大鼠发情期和间情期下丘脑ghrelin mRNA的表达

为探索下丘脑ghrelin mRNA及GnRH mRNA在大鼠(Rattus norregicus)发情期和间情期的表达特点,通过外部观察和阴道涂片相结合的方法确定发情期和间情期,将12只未经产SD雌性大鼠分为2组,即发情期组和间情期组,每组6只。取动物下丘脑,用实时荧光RT-PCR方法检测ghrelin mRNA和GnRH mRNA的表达丰度。结果表明,间情期组大鼠下丘脑ghrelin mRNA的表达丰度显著高于发情期组(P<0.01);间情期组大鼠下丘脑GnRH mRNA的表达丰度显著低于发情期组(P<0.01)。研究发现,下丘脑ghrelin mRNA和GnRH mRNA在发情期与间情期具不同的表达模式,提示ghrelin可能在下丘脑水平上对GnRH mRNA的表达具下调作用。

猪Ghrelin的基因克隆及其组织中mRNA分布的研究

从猪下丘脑、胃等组织中提取总RNA,根据已发表的猪GhreklinmRNA序列设计合成引物,通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)进行cDNA扩增,获得了282bp的片段,克隆于pMD 18T载体后进行序列分析,确认PCR产物为GhrelincDNA。检测结果表明:初生仔猪的下丘脑和90d生长猪下丘脑、胃底部、十二指肠、空肠、回肠、胰腺、肝脏、肾脏、心脏等部位组织中均有GhrelinmRNA分布。

Ghrelin及其mRNA在大鼠下丘脑和垂体上的定位

为了阐明Ghrelin对大鼠下丘脑与垂体的调控规律,拟采用PV-9000两步法免疫组化和原位杂交方法分别确定Ghrelin及其mRNA在大鼠下丘脑和垂体组织中的定位。结果表明Ghrelin及其mRNA主要分布在下丘脑的弓状核、腹内侧核、正中隆起、室旁核等处的核团,各部分核团细胞着色程度深浅不一,腺垂体细胞中也有大量阳性细胞分布,但神经垂体则无阳性细胞分布。结果提示,Ghrelin及其mRNA在大鼠下丘脑、垂体中均有分布,揭示Ghrelin可能对大鼠促性腺激素释放激素和促性腺激素分泌有一定的调控作用。

犏牛、牦牛睾丸组织中Ghrelin与GHSR基因mRNA表达水平研究

对犏牛、牦牛睾丸组织中生长素(Ghrelin)与生长激素促分泌素受体(GHSR)基因mRNA表达水平进行研究。运用荧光定量PCR方法,检测Ghrelin、GHSR基因在犏牛、牦牛睾丸组织中m RNA的表达水平差异,结果显示:在犏牛、牦牛睾丸组织中,Ghrelin基因m RNA相对表达量犏牛显著高于牦牛(分别为0.8177±0.0225、0.4656±0.0222,P<0.05);GHSR基因mRNA相对表达量也是犏牛显著高于牦牛(分别为0.8622±0.0347、0.4722±0.0761,P<0.05)。相对于牦牛睾丸组织,犏牛睾丸组织中Ghrelin与GHSR基因m RNA均高表达可能是犏牛雄性不育的原因之一。

生长素及其mRNA在大鼠性腺中的分布

【目的】阐明生长素(Ghrelin)及其mRNA在大鼠卵巢和睾丸中的分布。【方法】取成年SD大鼠的睾丸和卵巢,制成石蜡切片,采用免疫组化和原位杂交方法,分别检测Ghrelin和Ghrelin mRNA在大鼠性腺组织中的定位。【结果】雄性大鼠睾丸间质细胞、支持细胞、初级精母细胞、次级精母细胞中均有Ghrelin分布,而精原细胞、精子细胞、肌样细胞中均无Ghrelin分布;Ghrelin mRNA的分布规律与Ghrelin一致。在雌性大鼠卵巢中,Ghrelin主要分布在黄体细胞、卵巢门间质细胞、卵母细胞上;Ghrelin mRNA在黄体细胞、卵巢门间质细胞、原始卵泡、初级卵泡的颗粒层细胞、次级卵泡的卵泡膜层细胞和颗粒层细胞中均有分布。【结论】Ghrelin及其mRNA在大鼠性腺中均有分布,可能对大鼠性腺的发育及其功能有一定的调控作用。

Ghrelin基因在藏母猪生殖轴中mRNA的表达

采用RT-PCR及荧光定量PCR方法,检测并分析藏猪与长白猪在卵泡期及黄体期下丘脑-垂体-卵巢轴中ghrelin基因mRNA的相对表达量。结果显示:在卵泡期,下丘脑、卵巢中ghrelin基因的mRNA表达量均藏猪显著高于长白猪(P<0.05),而垂体中藏猪虽高于长白猪,但两者之间差异不显著(P>0.05);在黄体期,垂体、卵巢中ghrelin基因的mRNA表达量藏猪分别显著高于长白猪(P<0.05),而下丘脑中藏猪虽高于长白猪,但两者之间差异不显著(P>0.05);无论在卵泡期还是黄体期,也无论是藏猪还是长白猪,自身相比,其ghrelin基因在下丘脑-垂体-卵巢轴的mRNA表达都有一致的变化规律,即卵巢显著高于下丘脑(P<0.05),下丘脑显著高于垂体(P<0.05)。结果表明:藏猪ghrelin基因在生殖轴中的mRNA表达量普遍高于长白猪,这将为从分子水平上分析藏猪产仔率低的原因及提高其产仔率的进一步研究奠定基础。

实验研究正丁胺基罗沙替丁乙酸酯治疗胃溃疡

目的探讨正丁胺基罗沙替丁乙酸酯(BRA)对胃溃疡大鼠三叶因子2(trefoil factors2,TFF2)、血清脑肠肽(Ghrelin)、生长抑素(somatostatin,SOM)mRNA表达的影响。方法 Wistar大鼠60只随机分为对照组、雷尼替丁组、BRA组。雷尼替丁组、BRA组大鼠造模。对照组予生理盐水灌胃;雷尼替丁组予雷尼替丁灌胃;BRA组以BRA灌胃。ELISA法检测血清TFF2及Ghrelin水平,逆转录PCR(RT-PCR)法检测SOM mRNA的表达。结果 BRA组血清TFF2水平、SOM mRNA显著高于雷尼替丁组;治疗组Ghrelin水平低于雷尼替丁组P均<0.05。结论 BRA可提高胃黏膜组织再生及修复能力,保护胃黏膜促进胃溃疡愈合,为临床应用提供理论依据。