隔山消治疗溃疡性结肠炎的机制:基于UPLC-QE-MS、网络药理学及代谢组学技术

目的基于UPLC-QE-MS与网络药理学挖掘隔山消防治溃疡性结肠炎(UC)的靶点及通路,并结合代谢组学技术探讨作用机制。方法采用UPLC-QE-MS技术鉴定隔山消醇提物化学成分,基于Swiss Target Prediction、GeneCards、Pubchem等数据库筛选相应靶点,获取核心PPI,进行GO、KEGG富集分析。将40只雄性C57小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉嗪组(0.2 g/kg)、隔山消组(2.28 g/kg),每组10只,除正常组外,其余各组自由饮用2.5%DSS诱导UC模型,造模期间给药组给予药物灌胃干预。通过体质量变化率、DAI得分评价治疗效果;HE及AB-PAS染色观察结肠组织病理变化;Western blotting技术检测JAK2、STAT3蛋白水平;代谢组学技术鉴别差异代谢物并挖掘代谢通路。结果鉴定出隔山消醇提物化学成分240个,其中甾体类(高含量)19个,得到隔山消(甾体类)靶点177个,UC基因5406个,隔山消与UC交集基因117个,JAK2、STAT3等为核心PPI,在脂质与动脉粥样硬化等通路富集显著。动物实验结果显示,经隔山消治疗后,小鼠体质量变化率上升、DAI评分显著下降(P<0.05),肠组织病理改变明显缓解,JAK2、STAT3蛋白水平显著降低(P<0.05)。鉴定出正常组、模型组及隔山消组之间交集差异代谢物83个,以甘油磷脂、类花生酸、氨基酸成分为主,与甘油磷脂代谢等通路相关。整合分析显示隔山消治疗UC的核心靶点参与了代谢物的调节。结论隔山消可通过调节JAK2、STAT3等核心靶点表达及内源性代谢物水平来缓解脂质及氨基酸代谢紊乱,发挥治疗UC的作用。

基于UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS隔山消化学成分的鉴定

目的采用超高效液相色谱串联四极杆静电场轨道阱高分辨质谱联用技术(UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS)对苗药隔山消中的化学成分进行定性分析。方法隔山消75%甲醇提取液采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C_(18)色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7μm);流动相0.1%甲酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量0.3 mL/min;柱温40℃;进样量2μL。质谱采用ESI源,在正、负离子模式下分别采集数据。通过比对特征碎片离子及各类化合物的一般裂解规律,结合相关文献对化学成分进行定性鉴别。结果共鉴别出64个化合物,包括甾类、苯乙酮类、香豆素类等。结论该研究采用UPLC-Q-Exactive-Orbitrap-MS技术鉴定隔山消中的化学成分,为进一步阐明隔山消中的有效物质基础提供依据。

老鹳草化学成分及抗肿瘤活性研究

目的:对牻牛儿苗科老鹳草属植物老鹳草Geranium wilfordii Maxim.干燥地上部分的化学成分进行研究,并对分离出的化学成分进行体外抗肿瘤活性评价。方法:采用硅胶柱色谱、制备薄层色谱等对老鹳草的75%乙醇提取物进行分离纯化,并通过核磁共振波谱法对化合物进行结构鉴定。采用人肝癌细胞HepG2,通过CCK-8实验检测分离纯化得到的化合物的体外抗肿瘤活性。结果:从老鹳草的75%乙醇提取物中共分离纯化得到17个化合物,分别鉴定为水杨酸(1)、没食子酸甲酯(2)、没食子酸乙酯(3)、1,2,4-苯三酚(4)、原儿茶酸(5)、(6S,9R)-6,9-二羟基-3-酮基-α-香堇醇(6)、短叶苏木酚酸乙酯(7)、没食子酸(8)、euphorhirtin G (9)、异柯里拉京(10)、金丝桃苷(11)、槲皮素(12)、烟酰胺(13)、山柰酚(14)、短叶苏木酚(15)、莽草酸(16)、槲皮素-3-O-(6″-没食子酰基)-β-D-半乳糖苷(17)。化合物2~4、7、8、10、14、15、17具有体外抗HepG2细胞增殖的活性[半数抑制浓度(IC50)<300μmol·L^(–1)]。结论:化合物2、4、6、9、10、13、16、17均为首次从该植物中分离得到,化合物4、6、9、10、13为首次从老鹳草属植物中分离得到。化合物10、14体外抗HepG2细胞增殖活性较好,IC50分别为27.95、18.24μmol·L^(–1)。

