颅内胶质瘤模型建立及肿瘤生长特征观察

目的 建立Wistar、SD大鼠及BALB/c小鼠脑胶质瘤动物模型 ,比较其颅内肿瘤生长特点。方法 借助动物立体定向仪 ,将体外培养大鼠C6胶质瘤细胞 (细胞数为 3× 10 5个 ,悬浮于无血清DMEM培养液 6 0 μl中 )分别接种于Wistar、SD大鼠左侧尾状核区 ,BALB/c小鼠左顶枕区 (接种细胞数为 1× 10 3 )。接种后观察不同种实验鼠的生存状态及肿瘤的生长特性 ,分别于接种后 5、15d进行MRl检查。在实验 3d、6d、9d、12d、15d时解剖标本 ,做组织病理学和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化检查。结果 两种大鼠脑胶质瘤动物模型在组织病理学上接近人脑胶质瘤 .而且具有颅内生长稳定 ,成瘤率高 ,未见颅外转移病灶 ,实验周期短 ,重复性好。而BALB/c小鼠成瘤率76 .6 7%。结论 接种的Wistar、SD两种大鼠脑胶质瘤动物模型 ,其肿瘤生长特性及病理特征与人脑胶质瘤相似。均可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型。而BALB/c小鼠则需进一步探索。

立体定向大鼠脑内SHG-44人脑胶质瘤模型的建立

目的 :探讨建立大鼠 SHG- 4 4脑胶质瘤模型的方法。方法 :选用雄性 Wistar大鼠 ,接种前连续 3d用地塞米松 1 mg/ 1 0 0 g体重灌胃 ;在立体定向条件下选取大鼠脑右侧尾状核区为靶点 ,接种 2× 1 0 5个处于对数生长期的 SHG- 4 4细胞 ,接种后观察大鼠生长状态 ,分别于第 1、 2周进行核磁共振 (MRI)检查。在实验第 2周时解剖标本 ,行组织病理和 GFAP免疫组化检查。结果 :接种 1周后核磁共振检查 ,脑内形成实体瘤 ;HE染色组织病理证实是胶质瘤 ,GFAP免疫组化阳性 ;成瘤率约 6 0 %。结论 :用预先免疫抑制的方法 。

立体定向大鼠脑胶质瘤颅内接种生长情况的观察

目的通过建立类似于人脑胶质瘤的动物模型,观察颅内肿瘤生长特点。方法借助动物立体定向仪,将体外培养大鼠C6胶质瘤细胞(细胞数为3×105个,悬浮于无血清DMEM培养液60μL中)接种于Wistar大鼠左侧尾状核区。接种后观察实验大鼠的生存状态及肿瘤的生长特性,分别于接种后5、14 d进行MRI检查。在实验3、6、9、121、5 d时解剖标本,做组织病理学和GFAP免疫组化检查。结果该方法建立的胶质瘤动物模型在组织病理学上接近人脑胶质瘤.而且颅内生长稳定,成瘤率高,未见颅外转移病灶,实验周期短,重复性好。结论C6大鼠脑胶质瘤动物模型肿瘤生长及病理特征与人脑胶质瘤相似,可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型。

立体定向大鼠C_6脑胶质瘤动物模型的建立

目的 :通过立体定向在 SD大鼠右尾状核区接种 C6 细胞 ,建立类似于人脑胶质瘤的动物模型。方法 :SD大鼠在立体定向条件下 ,左右尾状核区接种 1× 10 6 个 C6 胶质瘤细胞 ,接种后观察实验大鼠的生成状态 ,分别于接种后 1,2 ,3周时进行 MRI检查。在实验三周时解剖标本 ,做组织病理学和 GFAP免疫组化检查。结果 :该方法建立的胶质瘤动物模型在组织病理学上接近人脑胶质瘤 ,而且具有颅内生长稳定 ,成瘤率高 ,没有颅外种植生长 ,实验周期短 ,重复性好。结论 :该大鼠脑胶质瘤动物模型能够满足胶质瘤实验治疗研究的需要 ,而且在细胞接种后 1～ 2周 ,为实验治疗较好的时机。

