GDNF基因逆转录病毒表达载体的构建及转染神经干细胞的研究

应用基因重组技术将大鼠GDNF cDNA克隆到逆转录病毒载体pLXSN中,经酶切及PCR对重组质粒进行鉴定。将重组体包装到PA317细胞中,并感染增殖旺盛的大鼠神经干细胞,通过免疫细胞化学、RT-PCR和western-blot等方法鉴定转染效率。结果显示GDNF cDNA正确地克隆到逆转录病毒载体pLXSN中,该真核细胞表达载体成功转染增殖旺盛的神经干细胞并有效表达。因此本研究成功构建了GDNF真核细胞表达载体,并成功转染到神经干细胞中。为移植替代和基因治疗神经系统疾病提供了实验基础。