HPLC测定老鹳草中的原儿茶酸

目的建立老鹳草中原儿茶酸含量的测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为Thermo柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(3:97);流速1.0 m.lmin-1;检测波长260 nm。结果原儿茶酸0.0275～0.4400μg.ml-1与蜂面积呈良好的线性关系(r=0.9998,n=5);平均回收率为97.26%,RSD=2.69%(n=5)。结论所建方法简便、准确、重复性好,可测定老鹳草中的原儿茶酸。

老鹳草化学成分研究

目的研究太白山地区老鹳草全草的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、重结晶等方法分离纯化化合物,并通过化合物的理化性质和波谱分析鉴定其结构。结果从老鹳草中分离得到6个化合物,分别为β-谷甾醇(1)、没食子酸乙酯(2)、水杨酸(3)、短叶苏木酚酸乙酯(4)、没食子酸(5)、山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(6)。结论化合物2,3和4均为首次从该植物中分离得到。

老鹳草微胶囊复合织物的制备及其药物释放机制

为制备可持续释放,缓释时间较长的载药复合织物,采用界面聚合法,以聚乙烯醇为壁材,中药老鹳草水提取物为芯材制备得到老鹳草微胶囊。以水性聚氨酯为黏合剂,通过干法涂层将老鹳草微胶囊整理到纯棉针织物上制备得到复合织物。采用扫描电子显微镜、热重分析仪、紫外-可见光谱等对老鹳草微胶囊及复合织物的形貌、耐热性、缓释性进行测试与表征。结果表明:老鹳草微胶囊表面光滑,平均粒径为23.9μm,载药率为33.0%,在325℃以下具有较好的热稳定性;制备的老鹳草微胶囊具有缓释性能,其释放遵循非菲克扩散规律,在缓冲溶液中可持续释放24 h以上;复合织物中药物释放遵循同样的规律,在缓冲液中的释放时间有所延长。

均匀设计法优选老鹳草中芦丁和槲皮素提取工艺

目的优选出老鹳草中芦丁和槲皮素提取最佳工艺。方法采用均匀设计安排实验,以芦丁、槲皮素含量作为指标,考察了乙醇浓度、回流时间、回流温度及溶剂用量对芦丁和槲皮素提取率的影响,优选出合理的提取工艺。结果芦丁:用乙醇浓度为75%,乙醇用量为药材的24倍量,提取温度80℃,提取时间为60 m in为最佳。槲皮素:用乙醇浓度为90%,乙醇用量为药材的24倍量,提取温度80℃,提取时间为60 m in为最佳。结论经验证性实验证明所优化条件可靠,适合老鹳草中芦丁和槲皮素的提取工艺参考。

老鹳草对小鼠无水乙醇型胃溃疡的影响

目的探讨老鹳草抗小鼠胃溃疡的机制,为临床使用中药治疗无水乙醇型胃溃疡提供理论依据。方法该实验通过检查胃溃疡指数,检测血清中NO含量,测定胃黏膜中PGE2的含量,来观察老鹳草提取物对无水乙醇型小鼠胃溃疡模型的影响。结果老鹳草水提物组能明显降低溃疡指数(P<0.01),提高血清中NO含量(P<0.01);老鹳草醇提物组能明显提高模型小鼠胃黏膜中PGE2的含量(P<0.05)。结论老鹳草提取物可对抗无水乙醇型小鼠胃溃疡,其中老鹳草水提物抗溃疡作用优于醇提物。

