RP-HPLC-UV法同时测定毛大丁草中大丁苷和8-甲氧基补骨脂素的含量

目的建立HPLC方法同时测定毛大丁草(Gerbera piloselloides(L.) Cass.)中大丁苷和8-甲氧基补骨脂素的含量。方法采用WondaCract ODS-2色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),使用乙腈(A)-水(B)溶液为流动相,进行梯度洗脱,流速:1.0 mL·min^(-1),检测波长:282 nm,柱温:25℃。结果大丁苷和8-甲氧基补骨脂素的标准曲线线性关系良好,相关系数r分别为0.999 3和0.999 4。实验的精密度、重复性和稳定性均能达到要求,大丁苷的平均回收率为99.30%、8-甲氧基补骨脂素的平均回收率为99.40%。以上2种成分都可以与基线分离,并且无其他成分峰的干扰。结论本方法适用于毛大丁草药材的质量控制。

毛大丁草不同部位挥发油成分的比较

用GC—MS技术对毛大丁草叶、茎、根挥发油的化学成分分别进行分析和鉴定,共分离出63个成分,鉴定了55个。不同部位挥发油中低沸点成分的相对含量分别是21.902％,40.112％和77.622％。

毛大丁草化学成分的研究

目的 研究毛大丁草 Gerbera piloselloides根的化学成分。方法 采用硅胶、大孔吸附树脂层析法分离纯化 ,薄层色谱及光谱法进行结构鉴定。结果 从乙醇提取物中的正丁醇萃取部分分得 6个化合物 ,其结构鉴定为熊果苷 ( ) ,瑞香素 - 8- O-葡萄糖苷 ( ) ,2 ,6 -二甲氧基 - 4 -羟基苯酚 - 1- O-葡萄糖苷 ( ) ,1,4 -二羟基 - 2 ,6 -二甲氧基苯 -4 - O-葡萄糖苷 ( ) ,丁香酸葡萄糖苷 ( ) ,marm esinin( )。结论 ～ 首次从该属植物中分离得到。

两种毛大丁草多糖 Gbp和 Gcp的组成研究

目的 从毛大丁草的根中分离提取多糖 ,测定其组成。方法 毛大丁草根的水提物经脱蛋白、脱色、乙醇沉淀得两种粗多糖 ,再经过 Sephadex G- 75和 Sephadex G- 5 0凝胶柱色谱纯化得到两种纯多糖 Gbp和 Gcp,用高效凝胶色谱 (HPGPC)测定 Gbp和 Gcp相对分子质量 ,通过完全酸水解后 ,进行三甲基硅醚化的 GC- MS分析 ,测定两种多糖的组成。结果 Gbp和 Gcp重均相对分子质量分别为 6 .6 5× 10 5和 7.4 5× 10 4 。 Gbp是由木糖、来苏糖、鼠李糖、核糖、葡萄糖和半乳糖组成 ,其比例约为 3∶ 3∶ 3∶ 2∶ 6∶ 2 ;Gcp主要由果糖组成 ,还有少量葡萄糖和木糖 ,其比例为 2 4∶ 4∶ 1。结论 通过凝胶柱色谱分析 ,所提取两种多糖 Gbp和 Gcp均为单一。

毛大丁草根水煎剂对受试动物的镇咳、祛痰、平喘作用

目的:观察毛大丁草根水煎剂对受试动物的镇咳、祛痰、平喘作用。方法:采用氨水诱咳法分别观察毛大丁草根水煎剂对小鼠咳嗽次数及咳嗽潜伏期的影响;酚红排泌法检测毛大丁草根水煎剂对小鼠呼吸道酚红排泌量的影响;离体气管法观察毛大丁草根水煎剂对乙酰胆碱(Ach)、组胺(His)诱导的豚鼠离体气管平滑肌收缩的影响。结果:毛大丁草根水煎剂可减少小鼠咳嗽次数、延长咳嗽潜伏期;可增加小鼠呼吸道酚红排泌量;可降低Ach、His诱导的豚鼠离体气管平滑肌的收缩张力。结论:毛大丁草根水煎剂对受试动物具有镇咳、祛痰、平喘作用。

毛大丁草总黄酮含量测定

目的:建立毛大丁草总黄酮的含量测定方法。方法:以芦丁为对照品,用超声辅助提取、紫外-可见分光光度法测定了毛大丁草总黄酮含量。结果:毛大丁草中总黄酮的相对百分含量为4.438%,精密度实验RSD为1.08%;节丁对照品在0.01375～0.2200mg/mL范围有良好的线性关系,回归方程为A=9.9261C+0.013,相关系数R2=0.9997。结论:该方法操作简便,结果可靠,能为毛大丁草药用价值的开发及扩大资源利用提供科学的依据。

川产兔耳风质量标准初步研究

目的:建立川产兔耳风药材质量标准。方法:通过组织学研究建立兔耳风药材显微鉴别方法;测定其水分、总灰分、酸不溶性灰分以及浸出物含量并建立薄层色谱鉴别方法。结果:川产兔耳风显微鉴别特征性较强,易于鉴别。水分不得过9.68%,总灰分不得过21.75%,酸不溶性灰分不得过14.23%,浸出物不得少于6.31%。薄层色谱鉴定专属性强,重现性较好。结论:所建立的方法能初步评价川产兔耳风的质量。

