超声波辅助醇提法提取银杏叶中多种活性成分

采用超声波辅助醇提法综合提取银杏叶中多种活性成分,通过溶剂萃取法脱脂、去叶绿素,经DM130大孔树脂吸附脱附后,再对银杏多糖、银杏莽草酸、银杏黄酮分阶段逐一分离纯化,并对工艺条件进行了优化。结果表明,在75%乙醇为提取溶剂、超声时间为2.0 h、石油醚为脱脂溶剂的最佳条件下,分别采用0.2%H 2O 2脱色法、石油醚沉淀法、酸碱除杂法对银杏多糖、银杏莽草酸、银杏黄酮进行分离纯化,得到高纯度银杏多糖、银杏莽草酸、银杏黄酮,其纯度分别为85.20%、98.25%、35.72%,产率分别为4.67%、3.80%、0.77%。该方法工艺简单、成本低、资源利用度高,为银杏叶的综合开发利用提供了参考。

银杏叶渣中多糖和黄酮的综合提取及其抗氧化活性研究

以银杏叶渣为原料,分别采用水提醇沉法和复合酶辅助醇水溶剂提取法获取银杏叶渣多糖和总黄酮;通过DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基清除试验考查其体外抗氧化活性。结果显示,银杏叶渣与纯水1∶9,85℃提取3 h,其粗多糖得率为17.90%,多糖提取率达3.03%。提取多糖后的银杏叶渣,添加β-葡萄糖甘酶、纤维素酶与果胶酶(1∶1∶2)复合酶,添加量为8.0%,pH值为5,50℃酶解2.5 h,之后在80%乙醇、料液比1∶8、80℃条件下提取4 h,银杏叶渣总黄酮提取率0.59‰,3种游离苷元(槲皮素、山奈酚、异鼠李素)提取率0.93‰,与仅用80%乙醇提取的银杏叶渣总黄酮相比,其总黄酮提取率增加126.9%,游离苷元提取率增长102.2%。3.0 mg/mL多糖对DPPH自由基、ABTS+自由基、羟自由基清除率分别为67.59%、52.56%、56.47%;复合酶辅助醇水溶剂提取法提取的银杏叶渣总黄酮对3种自由基IC_(50)值分别为0.63、1.08、0.35 mg/mL,与溶剂提取法所得银杏叶渣总黄酮IC50相比普遍降低。以上结果表明,银杏叶渣中多糖、总黄酮均具有较优抗氧化活性,复合酶辅助醇水溶剂提取法能够提高银杏叶渣总黄酮中游离苷元含量,且其抗氧化活性也得以提高。

银杏叶多糖分离纯化、结构鉴定及抗氧化活性研究

目的:分离纯化银杏叶多糖(GBLP)并对其结构进行表征及抗氧化活性研究。方法:超声辅助提取制备银杏叶粗多糖,经精制除杂和阴离子交换柱分离获得多糖级分,采用高效凝胶过滤色谱(HPGFC)、气相色谱法(GC)分析相对分子质量和单糖组成;采用体外抗氧化方法评价银杏叶多糖抗氧化活性。结果:GBLP经分离后获得三个级分GBLPⅠ、GBLPⅡ、GBLPⅢ,其相对分子质量(Mw)分别为41861、361352、637533。GBLPⅠ由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成;GBLPⅡ和GBLPⅢ由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖组成,但其摩尔比不同。体外抗氧化实验表明GBLPⅢ对羟自由基的清除能力最强,其次为GBLPⅡ、GBLPⅠ、GBLP;而GBLPⅡ和GBLPⅢ对超氧阴离子清除能力相对较好,其次为GBLPⅠ、GBLP。结论:银杏叶多糖各级分的单糖组成比例、相对分子质量有差异;对羟自由基的清除作用强于对超氧阴离子的清除作用,对羟自由基的清除作用差异可能与Mw及结构相关。

银杏叶多糖对人脐静脉内皮细胞与HL-60细胞粘附的影响

根据人脐静脉血管内皮细胞(ECV-304)的显微和超微结构,研究了银杏叶多糖(GBLP)对ECV-304细胞和HL-60细胞粘附作用的影响.结果表明,正常生长的ECV-304细胞呈不规则形,细胞质丰富,细胞核呈圆形或椭圆形.电镜下,可见细胞表面有绒毛,细胞内具有Weibel-Palade小体.当ECV-304细胞受凝血酶(thrombin)刺激后,与HL-60细胞的粘附能力明显提高;而当用200μg/mL和500μg/mL剂量的GBLP处理ECV-304细胞后,与HL-60细胞的粘附率明显下降.这表明200μg/mL和500μg/mL剂量的GBLP对人脐静脉内皮细胞与HL-60细胞粘附有抑制作用.

