禽腺病毒血清4型感染的LMH细胞mRNA表达谱分析

禽腺病毒血清4型(FAdV-4)引起的禽肝炎-心包积液综合征已严重危害我国养禽业的发展,迫切需要深入了解FAdV-4的致病机制并制定有效的防控方案。论文旨在利用高通量测序技术分析禽腺病毒血清4型感染鸡肝癌(Leghorn male hepatocellular,LMH)细胞后差异表达的mRNA,以探究mRNA在FAdV-4感染过程中的作用及其调控机制。结果显示,与对照组相比,FAdV-4感染48 h共筛选到2604个上调的差异表达基因,2883个下调的差异表达基因。其中,GNB3、NECTIN4、SFRP4、FABP2、PLPP3、GALR1L和MBL 2等基因之前并没有被报道过与FAdV-4感染相关。通过GO和KEGG分析得知,差异表达基因主要富集在从细胞表面位点和信号受体结合至细胞周期调节、MAPK信号通路、细胞黏附分子作用等;其中,显著下调的差异基因还富集到多种代谢途径中,提示病毒感染会影响宿主细胞的代谢水平。本研究为深入解析FAdV-4感染宿主细胞的致病机制提供了相关的理论基础及科学依据。

EGFR、PRDX4、GLUT-1在口腔鳞癌组织中的表达水平及其临床意义

目的研究表皮生长因子受体(EGFR)、过氧化物还原蛋白4(PRDX4)、葡萄糖转运蛋白-1(GLUT-1)在口腔鳞癌(OSCC)组织中的表达水平及其临床意义。方法选取口腔鳞癌患者74例,比较其癌组织和癌旁正常组织EGFR、PRDX4、GLUT-1 mRNA和蛋白表达情况,分析三者表达水平的相关性,以及其与OSCC病理特征、患者生存时间的关系。结果OSCC癌组织中EGFR、PRDX4、GLUT-1 mRNA水平及蛋白阳性表达率高于癌旁正常组织(P<0.05)。OSCC患者组织EGFR、PRDX4、GLUT-1表达水平互相呈正相关(P<0.001)。低分化程度、有淋巴结转移、Ⅲ期~Ⅳ期患者EGFR、PRDX4和GLUT-1阳性表达率较高(P<0.05)。EGFR、PRDX4、GLUT-1阳性表达者总生存率低于阴性表达者(P<0.05)。结论OSCC癌组织EGFR、PRDX4、GLUT-1表达水平明显升高,且与临床病理参数及生存时间紧密相关,可能参与OSCC的发生发展。

外周血TLR4 mRNA及IL-22、NLR联合检测对脓毒症患者预后的评估价值

目的分析外周血Toll样受体4(TLR4)mRNA及白细胞介素-22(IL-22)、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)联合检测对脓毒症患者预后的评估价值。方法选取2020年1月至2023年1月于海南医学院第一附属医院接受治疗的108例脓毒症患者作为研究对象,依据患者入院治疗日起1月内预后情况分为预后良好组(71例)与预后不良组(37例)。收集入组时两组患者的基本资料,性别、年龄、体质量指数(BMI)、入院时感染情况、糖尿病史、高血压史、心血管疾病史、使用血制品、机械通气、是否多器官衰竭等及实验室指标TLR4 mRNA、IL-22、NLR。单因素及多因素Logistic回归分析影响脓毒症预后不良的危险因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析TLR4 mRNA、IL-22、NLR单项及联合检测对脓毒症患者预后的评估效能。结果预后良好组与预后不良组年龄、有无高血压史、心血管疾病史、机械通气、多器官衰竭比较差异具有统计学意义(χ^(2)=4.427、5.698、4.618、6.948、7.300,P<0.05),预后不良组TLR4mRNA、IL-22、NLR水平均高于预后良好组,差异有统计学意义(t=7.649、4.205、8.243,P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,有机械通气、多器官衰竭、TLR4 mRNA、IL-22、NLR水平升高为脓毒症患者预后不良独立危险因素(P<0.05);ROC结果显示,TLR4 mRNA、IL-22、NLR单项及联合检测预测毒症患者预后不良曲线下面积(AUC)分别为0.846、0.747、0.669、0.914联合检测优于单一检测(P<0.05)。结论TLR4 mRNA、IL-22、NLR脓毒症患者预后有关,且均对患者预后情况具有良好的预测效能。