HPLC法同时测定3种老鹳草中7种成分

目的建立HPLC法同时测定老鹳草Geranium wilfordii Maxim.、牻牛儿苗Erodium stephanianum Willd.和野老鹳草Geranium carolinianum L.中没食子酸、原儿茶酸、柯里拉京、老鹳草素、鞣花酸、金丝桃苷和槲皮素的含有量。方法分析采用Agilent 5TC-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）;流动相乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱;体积流量1 m L/min;检测波长280 nm（0～32 min）、360 nm（32～62 min）;柱温30℃。SPSS17.0软件进行数据分析。结果3种老鹳草中7种成分含有量均依次为老鹳草素〉柯里拉京〉鞣花酸〉没食子酸〉原儿茶酸〉金丝桃苷〉槲皮素。其中,没食子酸、槲皮素含有量呈显著性差异（P〈0.05）。结论 7种成分含有量在牻牛儿苗和野老鹳草中相近,而在老鹳草中较低。

老鹳草膏对佐剂性关节炎大鼠血清VEGF和TGF-β1表达的影响

为观察老鹳草(Geranium wilfordii Maxim)膏对佐剂性关节炎(AA)大鼠模型血清细胞因子VEGF、TGF-β1含量的影响,探讨老鹳草对类风湿性关节炎的作用机理,试验将SD大鼠尾根部皮内注射完全弗氏佐剂(CFA)造模,将造模成功的AA大鼠随机分为3组,于第10天开始分别以生理盐水(模型对照组)、老鹳草膏(老鹳草膏组)和MTX(MTX组)处理各试验组,同时设置空白对照组。第45天乙醚麻醉后眼底采血、ELISA法检测血清中VEGF、TGF-β1的浓度。结果表明,与模型对照组和MTX组相比,老鹳草膏可显著降低AA大鼠血清异常升高的VEGF水平,提高血清TGF-β1含量。表明老鹳草可改善大鼠足关节状态,具有免疫调节功能,有助于机体恢复免疫稳定状态。

老鹳草的研究进展

介绍了老鹳草的植物学、栽培学、化学成分及药理等方面的研究情况,为进一步开发和利用老鹳草这一传统中药提供一定的文献基础。

老鹳草化学成分研究(Ⅱ)

研究老鹳草(Geranium wilfordii Maxim.)全草的化学成分.采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析,结合重结晶等方法分离纯品化合物,并通过化合物的理化性质和波谱数据鉴定其化学结构.在原来分离的基础上又分离鉴定了4个化合物,分别为琥珀酸(7)、山奈酚(8)、胡萝卜苷(9)、山奈酚-3,7-O-α-L-鼠李糖苷(10),其中化合物7,9,10为首次从该种植物中分离得到,为太白山老鹳草的进一步开发利用提供依据.

HPLC法测定3种老鹳草药材中没食子酸和柯里拉京的含量

目的:建立老鹳草、野老鹳草、牻牛儿苗中没食子酸、柯里拉京含量测定方法。方法:采用HPLC法,色谱条件:色谱柱为Diamonsil C18(2)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为274 nm;柱温为25℃。结果:没食子酸和柯里拉京的线性范围分别是:0.202 4μg^2.024 0μg(r=0.999 6)、0.126 0~2.520 0μg(r=0.999 2),平均回收率分别是97.4%(RSD=1.4%)、96.7%(RSD=0.9%)。结论:本法简便、准确、重复性好,可用于老鹳草药材的质量评价。

