯仿-甲醇-正丁醇-水(5∶4∶2∶4)为溶剂系统对龙胆甲醇粗提物进行分离,上相为固定相,下相为流动相,转速为820 r/min,流速为2.0 ml/min。结果:所得龙胆苦苷经HPLC分析,纯度达到96.68%(峰面积百分比)。结论:此研究为其他环烯醚萜苷的分离纯化提供了依据。

龙胆药材中龙胆苦苷的含量测定

目的:规范龙胆药材质量标准研究,建立较为准确的龙胆苦苷HPLC含量测定方法.方法:采用ProsphereC-18300A 5μ(250 ×4.6 mm)分析柱,以甲醇-0.4%磷酸(10:90→60:40,0→30 min)为流动相,检测波长选择270 nm.结果:采用本方法龙胆苦苷在0.4024～20.0800 g范围内呈良好的线性关系,平均回收率达99.37%,RSD为2.20%,测定结果表明10批样品中龙胆苦苷含量在1.75%～5.66%.提示本方法重现性好、分离度高,准确、易行.

RP-HPLC测定当药中环烯醚萜和三萜类成分含量

目的：建立应用RP-HPLC测定当药及不同部位中獐牙菜苦苷、当药苷、龙胆苦苷和齐墩果酸的含量测定方法。方法：采用ZORBAX SB-C18（4．6mm×250mm，5μm）色谱柱，流动相分别为乙腈-水（10：90）和甲醇-水（86：14），流速1．0mL·min^-1，检测波长分别为獐牙菜苦苷238nm、当药苷246nm、龙胆苦苷274nm和齐墩果酸207nm，柱温25℃。结果：獐牙菜苦苷、当药苷、龙胆苦苷和齐墩果酸分别在0．0342～0．4275，0．0011～0．0140，0．0007～0．0088，0．0011～0．0088mg·mL^-1线性关系良好，萨分别为0．9992，0．9998，0．9999，0．9996。结论：本法方便、准确，可用于当药药材的质量控制。

麻花秦艽开发利用探讨

采用高效液相色谱法(HPLC)测定甘肃栽培麻花秦艽不同部位、产地和采收期样品的龙胆苦苷含量。结果表明:3年生秦艽的龙胆苦苷含量稍高于2年生,但差异性不显著;根、茎和叶的平均龙胆苦苷含量依次为13.3%、2.95%和2.24%;同一生长年限随采收期延后,茎、叶中龙胆苦苷含量逐渐降低,而根中含量却逐渐上升;不同产地的根样品,依海拔由低到高的,陇西、康乐和临潭分别为10.23%、13.12%和15.54%。本探讨获初步结论:甘肃栽培的麻花秦艽茎和叶的龙胆苦苷均已达到药典的2%标准,宜加以开发利用;从龙胆苦苷产量及生产成本综合考虑,以种植两年较好,根的采收期宜在10月以后封冻前;而以茎叶为生产目标可在8月下旬至9月初采收为佳;高海拔区栽培秦艽有利于秦艽根中龙胆苦苷含量的积累。

龙胆泻肝颗粒质量标准研究

目的建立龙胆泻肝颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法对龙胆、柴胡、黄芩、栀子、泽泻、当归、地黄、甘草进行定性鉴别，并采用HPLC法测定龙胆中龙胆苦苷、栀子中栀子苷、黄芩中黄芩苷的量。结果薄层色谱斑点清晰；龙胆苦苷在0．03306～0．4959B,g范围内呈良好的线性关系（r=1．0000），颗粒A（水煮提取）平均回收率为98．95％，RSD为1．7％，颗粒B（全原粉包衣）平均回收率为97．58％，RSD为0．36％；栀子苷在0．0761～1．1415μg范围内呈良好的线性关系（r=1．0000），颗粒A平均回收率为98．24％，RSD为1．1％，颗粒B平均回收率为102．73％，RSD为1．5％；黄芩苷在0．2144～1．608I,zg范围内呈良好的线性关系（r=1．0000），颗粒A平均回收率为102．15％，RSD为2．7％，颗粒B平均回收率为99．74％，RSD为1．5％。结论该方法简便易行，重复性好，可用于龙胆泻肝颗粒的质量控制。

HPLC法同时测定当归龙荟片中龙胆苦苷和栀子苷的含量

目的建立同时测定当归龙荟片中龙胆苦苷和栀子苷含量的HPLC方法。方法采用DiamonsilC18柱（200．0mm×4．6mm，5μm）分离，以甲醇-体积分数为0．1％的磷酸溶液（体积比为23：77）为流动相进行洗脱，流速为1．0mL·min^-1，检测波长为254nm。结果龙胆苦苷和栀子苷的线性范围分别为0．825～16．50mg·L^-1（r=0．9999）和1．53～30．72mg·L^-1（r=0．9999），方法的平均回收率分别为99．3％（RSD=0．81％）和99．5％（RSD=0．81％）。结论为当归龙荟片的质品控制提供了科学的方法。

