Anti-colon cancer activity of water-soluble polysaccharides extracted from Gloeostereum incarnatum via Wnt/β-catenin signaling pathway

The incidence rate of colon cancer ranks the third among malignant tumors worldwide.Gloeostereum incarnatum(GI),a fungus with homology of medicine and food,has multiple pharmacological activities.It was investigated in this study that the anti-colon cancer effect of polysaccharides purifi ed from GI(GIPS)in ApcMinC/Gpt mice(an in situ colon cancer mouse model).Eight-week administration with GIPS at doses of 30 or 90 mg/kg strongly inhibited tumor growth including the reduction on numbers and the suppression of the size without infl uencing the animals’body weight and organ functions.According to the proteomics performing by antibody array,among 308 detected cytokines,GIPS significantly regulated 89 of them.Compared with vehicle-treated mice,GIPS effectively reduced the levels of interleukin(IL)-1β,IL-4,IL-6,IL-17,IL-22,tumor necrosis factor(TNF)-α,matrix metalloproteinase(MMP)-2,and enhanced the levels of IL-15 and IL-18 in serum and/or colon tissues,which suggested its anti-inflammation of GIPS.GIPS suppressed nuclear aggregation of β-catenin,affected the expression of WNT1 and related proteins,thereby regulated the activation of the Wnt signaling.Altogether,GIPS can inhibit the growth of colon cancer,at least partially,via inhibiting the Wnt/β-catenin signaling pathway.

胶韧革菌Gloeostereum incarnatum S．Ito et Imai研究（Ⅰ）──发酵产物体外抑菌作用

利用胶韧革菌的发酵产物，采用杯碟法，作了对人体六种细菌的体外抑菌作用试验，结果表明：浓至原液、稀至２５％的稀释液，都显示出显著的抑菌活性。

胶韧革菌Gloeostereumincarnatum S.ItoetⅠ mai研究Ⅱ──深层培养

胶韧革菌Gloeostereumincarnatum发酵产物对人体六种细菌具有较强的抑制作用，已做过报道．采用编号为8903菌株对该菌株的最适深层培养条件进行了研究，测定和比较了菌丝和胶韧革菌素的产量．初步试验结果表明，较适宜的条件是（1）培养基：葡萄糖3％、蛋白股0．2％、黄豆饼粉1％、维生素B10．001％、pH6（消前），（2）温度：27℃～28℃，（3）时间约200h（4）每分通气量：30％～50％，（5）搅拌速度：120r／min．当pH值降至4左右，还原糖约1％，氨基氮在20％或更低，约8d可终止发酵．在此条件下，培养液中胶韧革菌素产量可达2．5～3g／L．

益生菌发酵提取榆耳抗氧化肽工艺优化及其抗运动疲劳作用研究

以榆耳为原料,采用益生菌发酵提取榆耳抗氧化肽。以ABTS自由基清除率为指标,筛选益生菌并优化沉淀pH,再在单因素试验基础上,采用响应面法优化益生菌发酵提取榆耳抗氧化肽的工艺,并研究榆耳抗氧化肽对运动大鼠的抗疲劳作用。结果表明:最优发酵工艺条件为使用枯草芽孢杆菌、沉淀pH为6液料比4.0∶1(mL/g)、发酵温度34℃、榆耳用量53 g、发酵时间24 h。在此条件下,榆耳抗氧化肽对ABTS自由基的清除率为93.44%。抗氧化能力试验表明,分子质量小于3 kDa的榆耳抗氧化肽的抗氧化活性最好。运动大鼠抗疲劳试验表明,灌胃榆耳抗氧化肽可以提高大鼠的耐力和抗疲劳能力。

榆耳发酵液抑菌成分的初步研究

榆耳发酵液对多种致病菌具有抑制作用。文中以枯草杆菌和大肠杆菌为指示菌,采用杯碟法研究了温度和 pH 对发酵液抑菌活性的影响,考察了发酵液中多糖和蛋白质的抑菌活性以及抑菌成分分子量的大小,比较了不同溶剂对抑菌成分的提取效果。结果显示,发酵液抑菌成分具有良好的热稳定性并能在 pH1～9的范围内较好地保持其抑菌活性,多糖和蛋白等大分子物质不具有抑菌活性,抑菌成分分子量小于1000 u,乙酸乙酯对其提取效果最好。采用试管法、薄层层析预试法对发酵液抑菌成分进行了(有效化学成分的)初步分析,结果表明,发酵液抑菌成分的组成为挥发油倍半萜类、酚和有机酸等化合物。