老鹳草粗提物抑制大鼠巨噬细胞中一氧化氮发生的实验研究

目的 一氧化氮(NO)是一种炎症相关因子,通过测定老鹳草各提取成分抑制大鼠巨噬细胞中NO的发生量,确定老鹳草的抗炎活性成分。方法 利用微板紫外比色法,体外测定老鹳草各浸膏对脂多糖(LPS)和γ-干扰素(IFN-γ)诱导RAW 264.7大鼠巨噬细胞系NO的发生量,计算抑制率。结果 老鹳草的乙酸乙酯层浸膏和正丁醇层浸膏具有较强的抑制NO发生量的作用,其中以乙酸乙酯层浸膏的活性最强。结论 此活性测定方法作为一种测定药物抗炎作用的体外筛选体系,具有简便、快速、易行的特点。

苗药隔山消与白族/彝族民族药物隔山消的专利研究

记录了近二十年来针对萝藦科鹅绒藤属植物苗药隔山消和牦牛儿苗科老鹳草属植物紫地榆(亦名隔山消)的医药用途的中国专利进展,并进行了比较分析。从起源、品种、定名、民间习用、功能主治、配伍规律等对二者进行了总结,为进一步研究白族、彝族民间药紫地榆提供了展望和建议。

老鹳草提取物抗胃溃疡作用实验研究

目的研究老鹳草提取物抗实验性胃溃疡活性及机制。方法采用大鼠幽门结扎型、醋酸灼伤型、乙醇诱导型及吲哚镁辛药物诱导型胃溃疡模型,观察老鹳草提取物对胃溃疡抑制作用。结果老鹳草提取物可显著降低大鼠幽门结扎型胃溃疡、乙酸灼伤型胃溃疡、乙醇及吲哚镁辛诱导胃溃疡模型溃疡指数。老鹳草提取物能抑制幽门结扎型胃溃疡大鼠胃酸分泌、抑制胃蛋白酶活性。结论老鹳草提取物具有明显抗实验性胃溃疡作用,其作用机制可能与其抑制胃酸和胃蛋白酶活性有关。

老鹳草酶解法提取工艺优化

[目的]优化老鹳草酶解法提取工艺.[方法]以鞣质含量为指标,通过正交设计试验进行优选.[结果]确定最佳提取工艺条件为纤维素酶用量为10U/g,酶解温度为60℃,酶解时间为60min.[结论]优化的提取工艺简单、稳定且提取率高.

老鹳草的生药学研究

目的 :为老鹳草 (Geranium wilfordii Maxim.)的质量评价标准提供科学资料。方法 :生药学鉴定法。结果 :描述老鹳草根、茎、叶、萼片和粉末的显微特征及理化特征。结论

具腺老鹳草的生药鉴定

首次对老鹤草属药用植物具腺老鹤草(Geranium wilfordii var.glandulosum进行了显微特征、薄层层析及紫外吸收光谱鉴别。

老鹳草乙醇提取物中黄酮类化合物和挥发性组分及其抗菌活性

【目的】研究老鹳草乙醇提取物对12株临床致病菌的抑菌活性,为开发新型植物来源的抗生素提供重要的参考。【方法】以老鹳草全草乙醇提取物为研究对象,运用气相色谱-质谱联用仪、高效液相色谱仪研究其化学成分;运用滤纸片法测试12株临床致病菌的抑菌活性。【结果】从老鹳草乙醇提取物中鉴定出:18个挥发性组分包括脂肪烃、脂肪酸和生物碱,3个黄酮化合物杨梅苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖、花旗松素。老鹳草乙醇提取物对粪链球菌(MIC 1.0 mg·mL^-1)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MIC 1.0 mg·mL^-1)、大肠杆菌(MIC 1.0 mg·mL^-1)及鲍曼不动杆菌(MIC 2.0 mg·mL^-1)有高敏抑制活性。【结论】恩施地区老鹳草乙醇提取物主要分挥发性组分为脂肪烃、脂肪酸、生物碱;含有杨梅苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖、花旗松素3个黄酮类化合物;对常见临床致病菌具有优良抗菌活性和较广的抗菌谱覆盖面。