老鹳草化学成分及抗肿瘤活性研究

目的:对牻牛儿苗科老鹳草属植物老鹳草Geranium wilfordii Maxim.干燥地上部分的化学成分进行研究,并对分离出的化学成分进行体外抗肿瘤活性评价。方法:采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱等对老鹳草的75%乙醇提取物进行分离纯化,并通过核磁共振波谱法对化合物进行结构鉴定。采用人肝癌细胞HepG2,通过CCK-8实验检测分离纯化得到的化合物的体外抗肿瘤活性。结果:从老鹳草的75%乙醇提取物中共分离纯化得到17个化合物,分别鉴定为水杨酸(1)、没食子酸甲酯(2)、没食子酸乙酯(3)、1,2,4-苯三酚(4)、原儿茶酸(5)、(6S,9R)-6,9-二羟基-3-酮基-α-香堇醇(6)、短叶苏木酚酸乙酯(7)、没食子酸(8)、euphorhirtin G (9)、异柯里拉京(10)、金丝桃苷(11)、槲皮素(12)、烟酰胺(13)、山柰酚(14)、短叶苏木酚(15)、莽草酸(16)、槲皮素-3-O-(6″-没食子酰基)-β-D-半乳糖苷(17)。化合物2~4、7、8、10、14、15、17具有体外抗HepG2细胞增殖的活性[半数抑制浓度(IC50)<300μmol·L^(–1)]。结论:化合物2、4、6、9、10、13、16、17均为首次从该植物中分离得到,化合物4、6、9、10、13为首次从老鹳草属植物中分离得到。化合物10、14体外抗HepG2细胞增殖活性较好,IC50分别为27.95、18.24μmol·L^(–1)。

HPLC测定老鹳草中的原儿茶酸

目的建立老鹳草中原儿茶酸含量的测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Thermo柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(3:97);流速1.0 m.lmin-1;检测波长260 nm。结果原儿茶酸0.0275～0.4400μg.ml-1与蜂面积呈良好的线性关系(r=0.9998,n=5);平均回收率为97.26%,RSD=2.69%(n=5)。结论所建方法简便、准确、重复性好,可测定老鹳草中的原儿茶酸。

老鹳草化学成分研究

目的研究太白山地区老鹳草全草的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、重结晶等方法分离纯化化合物,并通过化合物的理化性质和波谱分析鉴定其结构。结果从老鹳草中分离得到6个化合物,分别为β-谷甾醇(1)、没食子酸乙酯(2)、水杨酸(3)、短叶苏木酚酸乙酯(4)、没食子酸(5)、山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(6)。结论化合物2,3和4均为首次从该植物中分离得到。

老鹳草微胶囊复合织物的制备及其药物释放机制

为制备可持续释放,缓释时间较长的载药复合织物,采用界面聚合法,以聚乙烯醇为壁材,中药老鹳草水提取物为芯材制备得到老鹳草微胶囊。以水性聚氨酯为黏合剂,通过干法涂层将老鹳草微胶囊整理到纯棉针织物上制备得到复合织物。采用扫描电子显微镜、热重分析仪、紫外-可见光谱等对老鹳草微胶囊及复合织物的形貌、耐热性、缓释性进行测试与表征。结果表明:老鹳草微胶囊表面光滑,平均粒径为23.9μm,载药率为33.0%,在325℃以下具有较好的热稳定性;制备的老鹳草微胶囊具有缓释性能,其释放遵循非菲克扩散规律,在缓冲溶液中可持续释放24 h以上;复合织物中药物释放遵循同样的规律,在缓冲液中的释放时间有所延长。

均匀设计法优选老鹳草中芦丁和槲皮素提取工艺

目的优选出老鹳草中芦丁和槲皮素提取最佳工艺。方法采用均匀设计安排实验,以芦丁、槲皮素含量作为指标,考察了乙醇浓度、回流时间、回流温度及溶剂用量对芦丁和槲皮素提取率的影响,优选出合理的提取工艺。结果芦丁:用乙醇浓度为75%,乙醇用量为药材的24倍量,提取温度80℃,提取时间为60 m in为最佳。槲皮素:用乙醇浓度为90%,乙醇用量为药材的24倍量,提取温度80℃,提取时间为60 m in为最佳。结论经验证性实验证明所优化条件可靠,适合老鹳草中芦丁和槲皮素的提取工艺参考。