采用均匀设计法优化榆耳液态发酵培养基的研究

考察了摇瓶发酵培养中碳源、氮源、无机盐等因素对榆耳发酵生物量和发酵液抑菌活性的影响,通过均匀设计实验对培养基进行了优化。结果表明,在接种量为10%(v/v)、28℃、160 r/min培养8 d的条件下,当培养基组成为蔗糖0.1%、玉米淀粉5.0%、麸皮2.3%、脱脂蛋白粉3.4%、KH_2PO_4 0.35%、MgSO_4 0.23%、V_(B1)微量时,摇瓶发酵生物量可达16.1 g/L;当培养基组成为蔗糖4.5%、玉米淀粉5.0%、麸皮0.1%、脱脂蛋白粉0.1%、KH_2PO_4 0.35%、MgSO_4 0.23%、V_(B1)微量时,发酵液抑菌活性最强,分别相当干490 u/mL青霉素钾、3%苯甲酸钠的抑菌效果。

吉林省担子菌补记(二)

报道了《吉林省真菌志》(第一卷 )中未记载的担子菌 6种 ,即红盖环菇Leucoagaricusrubrotinctus(Peck )Sing ,皱波褶尾菌Plicaturopsiscrispa (Fr )Reid ,仙锤Phlegenafaginea (Fr )Link ,黑耳Exidiaglandulosa (Bull )Fr ,蓝灰褐腐干酪菌Oligoporuscaesius (Schrad :Fr )Gilbn etRyv 和胶韧革菌GloeostereumincarnatumS ItoetImai。其中 ,红盖环菇。

榆耳发酵液抑菌谱及抑菌作用稳定性研究

为了探讨榆耳JX 2010菌株发酵液的抑菌谱及其抑菌活性的理化稳定性,试验采用杯碟法进行抑菌效果的研究。结果表明:该菌株发酵上清液对12株指示菌中的多数菌表现出了抑菌作用,并且对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌等革兰阳性菌的抑菌作用强于大肠杆菌、沙门杆菌和鼠伤寒沙门杆菌等革兰阴性菌,但对蜡样芽孢杆菌和酵母菌无抑菌性;以金黄色葡萄球菌为指示菌,进行抑菌活性成分的理化稳定性研究,发现榆耳发酵液具有良好的热稳定性,能在pH值为1～7的范围内较好地保持其抑菌活性,但对碱性环境较敏感。

胶韧革菌发酵产物化学成分的研究

对胶韧革菌（ＧｌｏｅｏｓｔｅｒｅｕｍｉｎｃａｒｎａｔｕｍＳ．ＩｔｏｅｔＩｍａｌ）发酵产物的化学成分进行了分析测试，结果发现：发酵产物中含有多糖、蛋白质、１８种氨基酸、维生素、无机盐及微量元素等多种成分．

榆耳多糖的分离及其性质的研究

用热水抽提,乙醇沉淀的方法,从榆耳子实体获得了灰白色的多糖。该多糖经SephadexG—200凝胶层析柱和高压电泳分析证明是单一成份。红外光谱分析表明榆耳多糖呈β—糖苷键连接,该多糖的组成分为D—葡萄糖,D—半乳糖,D—甘露糖和D—木糖,其克分子比为1.0:0.5:0.6:0.7。此外还含少量的糖醛酸。蛋白质和氨基酸分析证明,榆耳多糖是一种与蛋白质相结合的物质。生物学研究表明,榆耳多糖具有促进机体免疫功能,能增加胸、脾脏器官的重量,对小鼠肉瘤有抑制作用,抑制率为23％,对小白鼠腹腔注射,半数致死量为LD50>250mg/kg。

榆耳液态发酵培养的优化及多糖的抑菌活性

对榆耳进行液态发酵培养条件的优化,并考察榆耳多糖的抑菌活性。采用响应面中心复合设计方案,确定了麦芽糖(X1)、豆粕(X2)及维生素B(6X3)的加入量,运用二阶多项式回归模型进行响应值预测,并进行试验验证。结果表明,榆耳液态培养最优条件为麦芽糖12.96g/L,豆粕11.68g/L,维生素B6159mg/L,配合无机盐的条件下榆耳菌丝体湿重为11.27g/100mL。多元二次回归模型为:Y=10.50+0.75X1+0.63X2+0.20X3+0.044X1X2-0.075X1X3+0.088X2X3-0.51X12-0.79X22-0.55X32,因变量的总变化中有92.57%可以由回归曲线解释。利用杯碟法考察榆耳多糖的抑菌活性,结果显示,榆耳胞内和胞外多糖对福氏志贺氏菌、枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌及产气杆菌有较强的抑制效果。以上结果说明,利用麦芽糖、豆粕、维生素B6配合无机盐可获得较高产量的榆耳菌丝体,其胞内多糖和胞外多糖均有一定的抑菌作用。

榆耳发酵液抑菌作用的探讨

采用杯碟法和纸层析的方法,测定了榆耳发酵液对九种细菌的抑制作用。结果表明:榆耳发酵液对供试细菌均有不同程度的抑菌作用,尤其是对肠炎杆菌的抑制作用较为突出。用乙醇沉淀法除去多糖的榆耳发酵液,对肠炎杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌,金黄色葡萄球菌、炭疽杆菌仍表现出不同程度的抑制作用。用去多糖浓缩五倍的榆耳发酵液通过抗菌素常规的八个溶媒系纸层析显影试验,以肠炎杆菌为敏感菌展层,均未有明显显迹。

