单耳堵塞对沙土鼠中脑下丘神经元Glu受体密度的影响

采用体外受体标记放射自显影方法 ,分别考察了出生后 3周龄 (2 1dpn)、6周龄 (42dpn)和成年 (70dpn)实施单耳堵塞的沙土鼠中脑下丘背侧核 (ICd)、外侧核 (ICx)和中央核 (ICc)部位Glu受体密度的分布。结果表明 ,成年堵耳组动物堵耳对侧和同侧下丘神经元Glu受体密度分布没有显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;3周龄和 6周龄堵耳组动物之间具有相似的规律 ,呈现堵耳对侧下丘神经元Glu受体密度明显少于堵耳同侧 (P <0 .0 5 )的不均衡分布 ,且这种不平衡性分布在 3周龄堵耳组动物上表现得更为明显。本实验结果提示 ,生后 6周前实施单耳堵塞对沙土鼠中脑下丘神经元Glu受体发育具有明显影响。

骨碎补总黄酮对去卵巢骨质疏松大鼠骨内谷氨酸信号Glu、mGluR5以及EAAT_1的影响

目的探讨骨碎补总黄酮(Total Flavonoids of Rhizoma Drynariae,TFRD)对去卵巢骨质疏松(osteoporosis,OP)大鼠骨内谷氨酸信号的影响,以明确其通过参与大鼠骨内谷氨酸信号通路介导骨重建的可能机制。方法 45只3月龄SPF级雌性SD大鼠随机分为假手术组(Sham,n=15)和去卵巢组(OVX,n=30)。采取双侧卵巢切除术复制OP大鼠模型,14周后行双能X线测定骨密度,模型复制成功,将OVX组随机分为模白组(OVX,n=15)和给药组(OVX+TFRD,n=15)。药物干预12周后处死动物,免疫组化法观察左股骨骨骺端谷氨酸(Glutamate,Glu)、代谢型Glu受体-5(metabotropic glutamate receptor5,mGluR5)及L-谷氨酸/L-门冬氨酸转运体(Glutamate/Aspartate transporter,EAAT1)表达。结果 Glu和mGluR5主要分布于骨髓区细胞和紧贴骨髓腔壁的成骨细胞(osteoblasts,OB);Glu的阳性标记在Sham、OVX和OVX+TFRD组的表达差异均无统计学意义;OVX+TFRD组代谢型受体mGluR5的阳性表达显著高于Sham组(P=0.009),而Sham组与OVX组之间的差异无统计学意义;转运子EAAT1除了大量分布于骨髓区细胞以外,还有少量表达于骨陷窝中的骨细胞,其阳性表达在Sham、OVX和OVX+TFRD组的差异均无统计学意义。结论在骨内Glu信号通路中,TFRD可显著提高代谢型受体mGluR5的表达,但尚不能认为其对Glu和转运子EAAT1有影响。

β-淀粉样蛋白31-35及25-35片段对海马CA1细胞兴奋性和抑制性受体通道电流的影响

在Alzheimer病(AD)出现神经变性前的早期记忆功能障碍中,可溶性β-淀粉样蛋白(Aβ)发挥了重要作用.Aβ及其活性片段对海马长时程增强(LTP)的压抑效应与其对学习记忆认知行为的伤害作用具有密切联系,但其机制仍不清楚.鉴于突触后兴奋性和抑制性受体/通道在突触传递、包括LTP的诱导中起着关键性调制作用,利用全细胞膜片钳技术观察了β-淀粉样蛋白31-35片段(Aβ31-35)和25-35片段(Aβ25-35)对急性分离的海马CA1区锥体细胞谷氨酸(Glu)受体、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体和γ-氨基丁酸(GABA)受体通道电流的影响.结果显示:急性给予Aβ25-35或Aβ31-35可对Glu受体电流和GABA受体电流产生相反的调制作用.Aβ25-35预处理剂量依赖性地减小了Glu和NMDA引起的全细胞内向电流,相反,GABA受体电流被明显增强;小片段的Aβ31-35也选择性抑制了Glu和NMDA受体电流,增强了GABA受体电流;然而,给予Aβ31-35的反序列Aβ35-31预处理后,Glu,NMDA和GABA引起的受体电流均未出现明显改变.这些结果表明,Aβ25-35和Aβ31-35片段急性处理可导致海马锥体细胞NMDA受体和GABAA受体分别受到抑制和易化影响,这可能有助于解释AD早期可溶性Aβ对海马LTP及认知行为造成的伤害作用.同时,Aβ25-35和Aβ31-35片段具有的类似效应提示,31-35序列很可能是Aβ发挥神经毒性作用的活性中心.

GABA受体对谷氨酸受体的调控机制研究

目的研究γ-氨基丁酸(GABA)受体对离子型谷氨酸受体的调控机制。方法采用细胞膜片钳电生理技术,以GABA、谷氨酸(Glu)刺激记录GABA受体及Glu受体离子通道介导的全细胞电流(IGABA,IGlu),观察GABA对谷氨酸受体离子通道活性的调控;并以荷包牡丹碱(Bic)抑制IGABA、以SO24-或葡萄糖酸根(gluconate-)代替Cl-,研究其抑制作用的分子机制。结果相同浓度GABA与Glu共给药诱导IGABA+Glu较单独给药诱导电流IGABA与IGlu之和小,该差异随浓度升高而降低;不同浓度GABA对Glu30μmol/L诱导电流IGlu抑制作用随GABA浓度升高而增强,该抑制作用可以被Bic、SO24-与gluconate-消除。结论 GABAA受体能抑制谷氨酸受体介导的全细胞电流,该作用具有浓度依赖性,其抑制机制可能与Cl-的通透性有关。