大鼠脑内C6胶质瘤模型的建立

目的建立稳定可靠的大鼠脑内c6胶质瘤模型。方法取20只健康成年sD大鼠，用立体定向技术将含1×10^6个c6胶质瘤细胞的悬液15山缓慢接种于大鼠左侧尾状核区；接种后3周时随机挑选其中10只大鼠麻醉后行NRI检查，观察肿瘤影像学表现，随后处死大鼠取出肿瘤组织，行免疫组化及HE染色检测肿瘤生长情况；另外9只（麻醉死亡1只）大鼠继续饲养直至死亡，观察其生存时间。结果1只接种肿瘤细胞后出现短暂体重下降，但未出现明显神经系统体征，饲养60d后尸检未见肿瘤生长；其余18只大鼠颅内均有肿瘤生长且无颅外转移现象，病理学检查结果显示脑内肿瘤呈浸润生长，可见新生血管，胶质纤维酸性蛋白表达阳性。荷瘤鼠生存时间为25-47d，平均（32．784-2．34）d。结论采用立体定向方法向大鼠尾状核区种植C6细胞可获得较为稳定、可靠的胶质瘤动物模型，能够满足胶质瘤动物实验研究的需要。

大鼠脑胶质瘤模型建立与生长评估

目的建立SD大鼠脑胶质瘤动物模型,比较其生长评估方法。方法采用立体定向技术,将体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞浓缩悬置,调制为浓度5×1011/L的无血清RPMI1640培养液,将20μl悬液接种于SD大鼠右侧尾状核区。接种后分时段观察与评估实验鼠的神经功能缺损、肿瘤的生长特性、MRI检查结果,并做组织病理学和胶质纤维酸性蛋白及S-100蛋白免疫组化检查。结果立体定向技术接种的大鼠脑胶质瘤动物模型具有颅内生长稳定,成瘤率高,未见颅外转移,实验周期短,可重复性好,组织学上接近人脑胶质瘤等特征。神经功能评分与荷瘤鼠的脑胶质瘤大小及生长进程具有相关性。结论建立的SD大鼠的C6脑尾状核胶质瘤模型,其肿瘤影像及病理特征与人脑胶质瘤相似,神经功能评分可作为其生长的间接评估方法。

C6大鼠脑胶质瘤动物模型建立及病理观察

目的建立简单易行、可靠稳定的大鼠C6脑胶质瘤模型,为研究脑胶质瘤的发病机制和防治方法提供操作平台。方法采用立体定向技术,将体外培养的大鼠C6胶质瘤细胞浓缩悬置,2.5×106个.25μL-1接种于SD大鼠的右侧尾壳核区,种植后连续观察大鼠的生存状态,并分别于7、14、21 d处死大鼠,立刻取脑,制作病理切片,HE染色,光镜下观察。结果大鼠接种C6胶质瘤细胞后,7 d左右生存状态良好,14 d左右出现较为明显的颅内高压症状,21 d左右时多数处于濒危状态。大体标本检查,18只大鼠中除3只意外死亡外,其余成瘤率100%,瘤体随着鼠龄的延长,中线结构明显移位,占位效应愈来愈明显。HE染色可明显观察到大鼠脑组织胶质瘤的形成。结论建立的C6大鼠脑胶质瘤动物模型可靠、稳定,其肿瘤生长特性及病理特征与人脑胶质瘤相似,可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型。

大鼠皮层C6脑胶质瘤模型的建立

目的 :为脑胶质瘤的研究提供实验基础 ,建立稳定可靠的动物模型。方法 :借助于脑立体定位技术 ,在 2 5只雄性Wistar大鼠脑S1区接种含有 10g L琼脂糖的C6细胞悬液。随机分成 4个周组和 1个自然死亡组后观察大鼠的生存期 ,并采用MRI、病理解剖、HE染色及GFAP免疫组织化学方法 ,动态观察各周组肿瘤生长情况。结果 :在不同周组中 ,所有检查均显示颅内肿瘤形成 ,GFAP阳性。 4周内无死亡 ,自然死亡组在第 5周死亡 2只、余 3只于第 6周死亡。结论 :该方法建立的S1区脑胶质瘤模型具备与人脑胶质瘤生长相似的特性 ,肿瘤形成时间短 ,生存期稳定 ,且无脑外转移和颅外扩散 ,适合各种脑胶质瘤实验治疗研究。