祛寒逐风颗粒质量标准研究

目的通过对祛寒逐风颗粒进行定性鉴别、定量分析,建立该制剂的质量控制方法。方法参照《中华人民共和国药典》方法,对秦艽、威灵仙及毒性成分乌头碱进行定性鉴别;采用Waters Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温25℃,流速1.0 mL/min,进样量10μL,以甲醇-0.1%磷酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,波长275、322 nm,同时测定龙胆苦苷、阿魏酸、藁本内酯、欧当归内酯A含量;采用Waters Symmetry C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃,流速1.0 mL/min,进样量10μL,以乙腈-0.1%磷酸(90∶10,V/V)水溶液为流动相,波长210 nm,测定齐墩果酸含量。结果薄层色谱斑点清晰,专属性强,分离度高,阴性无干扰,能有效鉴别秦艽、威灵仙,并对乌头碱进行限量检查。龙胆苦苷、阿魏酸、藁本内酯、欧当归内酯A、齐墩果酸分别在0.686~6.86μg(r=0.9994)、0.0134~0.134μg(r=0.9996)、0.016~0.16μg(r=0.9996)、0.002~0.02μg(r=0.9990)、0.011~0.088μg(r=0.9995)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.90%、99.44%、99.14%、97.74%、95.32%,RSD分别为1.49%、2.69%、2.24%、1.61%、2.79%。结论本研究建立的方法简便、准确,稳定性、重复性好,可用于祛寒逐风颗粒的质量控制。

HPLC测定利咽消颗粒剂和利咽消传统汤剂中甘草苷 甘草酸 龙胆苦苷的含量

目的:采用HPLC测定利咽消颗粒和传统汤剂中甘草酸、甘草苷、龙胆苦苷的含量,提供利咽消颗粒质量控制的方法。方法:选用Shim-pack VP-ODS柱,以甲醇—0.2%醋酸铵(67∶33)为流动相,在250nm波长测定甘草酸;选用Diamonsil C18柱,流动相分别以乙腈—0.5%冰醋酸(20∶80),在276nm波长测定甘草苷;以甲醇—水(40∶60),在254nm波长测定龙胆苦苷。结果:方中甘草酸、甘草苷、龙胆苦苷在传统汤剂和颗粒剂中的含量分别为0.2878、0.1548、0.0187 mg/g和0.6253、0.1818、0.022 mg/g,颗粒剂中平均含量均大于传统汤剂中平均含量;3个成分组间无重复双因素方差分析表明P<0.05。结论:颗粒剂中3种成分的含量高于传统汤剂中的含量,3种成分峰都能有效分离,其测定方法简便、准确、重复性良好,方中其它成分对测定无干扰,可以作为质量控制的方法。

高效液相色谱法测定秦艽不同部位龙胆苦苷的含量

目的测定秦艽不同部位龙胆苦苷的含量。方法以C18反相柱为色谱柱,甲醇-水(1∶4)为流动相。检测波长254nm,用甲醇作提取剂。结果秦艽药材芦头中含有龙胆苦苷,但含量仅为根外皮部的10%,根心材龙胆苦苷约为外皮部的2倍。结论秦艽龙胆苦苷主要集中在根心材部分。

龙胆苦苷的体外稳定性

目的研究龙胆苦苷(GTP)在体外生物样品中的稳定性。方法将龙胆苦苷溶解在不同pH的磷酸盐缓冲液、pH1.2的盐酸溶液及大鼠胃肠黏膜匀浆、胃肠道内容物、肝组织匀浆和血浆中,37℃恒温水浴,孵育一定时间后取样,高效液相色谱法测定龙胆苦苷的浓度,考察其在不同pH缓冲液和生物样品中的稳定性。结果37℃孵育48h后,龙胆苦苷在pH1.2的盐酸溶液、pH6.8、7.4和8.0的磷酸盐缓冲液中的降解百分率分别为2.6%、7.9%、20.2%和34.4%。龙胆苦苷在胃内容物、胃黏膜、小肠内容物、肠黏膜、肝组织匀浆中稳定,而在大肠内容物中12h降解79.8%,血浆中24h降解46.9%。结论GTP在偏酸性环境中较稳定,随碱性增加稳定性显著降低;GTP在胃、小肠、肝脏中稳定,而在血液和大肠中易降解。

不同提取方法对养血软坚方的指标成分及主要药效的影响

目的 比较不同提取方法制备的养血软坚方提取物中指标成分的含量及其抗炎镇痛作用,确定养血软坚方的提取方法。方法分别采用常规水煎提取、乙醇回流提取和乙醇渗漉提取法制备养血软坚方的提取物,以芍药苷和龙胆苦苷为化学指标成分,采用HPLC测定其含量,并以热板法和小鼠耳廓二甲苯致炎模型评价不同提取方法制备的提取物的镇痛和抗炎作用。结果 3种方法制备的提取物中龙胆苦苷含量基本相等,而芍药苷在醇渗漉提取物中含量明显高于醇回流提取物,水煎提取物中含量最低。水煎提取物镇痛作用最强,醇回流提取物次之,醇渗漉提取物最弱;三者的抗炎作用相似。 结论 养血软坚方以水煎提取方法为宜,复方中药提取工艺的选择需结合复方自身的特点。