老鹳草对小鼠无水乙醇型胃溃疡的影响

目的探讨老鹳草抗小鼠胃溃疡的机制,为临床使用中药治疗无水乙醇型胃溃疡提供理论依据。方法该实验通过检查胃溃疡指数,检测血清中NO含量,测定胃黏膜中PGE2的含量,来观察老鹳草提取物对无水乙醇型小鼠胃溃疡模型的影响。结果老鹳草水提物组能明显降低溃疡指数(P<0.01),提高血清中NO含量(P<0.01);老鹳草醇提物组能明显提高模型小鼠胃黏膜中PGE2的含量(P<0.05)。结论老鹳草提取物可对抗无水乙醇型小鼠胃溃疡,其中老鹳草水提物抗溃疡作用优于醇提物。

HPLC法同时测定3种老鹳草中7种成分

目的建立HPLC法同时测定老鹳草Geranium wilfordii Maxim.、牻牛儿苗Erodium stephanianum Willd.和野老鹳草Geranium carolinianum L.中没食子酸、原儿茶酸、柯里拉京、老鹳草素、鞣花酸、金丝桃苷和槲皮素的含有量。方法分析采用Agilent 5TC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 m L/min;检测波长280 nm（0～32 min）、360 nm（32～62 min）;柱温30℃。SPSS17.0软件进行数据分析。结果3种老鹳草中7种成分含有量均依次为老鹳草素〉柯里拉京〉鞣花酸〉没食子酸〉原儿茶酸〉金丝桃苷〉槲皮素。其中,没食子酸、槲皮素含有量呈显著性差异（P〈0.05）。结论 7种成分含有量在牻牛儿苗和野老鹳草中相近,而在老鹳草中较低。

老鹳草化学成分研究(Ⅱ)

研究老鹳草(Geranium wilfordii Maxim.)全草的化学成分.采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析,结合重结晶等方法分离纯品化合物,并通过化合物的理化性质和波谱数据鉴定其化学结构.在原来分离的基础上又分离鉴定了4个化合物,分别为琥珀酸(7)、山奈酚(8)、胡萝卜苷(9)、山奈酚-3,7-O-α-L-鼠李糖苷(10),其中化合物7,9,10为首次从该种植物中分离得到,为太白山老鹳草的进一步开发利用提供依据.

老鹳草膏对佐剂性关节炎大鼠血清VEGF和TGF-β1表达的影响

为观察老鹳草(Geranium wilfordii Maxim)膏对佐剂性关节炎(AA)大鼠模型血清细胞因子VEGF、TGF-β1含量的影响,探讨老鹳草对类风湿性关节炎的作用机理,试验将SD大鼠尾根部皮内注射完全弗氏佐剂(CFA)造模,将造模成功的AA大鼠随机分为3组,于第10天开始分别以生理盐水(模型对照组)、老鹳草膏(老鹳草膏组)和MTX(MTX组)处理各试验组,同时设置空白对照组。第45天乙醚麻醉后眼底采血、ELISA法检测血清中VEGF、TGF-β1的浓度。结果表明,与模型对照组和MTX组相比,老鹳草膏可显著降低AA大鼠血清异常升高的VEGF水平,提高血清TGF-β1含量。表明老鹳草可改善大鼠足关节状态,具有免疫调节功能,有助于机体恢复免疫稳定状态。

HPLC法测定3种老鹳草药材中没食子酸和柯里拉京的含量

目的:建立老鹳草、野老鹳草、牻牛儿苗中没食子酸、柯里拉京含量测定方法。方法:采用HPLC法,色谱条件:色谱柱为Diamonsil C18(2)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为274 nm;柱温为25℃。结果:没食子酸和柯里拉京的线性范围分别是:0.202 4μg^2.024 0μg(r=0.999 6)、0.126 0~2.520 0μg(r=0.999 2),平均回收率分别是97.4%(RSD=1.4%)、96.7%(RSD=0.9%)。结论:本法简便、准确、重复性好,可用于老鹳草药材的质量评价。