榆耳的抗炎性研究

本文报道了榆耳的抑菌作用,试验结果表明榆耳子实体浸提液能抑制痢疾杆菌,绿脓杆菌,金黄色葡萄球菌,大肠杆菌和枯草杆菌等病原菌的生长。

食用菌天然复合防腐剂的研制

以S.aureus和E.coli为指示菌,采用杯碟法考察榆耳水提液和黑木耳多糖、Nisin、壳聚糖4种天然防腐剂的抑菌能力,单因素研究结果表明,榆耳水提液、黑木耳多糖、壳聚糖对E.coli的抑菌效果强于S.aureus,而Nisin对S.aureus的抑制效果更好。正交试验结果表明,天然复合防腐剂具有更强的抑菌效果,其最优配比为:榆耳干物质含量为2%,黑木耳多糖干物质含量为1.6%,Nisin为1%,壳聚糖为0。

榆耳天然复合防腐剂理化稳定性研究

[目的]为了明确榆耳天然复合防腐剂抑菌效果的理化稳定性。[方法]采用热稳定性试验、pH稳定性试验、金属离子的影响试验对榆耳天然复合防腐剂进行理化稳定性评测。[结果]榆耳天然复合防腐剂中的抑菌活性成分都具有极好的耐热性，121℃处理20min后仍有良好的押菌活性，相对抑菌率高达75％以上；25～100℃抑菌活性基本不变，在pH为1～7时复配液有较好的抑菌活性，说明该复配液有良好的pH耐受能力，当pH大于8时抑菌活性完全丧失，不能耐受强碱的环境。金属离子中Mg离子略微对复配液抑菌活性有加强作用，zn、Fe、cu离子抑制复配液的抑菌活性。

榆耳天然复合防腐剂应用于龙牙楤木嫩芽保鲜的研究

采用榆耳天然复合防腐剂对龙牙楤木嫩芽进行保鲜,评价保鲜效果。结果表明,对龙牙楤木嫩芽在储藏过程中各指标变化过程进行测定,榆耳复合防腐剂处理的龙牙楤木嫩芽在15天时失去商品价值,化学防腐剂处理的龙牙楤木嫩芽在12天时失去商品价值,而未处理的龙牙楤木嫩芽在9天时就已经失去商品价值。榆耳复合防腐剂对龙牙楤木嫩芽有延长其货架期的作用,并且比化学防腐剂效果更好。

响应面法优化榆耳多糖提取工艺的研究

应用水提法对榆耳子实体中的多糖进行提取条件优化,以提高多糖提取率。依据单因素和Box-Behnken的试验设计,用响应面分析方法对水提法提取榆耳多糖的工艺进行优化研究。研究以榆耳多糖提取率为响应值,提取温度、提取时间、料液比和提取次数为试验因素。结果表明:水提法的最优提取工艺参数为提取温度84.925℃、提取时间3.477 h、料液比1∶50(g/m L)、提取次数为4次。在最优提取工艺参数下多糖的实际提取率为9.596%。其中影响榆耳多糖提取率的主次因素为:提取时间(B)>提取温度(A)>料液比(C)>提取次数(D)。

榆耳发酵液中新倍半萜——榆耳三醇的结构

从榆耳(Gloeostereum incarnatum S.Ito et Imai)的液体发酵物中经层析分离得一新倍半萜榆耳三醇(gloeosteretriol),根据红外光谱、核磁共振谱和质谱数据推定其结构为Ⅰ,并用X-射线晶体衍射进一步确证其结构和立体构型。

响应面法优化榆耳多糖脱蛋白工艺

采用水提醇沉法提取榆耳菌丝体中的粗多糖,选取木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶去除多糖中蛋白质,木瓜蛋白酶除蛋白效果较好。通过单因素及响应面分析法确定最优工艺参数为:酶液与糖液的体积比0.21∶1,酶解温度58℃,pH 6.13,酶解时间3h。此条件下所得蛋白去除率与多糖损失率的比值理论值为4.499,实测值为4.337,偏差较小。

榆耳子实体中小极性化合物分离鉴定

通过色谱柱层析法,对榆耳(Gloeostereum incamatum)子实体中的化学成分进行分离纯化,依据化合物的理化性质及NMR和MS等鉴定化合物结构。从榆耳不同极性提取物中共分离得到7个化合物,分别被鉴定为β-谷甾醇、麦角甾醇、甘露醇、麦角甾醇过氧化物、反丁烯二酸、1-8二羟基蒽醌和1-油酰基-2-亚油酸-3-棕榈酸甘油。