立体定向技术注射6-OHDA至内侧前脑束建立帕金森病大鼠模型

目的建立大鼠帕金森病模型,观测其行为学和多巴胺能神经元的变化。方法利用立体定向技术,注射6-OHDA至大鼠脑的内侧前脑束,于注射后2、4、6、8周观测阿朴吗啡诱导的大鼠旋转行为学变化;采用免疫组化染色检测TH的表达,了解中脑黑质多巴胺能阳性神经元变化。结果所有大鼠分别于第2、4、6、8周的进行阿朴吗啡诱导旋转行为测试,67只大鼠中出现16只大鼠(23.8%)旋转圈数>7r/min,并且>210r/30min,为合格的PD大鼠模型。第8周时,大鼠旋转次数平均为10.48±1.91/分。免疫组化检测,成功模型光镜下分别计数双侧黑质TH阳性神经元,损毁侧黑质TH阳性神经元占正常侧的3.8%,即毁损侧TH阳性神经元减少96.2%。结论利用立体定向技术,选择内侧前脑束为靶点,可建立6-OHDA大鼠PD模型。

建立大鼠C6胶质瘤模型及相关因素分析

目的建立大鼠C6胶质瘤模型，探索胶质瘤模型建立的实验步骤、方法及关键点。材料与方法大鼠C6胶质瘤细胞体外培养、传代至对数生长期，离心、计数，调节细胞浓度为1×10^5／μl。应用大鼠立体定位仪，以右侧尾状核头为靶区，注入Wistar大鼠脑内，3d后行MRI扫描观察脑内成瘤情况。本实验共接种8批次50只Wistar大鼠。结果第1～5次共接种24只Wistar大鼠，接种后第1、2天意外死亡2只，其余22只大鼠MRI扫描可见肿瘤生长，成瘤率高。第6、7次以同样方法及条件接种20只大鼠，MRI扫描证实仅有5只大鼠成瘤。第8次更换肿瘤细胞后接种6只大鼠，均成瘤。结论肿瘤是否成瘤与细胞选择密切相关，要选择新近诱导出的大鼠胶质瘤细胞，以保证细胞的抗原性，是提高成瘤率的关键。

C6脑胶质瘤模型大鼠MRI影像及形态学观察及其意义

目的:建立稳定可靠的大鼠C6胶质瘤模型,对模型动物脑瘤体进行磁共振成像(MRI)影像动态观察及病理形态学观察,为抗脑胶质瘤药效学研究提供实验基础。方法:选择10只健康成年雄性Wistar大鼠,用立体定向将20μL含有1×106个C6胶质瘤细胞的悬液缓慢接种于大鼠左侧尾状核区;接种后对10只大鼠进行一般状况观察,并分别于接种后第2、3和4周进行MRI影像动态学观察,同时对自然死亡荷瘤大鼠脑组织进行大体和病理组织学检查,计算荷瘤大鼠生存期。结果:大鼠术后2周出现活动和进食量减少、皮毛污秽及结膜充血等表现;3周后,有的大鼠出现肢体抽搐、偏瘫、身体扭曲和自身旋转等神经系统症状,10只荷瘤大鼠分别于8～30d自然死亡。本组荷瘤大鼠中位生存期为18d,平均生存期为(18.3±7.3)d。荷瘤大鼠脑瘤体随着瘤龄的增加而增大,病理学检查显示肿瘤细胞排列混乱致密,核分裂相易见,肿瘤内可见有血管组织增生,肿瘤浸润性生长呈指状突入周边正常组织。肿瘤细胞胶质酸性纤维蛋白(GFAP)表达呈阳性。结论:采用立体定向技术成功建立大鼠C6胶质瘤动物模型,MRI动态及病理形态学观察结果为选择适当的时间窗进行抗胶质瘤药物药效学研究提供实验基础。

大鼠C6脑胶质瘤生长规律的MRI与病理学观察

目的建立稳定可靠的大鼠C6脑神经胶质瘤模型,并运用1.5 TMRI观察脑胶质瘤瘤体生长的变化规律,为进行脑胶质瘤的在体实验研究提供基础。方法C6胶质瘤细胞培养后,采用立体定向仪尾状核种植C6胶质瘤细胞,建立C6脑胶质瘤大鼠模型50只,分为4组,分别于第7 d(n=10),第14 d(n=10),第21 d(n=10)处死,最后1组自然死亡(n=20)用于生存分析。用1.5 TMRI作扫描成像动态观察接种后第7、14、21 d时肿瘤的MRI瘤体生长变化,并于MRI检查后立即处死各组大鼠将大体病理结果同MRI瘤体积进行比较。结果本研究应用立体定向尾状核接种C6胶质瘤细胞,所有接种大鼠均有胶质瘤生长(100%),免疫组化GFAP染色阳性,肿瘤在14～21 d生长迅速,25 d后大鼠开始出现死亡。1.5 TMRI能够较好地显示大鼠大脑正常组织及结构、瘤体和瘤周水肿区。MRI测量瘤体和大体病理结果相近。结论采用立体定向法向大鼠尾状核接种C6神经胶质瘤细胞成功率达100%;1.5 TMRI能够较好地反映大鼠脑胶质瘤生长的变化,为脑胶质瘤的在体实验研究提供基础;于第14～21 d之间行相关医学干预是合适时机。