老鹳草乙醇提取物中黄酮类化合物和挥发性组分及其抗菌活性

【目的】研究老鹳草乙醇提取物对12株临床致病菌的抑菌活性,为开发新型植物来源的抗生素提供重要的参考。【方法】以老鹳草全草乙醇提取物为研究对象,运用气相色谱-质谱联用仪、高效液相色谱仪研究其化学成分;运用滤纸片法测试12株临床致病菌的抑菌活性。【结果】从老鹳草乙醇提取物中鉴定出:18个挥发性组分包括脂肪烃、脂肪酸和生物碱,3个黄酮化合物杨梅苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖、花旗松素。老鹳草乙醇提取物对粪链球菌(MIC 1.0 mg·mL^-1)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MIC 1.0 mg·mL^-1)、大肠杆菌(MIC 1.0 mg·mL^-1)及鲍曼不动杆菌(MIC 2.0 mg·mL^-1)有高敏抑制活性。【结论】恩施地区老鹳草乙醇提取物主要分挥发性组分为脂肪烃、脂肪酸、生物碱;含有杨梅苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖、花旗松素3个黄酮类化合物;对常见临床致病菌具有优良抗菌活性和较广的抗菌谱覆盖面。

老鹳草鞣质的提取及其抑菌效果研究

①目的 :研究老鹳草鞣质成分的最佳提取工艺条件 ,确定其体外抗菌效果 .②方法 :采用正交试验方法确定最佳提取工艺 ,选择料水比、浸提温度、浸提时间 3个因素 ,每个因素选取 3个水平进行试验 ,以提取物的OD值为测定指标 ;用在最佳工艺条件下得到的提取液进行抑菌试验 .③结果 :老鹳草鞣质成分的最佳提取工艺条件是 :料水比为 1:30、浸提温度为 80℃、浸提时间为 30min ;提取物对金黄色葡萄球菌和青霉有明显的抑菌效果 ,对大肠杆菌也有一定抑菌效果 ,而对枯草杆菌和黑曲霉的抑菌作用不明显 .④结论 :老鹳草鞣质具有明显的选择性抑菌作用 .

老鹳草的化学成分研究

目的:研究老鹳草的化学成分。方法:应用色谱技术进行分离纯化,根据化合物的理化性质和谱学数据鉴定其结构。结果:从老鹳草75%乙醇水提取物的乙酸乙酯部位中分离并鉴定了10个化合物结构,分别为β-谷甾醇(1),柯里拉京(2),1,2,3,6-四-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(3),短叶苏木酚(4),原儿茶酸(5),没食子酸(6),对羟基苯甲酸(7),β-胡萝卜苷(8),槲皮素(9),1,3,6-三-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(10)。结论:化合物3~5,7,10为首次从该植物中分离得到,其化学成分与老鹳草另外两个药用来源具有一定相似性,从化学成分上证明了三者具有亲缘关系。

老鹳草中总黄酮的提取及含量测定

目的采用紫外分光光度法测定老鹳草中总黄酮的含量,并比较回流、超声、渗漉三种方法。方法 uv-2501PC型紫外可见分光光度计,510 nm波长处测定吸光度。结果标准液在0.2～2μg/ml之间线性关系良好,其线性关系为A=0.2513C+0.08164,r=0.9990。结论方法稳定,结果准确、可靠,可用于老鹳草的质量控制。

老鹳草鞣质与总黄酮的提取工艺研究进展

老鹳草主要的化学成分有鞣质类、黄酮类、挥发油类、有机酸类等,其中鞣质类和黄酮类的含量所占比例较高。鞣质类有抗肿瘤、抗过敏、抗衰老等特性,黄酮类具有降低血脂和胆固醇、抗真菌、解肝毒等活性。因此,研究老鹳草中鞣质和黄酮类成分的提取具有深远的意义,而目前,老鹳草总鞣质和总黄酮的提取方式有很多且意见不一,为了可以更好地利用与开发其药效成分,本文通过总结相关文献,综述了老鹳草总鞣质与总黄酮的提取工艺。

长嘴老鹳草治疗溃疡性结肠炎67例临床观察

目的:观察长嘴老鹳草治疗溃疡性结肠炎(UC)的临床疗效。方法:99例UC患者随机分为治疗组67例和对照组32例,分别用长嘴老鹳草和水杨酸柳氮磺胺吡啶(SASP)治疗3个月,观察疗效。结果:治疗组总有效率、肠镜病变总有效率、病理总有效率均高于对照组,但无显著性差异(P >0 .0 5 )。结论:长嘴老鹳草对UC具有明显的治疗作用,疗效优于SASP。