复方灵芝降糖胶囊对2型糖尿病大鼠骨骼肌GluT-4及脂肪组织胰岛素受体mRNA基因表达的影响

目的:观察复方灵芝降糖胶囊对2型糖尿病大鼠骨骼肌GluT-4及脂肪组织胰岛素受体mRNA基因表达的影响。方法:给予实验动物STZ,破坏一部分胰岛β细胞功能,同时饲以高脂肪饲料造成外周组织对胰岛素不敏感,两者结合诱导出接近人类2型糖尿病的动物模型,并给予不同剂量治疗4周。处死后分别测定骨骼肌、脂肪组织胰岛素受体mRNA基因表达。结果:复方灵芝降糖胶囊对骨骼肌GluT-4及脂肪组织胰岛素受体mRNA基因的表达均有提升。结论:复方灵芝降糖胶囊治疗2型糖尿病可能与其提高骨骼肌GluT-4及脂肪组织胰岛素受体mRNA基因表达从而改善胰岛素的信号传导有关。

固本消渴汤对2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT-4和ABCA1mRNA表达的影响

目的:观察固本消渴汤对2型糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)及脂肪组织三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组和造模组。造模组成功后再分为模型对照组、阳性药对照组和中药治疗组,分别给予生理盐水和固本消渴汤药液灌胃。定期定时监测空腹血糖、OGTT、FBG、FINS。第12周末,取后肢骨骼肌,检测GLUT-4和ABCA1的基因与蛋白的表达。结果:固本消渴汤组能降低BG、TC、TG的水平,增强糖耐量能力,明显增加糖尿病大鼠骨骼肌GLUT-4和ABCA1基因与蛋白的表达。结论:固本消渴汤能调节糖尿病大鼠糖脂代谢,增加糖尿病大鼠骨骼肌组织GLUT-4和ABCA1的表达。

真核翻译起始因子4G1与恶性肿瘤的研究进展

真核翻译起始因子4G1(eIF4G1)是一种大型支架蛋白,在真核生物mRNA翻译起始过程中,可作为蛋白质的对接位点,介导帽依赖性与非帽依赖性翻译启动。eIF4G1是翻译调控中的重要靶标,被认为参与多种肿瘤细胞的生长、迁移、增殖、侵袭和凋亡。近年来,随着对eIF4G1研究的深入,临床对其作用和功能也有了更深的理解,本文总结相关文献,对eIF4G1的功能、研究现状及与肿瘤的关系做一简要综述。

LOXL4在乳腺癌中的表达水平及临床意义

目的探讨赖氨酰氧化酶-4(LOXL4)在乳腺癌患者组织中表达水平及与临床特征之间的关系。方法采用实时荧光定量PCR法检测乳腺癌细胞株及我院收治的30例乳腺癌患者组织样本中LOXL4 mRNA表达水平;采用免疫组化法检测乳腺癌组织LOXL4蛋白表达水平,并对结果进行统计分析。结果MCF-7、SKBR-3、MDA-MB-231、MDA-MB-468四株乳腺癌细胞中LOXL4 mRNA表达量较对照组细胞株MCF10A升高,差异有统计学意义(P<0.05)。30例乳腺癌患者组织样本LOXL4 mRNA表达的阳性率高于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05);LOXL4 mRNA在Ⅲ~Ⅳ期患者中表达量较Ⅰ~Ⅱ期升高,差异有统计学意义(P<0.05);转移组LOXL4基因表达水平较未转移组升高,差异有统计学意义(P<0.05);SP结果表明,乳腺癌患者LOXL4表达阳性率为90.0%(27/30),其中弱阳性和强阳性占总病例数的比例分别为30%(9/30)和60%(18/30);对照组乳腺组织中LOXL4表达阳性率为26.7%(8/30),阳性染色强度均较乳腺癌组弱,乳腺癌患者乳腺组织LOXL4蛋白表达阳性率较对照组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论LOXL4无论在基因水平还是蛋白水平,在乳腺癌患者中高表达,可能参与疾病进展,可作为一种潜在的肿瘤生物标志物。

