Glu-B1位点亚基色谱鉴定及7^(OE)对面团强度的影响

准确鉴定高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)及探讨其对面团特性的影响是小麦品质研究的重要内容。用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和反相高效液相色谱(RP-HPLC)对62份品种(系)的HMW-GS组成进行鉴定。结果表明,结合SDS-PAGE和RP-HPLC两种方法可以对Glu-B1位点,尤其是Glu-B1(7+8)进行有效鉴定。选用13份姊妹系为材料,使用RP-HPLC和凝胶色谱(SE-HPLC)方法,研究了Glu-B1al(7OE+8*)以及贮藏蛋白组分含量对面团强度的影响。结果表明,Glu-B1al(7OE+8*)可显著提高HWM-GS总量和面团强度,7OE可作为优质亚基用于强筋小麦育种。相关性分析表明,谷蛋白总量、HWM-GS、LMW-GS以及x-HMW含量与最大抗阻力呈1%显著正相关,相关系数分别为0.76、0.76、0.77和0.72。SDS-不溶性谷蛋白大聚体(UPP)占谷蛋白聚合体总量的百分比与揉面仪峰值时间、粉质仪形成时间和稳定时间以及最大抗阻呈1%或0.1%显著正相关,相关系数分别为0.77、0.90、0.89和0.87。醇溶蛋白与谷蛋白含量的比值与揉面仪峰值时间呈1%显著负相关,相关系数为-0.69;与粉质仪稳定时间和最大抗阻呈5%显著负相关,相关系数分别为-0.58和-0.64。HPLC可有效分离和量化HWM-GS,并作为小麦品质育种有效的辅助手段。

用Glu-B3、Gli-B1和SEC-1b复合引物PCR检测普通小麦1BL/1RS易位系

利用低分子量 (LMW )麦谷蛋白Glu B3的STS PCR标记、醇溶蛋白Gli B1的SSR标记和黑麦碱SEC 1b的STS PCR标记的复合PCR ,对 10个普通小麦品种、中优 950 7/CA963 2的 91个DH系和 2 8个F2 个体植株 ,进行了1BL/1RS易位系的检测。结果表明 ,中优 950 7/CA963 2的 3 9个DH系和CA963 2、晋麦 45、兰考 2 4、烟农 18、京冬 8等5个品种缺失 2个小麦贮藏蛋白位点的PCR产物 ,而拥有黑麦碱的PCR产物。利用PAGE和ELISA方法 ,对上述品种 (系 )进行了黑麦碱 (secalin)蛋白的检测 ,发现这些品种 (系 )均包含secalin ,与分子标记的检测结果吻合 ,是 1BL/1RS易位系。对 2 8个F2 单株的检测表明 ,该复合标记可以检测出早代

Molecular Characterization of Two Silenced y-type Genes for Glu-B1 in Triticum aestivum ssp.yunnanese and ssp.tibetanum

The high molecular weight glutenin subunits （HMW-GSs） are a major class of common wheat storage proteins. The breadmaking quality of common wheat flour is influenced by the composition of HMW-GSs. In the present study, two unexpressed 1 By genes from Triticum aesitvum L.ssp.yunnanese AS332 and T. aesitvum ssp.tibetanurn AS908 were respectively cloned and characterized. The results indicated that both of the silenced 1By genes in AS332 and AS908 were 1Byg. In contrast to previously reported mechanisms for silenced genes lAx and lay, which was due to the insertion of transposon elements or the presence of premature stop codon via base substitution of C→T transition in trinucleotides CAA or CAG, the silence of 1By9 genes was caused by premature stop codons via the deletion of base A in trinucleotide CA.A, which lead to frameshift mutation and indirectly produced several premature stop codons （TAG） downstream of the coding sequence.

野生二粒小麦高分子量谷蛋白亚基的多态性分析

采用十二烷基磺酸钠 -聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS- PAGE)方法 ,对 172份来自以色列的野生二粒小麦的高分子量谷蛋白亚基 (HWM- GS)组成进行了鉴定和分析。结果发现 ,这 172份野生二粒小麦 1B染色体上的HMW- GS有 19种变异类型 ,比普通小麦 1B染色体上 HMW- GS的变异类型丰富得多 ,其中有 8种 (6 * +8* ,6 +8* ,2 2 ,6 * +8,7* +9,7* +9* ,7* +8* ,7* +8)为普通小麦中不常见类型 ,各个亚基的分布频率不同 ,17+18亚基分布频率最高 (2 9.6 5 % ) ,并且存在 3种普通小麦中不存在的特殊亚基 (图 1中加 ?的类型 ) ;1A染色体上的 HMW- GS有4种变异类型 ,其中一个亚基 (自定义为 1* )以前未见报道。发现野生二粒小麦 HMW- GS组成中 Glu- B1位点的 17+18亚基和 Glu- A1位点的 1亚基出现频率比普通小麦中出现的频率高。这些试验数据可为野生二粒小麦上特异HMW- GS的进一步研究与利用提供理论依据。