正交实验优化老鹳草中6种成分超声提取工艺

目的采用L_(9)(3^(4))正交实验优化老鹳草中老鹳草素、没食子酸、柯里拉京、金丝桃苷、鞣花酸、原儿茶酸6种成分的超声提取方法。方法在单因素实验基础上,选取甲醇体积分数、超声提取时间、料液比3个主要因素进行L_(9)(3^(4))正交实验,研究各因素相互作用对老鹳草中6种成分提取率的影响。结果老鹳草中6种成分的超声法最佳提取工艺为:甲醇溶液体积分数:60%,料液比:1.0 g/10 mL,超声波提取时间:40 min。结论此方法操作简便,重复性高,准确度好,可用于老鹳草中老鹳草素、没食子酸、柯里拉京、金丝桃苷、鞣花酸、原儿茶酸6种成分的同时提取。

不同产地老鹳草指纹图谱的建立及抗肿瘤谱效关系研究

目的建立老鹳草Geranium wilfordii指纹图谱,研究老鹳草提取物的指纹图谱与抗肿瘤活性之间的谱效关系,初步明确老鹳草抗肿瘤主要活性成分。方法运用中药色谱指纹图谱相似度评价软件,建立老鹳草抗肿瘤活性部位的HPLC指纹图谱。采用MTT法,以人乳腺癌MCF-7细胞为模型,对老鹳草样品的醋酸乙酯部位进行抗肿瘤活性测定。采用多元线性回归法,将量化共有峰面积与MTT法测得老鹳草抗肿瘤活性结果相结合,构建老鹳草抗肿瘤谱效关系。结果通过指纹图谱的建立,共标定了16个共有峰,确定1号峰为没食子酸、7号峰为柯里拉京、8号峰为老鹳草素、12号峰为鞣花酸。其中29批药材的相似度均大于0.732,运用主成分分析和聚类分析进一步分析样品间差异,将距离较远的30号样品排除。HPLC指纹图谱中的16个共有峰中,有8个峰对MCF-7细胞有作用,得到MCF-7的谱效方程,经6批药材验证,谱效方程计算值与实际值的偏差率不超过10%。结论该谱-效方程可用于预测老鹳草的抗乳腺癌作用物质基础。

老鹳草提取工艺优选及其对α-淀粉酶抑制作用的研究

目的:优选老鹳草中柯里拉京的提取工艺条件,并通过对α-淀粉酶活力的抑制作用初步判断柯里拉京的降糖作用。方法:以柯里拉京提取率为指标,采用单因素考察提取方法、提取溶剂和提取次数对老鹳草柯里拉京提取率的影响;在单因素试验的基础上,采用正交设计法优化老鹳草水提取工艺条件。结果:老鹳草水提取的最佳工艺条件为加水回流提取2次,用量8,6倍,提取时间1.5,1.5 h,在此条件下,老鹳草柯里拉京的提取率1.2%,影响老鹳草柯里拉京提取率的因素从大到小依次为:加水倍数>提取时间>浸泡时间。结论:通过对α-淀粉酶活力的抑制作用测定,表明老鹳草中柯里拉京有较好的降糖作用。

老鹳草及其不同溶剂萃取物的红外光谱分析与鉴定

目的对老鹳草Geraniumwilfordii及70%丙酮提取不同溶剂萃取物的主体成分、特定成分进行快速的分析与鉴定。方法采用红外光谱、二阶导数光谱结合二维相关红外光谱对老鹳草及其70%丙酮提取不同溶剂萃取物进行分析鉴定。结果红外宏观指纹分析结果发现老鹳草原药材含有1730、1618~1445、1337 cm-1等特征谱线,主要归属于老鹳草素及其衍生物的鞣质类化合物的特征吸收。通过分析不同极性萃取物,可以快速获知老鹳草素及其衍生物的富集情况和发现亚硝酸钾的前体硝酸钾的存在和分布情况。光谱分析结果表明,醋酸乙酯层、正丁醇层萃取物与老鹳草素相关系数分别为0.9443、0.9302,验证大量老鹳草素及其衍生物的存在,及其主要集中在该两层;在氯仿层、醋酸乙酯层和水层提取物中有硝酸钾特征吸收峰,以水层最明显。结论红外光谱不仅可以对主要有机成分(鞣质、黄酮和多糖类等)进行检测分析,同时可对硝酸钾为代表的无机盐进行快速检测,在中药质量与安全的分析评估中其有广阔的应用前景。