人肝癌及癌旁组织中Smad4、Smad7mRNA和蛋白表达研究

目的 :分析Smad 4、Smad 7mRNA和蛋白在人肝癌组织中的表达并与癌旁组织比较 ,了解Smad 4mRNA和蛋白与肝癌临床病理特征之间的关系。方法 :用原位杂交和免疫组化方法检测 36例肝癌存档病理标本和其中的 2 8例癌旁组织病理标本Smad 4、Smad 7mRNA和相应的蛋白。结果 :Smad 4mRNA和其蛋白在肝癌组织中的表达低于肝癌癌旁组织 ,癌组织表达率分别为 2 8%和 19% ,癌旁组织表达率分别为 86 %和 75 % ,两者之间差别有统计学意义(P <0 .0 1)。Smad 7mRNA和其蛋白表达则相反 ,癌组织表达强 ,表达率分别为 6 6 %和 6 4 % ,癌旁组织表达率分别为14 %和 36 % ,两者之间差别有统计学意义 (P <0 .0 1和P <0 .0 5 )。Smad 4mRNA和蛋白与肝癌患者年龄、性别和肿瘤大小无关 ,但与肿瘤细胞类型、是否转移存在相关性。结论 :Smad 4和Smad 7蛋白作为转化生长因子 - β(TGF β)信号转导途径的下游分子 ,在肝癌组织中表达发生了改变 ,参与肝癌的发生、发展。

补肾强督方对强直性脊柱炎患者外周血IL-18、IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平的影响

目的探讨补肾强督方治疗强直性脊柱炎(AS)的可能作用机制。方法30例AS患者予补肾强督方进行治疗,疗程为6个月。研究AS患者及健康志愿者外周血中白细胞介素18(IL-18)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4 mRNA(IL-4 mRNA)表达水平及经补肾强督方治疗前后AS患者外周血中IL-18、IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平的变化。结果AS患者外周血单个核细胞IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA表达水平及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA较正常对照组显著增高(P<0.001)。经用补肾强督方治疗后,IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA表达水平及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA明显下降(P<0.001)。AS患者红细胞沉降率水平与IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA表达水平呈极显著相关(P<0.001);C反应蛋白水平与IL-18 mRNA表达水平呈显著相关(P<0.05),与IFN-γ mRNA表达水平呈非常显著相关(P<0.01)。结论AS患者外周血中IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA水平比正常组明显升高;用补肾强督方治疗后,患者IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA水平均有明显下降。

补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血患者骨髓VLA-4和VLA-5 mRNA表达的影响

【目的】观察补髓生血颗粒对慢性再生障碍性贫血(CAA)患者的骨髓极迟活化抗原4(VLA-4)和极迟活化抗原5(VLA-5)mRNA表达的影响及其可能的作用机制。【方法】选取30例CAA肾阴阳两虚型患者为试验组,另招募10例无血液疾病及免疫系统疾病的健康志愿者为正常对照组。试验组患者给予补髓生血颗粒治疗,疗程6个月。采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(PT-PCR)法检测CAA患者治疗前后骨髓VLA-4和VLA-5 mRNA表达水平,并与正常对照组作比较。【结果】治疗前,CAA患者骨髓VLA-4 mRNA呈低表达状态,VLA-5 mRNA呈高表达状态,与正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);应用补髓生血颗粒治疗后,试验组患者VLA-4 mRNA表达水平较治疗前升高,VLA-5 mRNA表达水平较治疗前降低,差异均有统计学意义(P<0.05),但均未恢复到正常对照组水平,差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】CAA患者VLA-4和VLA-5 mRNA的异常表达可能参与CAA的发病过程;补髓生血颗粒可能通过调节VLA-4和VLA-5 mRNA的表达来改善CAA患者骨髓造血功能和恢复造血微环境的状态。