新疆冬小麦地方品种高分子量麦谷蛋白亚基的地理分布及其新发现亚基的特性(英文)

【目的和方法】为了揭示新疆小麦地方品种高分子量谷蛋白亚基（HMW—GS）的遗传多样性，对新疆北部地区（北疆）、东部地区（东疆）和南部地区（南疆）小麦地方品种HMW—GS的分布进行了研究。【结果】研究表明：新疆小麦地方品种HMW—GS等位变异的分布与其地理来源具有密切关系，除Glu-B1位点外，G2u—A1和Glu—D1位点等位变异在北部地区、东部地区和南部地区的分布频率存在显著差异。在Glu—A1位点，Glu—A1c编码的Null亚基出现的频率最高，其次是Glu—A1b编码的2^＊亚基；但在北部地区，几乎所有品种都含有Glu—A1c编码的Null亚基，仅有1个品种含有Glu—A1b编码的2^＊亚基。在Glu-81位点，新疆大多数小麦地方品种含有Glu—B1b编码的7＋8亚基。在Glu—D1位点，新发现的等位基因Glu—D16p（t）编码的2．6亚基在东疆和南疆出现的频率较高，但在北疆出现的频率最低，分别为91％（东疆），61％（南疆），19％（北疆）；等位基因Glu—D1bp（t）在南疆冬小麦地方品种中普遍存在。然而，北疆是以等位基因Glu—D1a编码的2＋12亚基为主，其频率为83％。关于Glu—D1bp（t）的起源，推测可能是在南疆地区自然突变产生，然而由于南疆和东疆荒漠化造成的地理阻碍使其向北疆传播的概率较低，同时抑制了该基因向东亚地区的迁移。【结论】基于DNA序列的氨基酸序列比对，发现Glu—D1bp（t）编码的2．6亚基与Glu—D1al编码的2．2^＊亚基非常相似。

圆锥小麦高分子量谷蛋白亚基组成分析

为了寻找新的基因资源,为小麦品质改良提供基础材料,应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)方法,对中国西部和北部地区123份圆锥小麦材料高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)的组成进行了分析,共检测到15种HMW-GS组合类型.14个等位变异中有5种类型即Glu-A1-Ⅰ、Glu-B1-Ⅰ、Glu-B1-Ⅱ、Glu-B1-Ⅲ、Glu-B1-Ⅳ在普通小麦中不常见.类似于17+18亚基组合的Glu-B1-Ⅲ分布频率高达到63.40%,亚基2*出现的频率远远高于普通小麦,另外发现一份含有编码与小麦抗病性关系密切的21亚基的材料可应用于小麦抗病育种中.分析结果表明,圆锥小麦的HMW-GS具有丰富的多态性和亚基组合类型,优质亚基分布频率高,是小麦育种的宝贵基因资源.

晚播对小麦籽粒谷蛋白及GMP积累动态的影响

选用高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)在Glu-B1位点等位变异的4个近等基因系材料,研究了在正常播期和晚播条件下小麦籽粒谷蛋白和谷蛋白大聚体(GMP)的积累动态及面团稳定时间。结果表明:在遗传背景相同的条件下,各材料籽粒谷蛋白在正常播期和晚播中积累动态均是从低到高,花后30～35d为快速积累期,含优质高分子量谷蛋白亚基材料在此时期积累较快。GMP在花后12d左右已大量积累,随着灌浆进程的推进快速下降,灌浆中期降到最低点,不同亚基材料降到最低点的早晚不同,亚基17+18出现最低点早,上升时的积累量较其他亚基大;在正常播期中上升直到成熟,在晚播中灌浆后期又有下降的趋势。晚播对Glu-B1位点等位变异的4个材料谷蛋白及GMP含量和面团稳定时间都有较大的影响,但影响的程度不同,17+18最大,7+9次之,7+8最小。推测不同亚基材料谷蛋白及GMP积累动态的差异是导致其品质形成及稳定性的关键。