大鼠C6脑胶质瘤模型的病理特征与MRI的观察

目的建立SD大鼠C6胶质瘤模型并对其病理特征及MRI进行观察。方法50只SD大鼠随机分成5组,每组10只,C6胶质瘤细胞悬液立体定向接种于大鼠的右侧尾状核,接种后观察大鼠的生活状态、生存期;分别于接种后不同时段进行MRI观察肿瘤生长特性及肿瘤体积的测量;取不同时段组大鼠脑标本行脑组织HE染色、透射电镜(transmissionelectronmicroscope,TEM)、脑组织含水量测量(与10只正常大鼠对照)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化检查。结果立体定向颅内接种成功率97.5%,未见远处及颅外转移,肿瘤在一定时期内生长较快,脑水肿随肿瘤的生长明显加重,生存期观察组中7只荷瘤鼠死亡,3只肿瘤自发部分消退。结论立体定向建立大鼠C6胶质瘤模型成功率高,接种后颅内肿瘤呈浸润性生长,与人脑胶质瘤具有相似性,由于生存期观察组中有部分荷瘤鼠出现肿瘤自发部分消退,故应用该模型评价治疗效果时应慎重;T1WI增强扫描可清晰显示肿瘤影像,且能更早发现肿瘤;MRI联合病理可较好反映肿瘤生长方式及发展过程。

三种鼠脑胶质瘤模型的建立与比较

目的 ;建立GL261胶质瘤细胞C57BL/6小鼠、C6胶质瘤细胞SD大鼠及BALB/c小鼠皮下动物模型,比较其肿瘤生长特点。方法借助动物立体定向仪,将体外培养小鼠GL261、大鼠C6胶质瘤细胞分别接种于C57BL/6小鼠及SD大鼠右侧尾状核区,C6胶质瘤细胞接种于BALB/c小鼠左前肢皮下。接种后观察不同种实验鼠的生存状态及肿瘤的生长特性,颅内模型于接种后7d、14d、21d、28d进行MRI检查,皮下模型测量体积,并绘制生长曲线。解剖标本,做组织病理学和胶质纤维酸性蛋(GFAP)免疫组化检查。结果 GL261胶质瘤细胞C57BL/6小鼠模型较之后两种模型在组织病理学上接近人脑胶质瘤,而且颅内生长稳定,成瘤率高,未见颅外转移病灶,实验周期短,重复性好。结论 GL261胶质瘤细胞C57BL/6小鼠模型,其肿瘤生长特性及病理特征与人脑胶质瘤相似,可作为临床胶质瘤基础研究的理想模型。

利用C6胶质瘤干细胞立体定向建立大鼠脑胶质瘤模型

目的利用C6胶质瘤干细胞建立wistar大鼠脑胶质瘤模型,观察肿瘤生长规律及病理特征,探讨利用肿瘤干细胞构建模型的优势。方法体外提取并培养C6细胞系中胶质瘤干细胞,应用立体定向法在鼠脑右侧尾状核区接种104个胶质瘤干细胞,术后连续观察大鼠生存状态和生存时间,分时段行鼠脑MRI检查、病理HE切片及GFAP免疫组织化学检查,观察肿瘤生长及病理特征。结果利用本方法建立模型成瘤率为100%,术后大鼠恢复快,术后反应轻,未见颅外转移,生存期稳定,重复性好,肿瘤生长规律、影像学特征及组织病理特点与人脑胶质瘤相似。结论利用胶质瘤干细胞建立的大鼠脑胶质瘤模型稳定可靠,肿瘤生长更贴近胶质瘤在脑内自然发生的特点,且较传统方法脑内注射体积小,模型制作时间短,术后恢复快,成瘤率更高等优点,为研究胶质瘤干细胞在肿瘤形成过程中的生长方式、分子机制及实验性治疗提供了一个较为理想的模型。