不同龄期性别银杏叶多糖含量的比较研究

目的:探索银杏叶的适宜采收树龄、采收性别以及采收的季节。方法:用乙醇沉淀法从不同树龄、不同性别和不同采收期的12种银杏叶中提取出多糖,并进行差异显著性分析,采用HPLC法测定得率最高的一种多糖的含量。结果:银杏叶多糖的平均得率为4.29%,树龄、性别和采收期的组间、组内均有显著或极显著差异,其中10年生雌树、九月下旬采收的银杏叶多糖的得率最高,为5.44%,其多糖含量为61.5%(RSD=2.5%)。结论:不同树龄、不同性别和不同采收季节的银杏叶中多糖含量有差异,这为银杏资源的合理应用提供了依据。

银杏叶多糖的抗肿瘤和免疫调节作用

研究了银杏叶多糖 (GinkgobilobaleafpolysaccharidelGBLP)对小鼠S1 80 实体瘤、腹水瘤的生长抑制作用和对荷瘤小鼠免疫调节作用。小鼠接种S1 80 实体瘤或腹水瘤 ,分组饲喂不同剂量 ( 0mg/kg、5 0mg/kg、10 0mg/kg、2 0 0mg/kg、40 0mg/kg体重 )的GBLP ,检测GBLP对小鼠S1 80 实体瘤和腹水瘤生长的抑制作用以及对荷瘤小鼠脾脏指数和胸腺指数的影响。结果显示 :GBLP荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数显著增加 ;四个剂量的GBLP对S1 80 实体瘤的抑瘤率分别为 6.0 3 %、12 .99%、5 5 .69%、62 .89% ;抑制S1 80 腹水瘤的生长 ,并延长荷瘤小鼠的存活时间 ,表明GBLP具有较强的免疫调节活性和抗肿瘤作用。

银杏叶多糖对蛙卵母细胞膜电位的影响

采用细胞内生物电记录技术对青蛙卵母细胞膜电位变化进行测定，结果发现细胞膜容易受自由基损害，银杏叶多糖能有效地清除自由基，使受损细胞电学功能恢复。

银杏叶多糖提取工艺的研究

以干燥的银杏叶为原料,蒸馏水为提取剂,多糖提取率为考察指标,采用超声波-微波协同萃取的方法,在单因素试验的基础上,通过正交试验设计对银杏叶多糖提取工艺进行了优化。确定了较好的工艺条件:微波功率300W,微波处理30s,超声波功率360W,超声温度50℃,超声时间15min,提取液pH值9,提取4次。在此工艺条件下,银杏叶多糖的提取率为5.869%。

银杏叶多糖提取工艺的优化

以干燥的银杏叶为原料,采用酶法结合水提醇沉法提取其中的活性物质-银杏叶多糖(ginkgobiloba leaf polysaccharide GBLP)。通过单因素实验及正交试验研究了料液比、温度、时间及浸提次数对银杏叶多糖提取率的影响,从而确定了提取银杏叶多糖的提取工艺条件为:浸提温度90℃,浸提时间2h,料液比1∶15,浸提次数3次,纤维素酶0.5%,在提取液真空浓缩至原体积1/10的基础上,用3倍体积的无水乙醇进行沉淀,真空干燥,银杏叶多糖得率4.826%。

银杏叶多糖抑制人白血病细胞增殖的试验研究

[目的]明确银杏叶多糖(PGBL)对白血病的治疗价值。[方法]以干燥银杏叶为材料,提取PGBL;向100μl对数增长期的人急性早幼粒白血病HL-60细胞悬液中分别加入100μl含PGBL50、100、200μg/ml的RPMI-1640培养液,以加入100μlRPMI-1640纯培养液为对照,研究不同浓度(50、100、200μg/ml)PGBL对HL-60细胞增殖的抑制率。[结果]50、100、200μg/ml PGBL对人急性早幼粒白血病HL-60细胞增殖均有不同程度的抑制作用,且随着药物浓度和作用时间的增加,抑制作用增强,即PGBL对HL-60细胞增殖的抑制作用存在剂量-时间依赖性;方差分析结果表明,PGBL对HL-60细胞增殖的抑制率显著高于对照(P<0.01)。[结论]PGBL对HL-60细胞增殖具有较好的抑制作用,且该抑制作用具有浓度-时间依赖性。

银杏叶多糖的制备与结构分析

以秋后银杏叶为原料,通过超声-酶辅助水提醇沉法从银杏叶粉中提取可溶性银杏叶多糖。研究了各因素对多糖提取率影响,根据Box-Behnken中心组合方法设计试验进行响应面分析,得到最佳提取条件。将提取的粗多糖脱蛋白、透析后分级,经过DEAE-52纤维素柱、Sephadex G-100凝胶柱进一步纯化后得到纯化多糖。红外结果表明,纯化后的糖为含有吡喃环的硫酸酯多糖;HPLC结果表明,该多糖的单糖组成甘露糖(Man)、鼠李糖(Rha)、葡萄糖(Glc)、半乳糖(Gal)、木糖(Xyl)、阿拉伯糖(Ara)、岩藻糖(Fuc)摩尔比为1.28∶3.35∶1.42∶3.58∶1.00∶2.66∶2.75;扫描电镜结果表明该糖呈现蓬松的不规则蜂窝状,具有一定的孔隙结构。