银杏组织培养研究Ⅰ．不同培养条件对银杏愈伤组织形成的影响

取银杏树干上萌生的幼嫩枝条的基尖、茎段和叶片分别接种到高生长素含量的ＭＳ培养基上，愈伤组织诱导频率可高达９０％。在低生长素浓度下，诱导频率较低，但能促进茎外植体顶芽和侧芽的生长。以银杏幼茎、幼叶作外植体，形成的愈伤组织形态结构不同：幼基愈伤组织较疏松，呈粒状，色浅黄，生长迅速；幼叶愈伤组织较致密，平滑，色黄绿，生长稍慢。叶片的放置方式很重要：下表皮接触培养基时，愈伤组织只从上表皮发生，而反向放置，上下表皮都不形成愈伤组织。

银杏不同组织器官及愈伤组织培养中端粒酶活性测定

为了研究端粒酶在植物细胞分裂中的作用,探讨端粒酶活性与细胞分裂能力的相关性,本研究以银杏为材料,通过改良的TRAP法分别测定了银杏不同组织器官(种胚、叶片、小孢子、愈伤组织)的端粒酶活性,研究发现具有旺盛分裂能力的愈伤组织具有较高的端粒酶活性。同时以银杏的成熟种胚为材料,采用培养基MS+1.0 mgL6-BA+2.0 mgL NAA诱导出银杏的愈伤组织并采用培养基MS+1.0 mgL 6-BA+2.0 mgL NAA+0.3 mgL 2,4-D+0.2%活性炭进行继代,检测不同代银杏愈伤组织的端粒酶活性,发现不同代愈伤组织均具有较高端粒酶活性。初代愈伤组织的端粒酶活性较高,但愈伤组织继代初期端粒酶活性降低,而后缓慢升高,恢复并超越初代愈伤组织水平后,端粒酶活性处于一个相对稳定的状态,表明愈伤组织继代培养后期细胞具有旺盛且稳定的分裂增殖能力。

银杏组织培养方案优化研究进展

构建银杏的植物组织培养技术体系的目的主要有2个,即通过外植体诱导分化愈伤组织,再脱分化,产生不定芽,最终形成完整植株;对愈伤组织进行继代培养和细胞悬浮培养,以提取次生代谢产物。但培养物面临严重的污染和褐化问题,愈伤组织诱导和分化成功率较低,且次生代谢物含量低于天然叶片平均水平,不利于进一步工业化提取应用。该文从外植体类型、取材和保存方法,消毒剂种类、浓度与使用时间,培养基配方、有益化合物添加,外环境条件筛选、pH与温度控制等方面综述了国内外学者对方案作出的优化。针对污染和褐化2大问题,比较各环节的改进做法,讨论为提高成功率和次生代谢物产量进行的改良设计,并为进一步研究提出适宜方案,指出今后的改进方向和研究重点。