毛大丁草的化学成分研究

目的:研究毛大丁草Gerbera piloselloides(L.)Cass.的化学成分。方法:采用硅胶、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、Toyopearl HW-40等色谱技术对毛大丁草70%乙醇提取物进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果:从毛大丁草中分离得到18个化合物,分别鉴定为:路路通内酯(1)、白桦脂酸(2)、2,4-二羟基苯乙酮(3)、2,5-二羟基苯甲醛(4)、2,5-二羟基苯乙酮(5)、白桦脂醇(6)、7-羟基-8-甲氧基香豆素(7)、8-甲氧基补骨脂素(8)、伞形花内酯(9)、去氢吐叶醇(10)、gerberlin B(11)、芹菜素(12)、木犀草素(13)、对苯二酚(14)、5-羟甲基-糠醛(15)、异紫花前胡内酯(16)、紫花前胡苷(17)、瑞香素-8-O-葡萄糖苷(18)。结论:其中,化合物11为首次从该植物中分离得到,化合物1~7、10、12~15为首次从该属植物中分离得到。

民族药毛大丁草化学成分研究

目的:研究民族药毛大丁草Gerbera piloselloides(L.)Cass.的化学成分。方法:利用硅胶柱色谱、重结晶以及制备型HPLC等技术对毛大丁草的醇提物进行分离、纯化,采用NMR、MS波谱技术对化合物进行结构鉴定。结果:从毛大丁草的醇提物中分离得到20个化合物,分别鉴定为:3,5-bis(3,3-dimethylallyl)-4-hydroxyacetophen-one(1)、2-[(2S^(*))-6-acetyl-2,3-dihydro-5-ydroxybenzofuran-2-yl]prop-2-enyl-3-methylbutanoate(2)、adian-5-en-3α-ol(3)、烟曲霉三唑酯A(4)、亚油酸甲酯(5)、芝麻素(6)、5-acetyl-2-(2-hydroxyisopropyl)-7-(3,3-dimethylallyl)-2,3-dihydrobenzofuran(7)、shearene A(8)、4-羟基苯乙酮(9)、对羟基苯甲醛(10)、山柰酚(11)、3-吲哚甲醛(12)、熊果醛(13)、咖啡酸乙酯(14)、2,5-二羟基苯乙酮(15)、木犀草素(16)、咖啡酸(17)、阿魏酸(18)、熊果苷(19)、对苯二酚(20)。结论:其中,化合物1~14为首次从该植物中分离得到。

白眉草总黄酮超声辅助提取工艺优化及抗菌活性研究

本文以白眉草为试验材料,采用超声辅助法优化白眉草总黄酮提取工艺,并研究其抗菌活性。采用单因素结合正交设计试验,考察了乙醇浓度、料液比、超声温度和超声时间对总黄酮得率的影响。结果表明:白眉草总黄酮最佳提取工艺条件为:乙醇浓度70%,料液比1:20,超声温度60℃,超声时间45 min。在最佳工艺下白眉草总黄酮得率为3.96%,工艺稳定,可行。白眉草总黄酮提取物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有较强的抑制作用,对大肠杆菌的最低抑菌浓度(MIC)为12.5 g/L,最低杀菌浓度(MBC)为25 g/L;对金黄色葡萄球菌的MIC为25 g/L,MBC为50 g/L。本研究为白眉草在饲料添加剂中的开发利用提供一定依据。

毛大丁草内酯J对乳腺癌细胞周期和凋亡的影响及机制研究

乳腺癌已成为女性发病率最高的恶性肿瘤,严重危害女性的健康。从传统药物中筛选出高效低毒的先导化合物是开发乳腺癌治疗药物的有效途径之一。毛大丁草内酯J是本课题组前期从民族药毛大丁草中分离得到的一种新型香豆素类化合物,具有显著的抗肿瘤活性,但关于毛大丁草内酯J对乳腺癌细胞周期和凋亡的影响及作用机制尚不明确。本研究利用CCK-8法、克隆形成实验、PI染色法探讨毛大丁草内酯J对乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖及周期的影响。通过DAPI、Annexin V/TO-PRO-3、Rhod-2 AM、TMRM、DCFDA染色法及蛋白免疫印迹法考察毛大丁草内酯J对MCF-7和MDA-MB-231细胞凋亡及线粒体功能的影响。结果表明,毛大丁草内酯J通过调控P21/CDC25C/CDK-1/cyclin B1通路,将细胞周期阻滞于G2/M期,显著抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖。此外,毛大丁草内酯J能诱导MCF-7和MDA-MB-231细胞发生线粒体钙超载,线粒体膜电位降低,活性氧生成增加,引发细胞凋亡,其作用机制与激活线粒体凋亡通路有关。综上,毛大丁草内酯J可通过调控P21/CDC25C/CDK-1/cyclin B1通路及激活线粒体凋亡通路诱导乳腺癌细胞周期阻滞及凋亡,为乳腺癌新药研发提供新的候选化合物。