过敏性紫癜患者外周血单个核细胞中Tim-1,Tim-3mRNA表达和血清中IL-2和IL-4含量测定

目的研究Tim-l,Tim-3及IL-2,IL-4在过敏性紫癜(Henoch-Schonlein purpura,HSP)发病中的作用。方法将28例HSP患者分为单纯组和混合组,采用RT-PCR技术检测两组患者外周血单个核细胞中Tim-1 mRNA和Tim-3 mRNA的表达情况,ELISA法检测血清中IL-2和IL-4的含量,选取健康人20例作为对照组。结果 HSP患者Tim-1 mRNA相对表达量高于正常对照组[RQ值分别为0.974(1.108)和0.760(0.514),P<0.05],而Tim-3 mRNA相对表达量差异无统计学意义[RQ值分别为1.359(1.183)和1.604(1.177),P>0.05];Tim-1 mRNA,Tim-3 mRNA的表达在HSP单纯组和混合组之间差异均无统计学意义(P均>0.05)。HSP患者血清IL-2含量(188.517±12.867)较正常对照组(202.759±20.903)降低,IL-4含量(73.046±8.750)高于正常对照组(62.301±11.232),且HSP患者混合组IL-2含量低于单纯组,IL-4含量高于单纯组,以上差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论Tim蛋白可能参与HSP发病,但与疾病严重程度无关;IL-2和IL-4水平可能与疾病严重程度密切相关。

西洋参治疗胰岛素抵抗大鼠活性部位对骨骼肌转运蛋白-4mRNA表达的影响

目的:探讨西洋参治疗胰岛素抵抗大鼠活性部位对骨骼肌转运蛋白-4mRNA(GLUT-4 mRNA)表达的影响。方法:本实验将西洋参的根部用95%EtOH回流得提取物。再将此提取物进行AB-8型大孔树脂柱色谱,按不同浓度洗脱,得到西洋参95%醇提组、西洋参60%醇提组、西洋参30%醇提组和水提组四个部分。通过早期药效学试验证明,西洋参60%醇提组和西洋参30%醇提组为有效部位。之后再以SD大鼠喂以高热饮食加链脲佐菌素(STZ)建立胰岛素抵抗大鼠模型,随机分为模型组、罗格列酮组、西洋参60%醇提组、西洋参30%醇提组。给药4周后,以RT-PCR法检测胰岛素抵抗大鼠骨骼肌GLUT-4 mRNA的表达。结果:与模型组比较,各给药组大鼠骨骼肌中GLUT-4 mRNA的表达相对增强,其中西洋参60%醇提组、30%醇提组与模型组比较有极显著性差异(P<0.01),罗格列酮组与模型组比较差异显著(P<0.05)。结论:西洋参可能通过使胰岛素抵抗大鼠骨骼肌GLUT-4 mRNA的表达增强,从而发挥快速转运葡萄糖的作用而对胰岛素受体InsR后抵抗有改善作用。

五苓散对腹泻模型大鼠结肠AQP4及AQP4mRNA表达的影响

目的:观察五苓散对腹泻模型大鼠结肠AQP4及AQP4mRNA表达的作用,揭示五苓散止泻作用的机理。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、腹泻模型组、氢氯噻嗪组、口服盐液组、五苓散低、中、高剂量组7组,观察大鼠腹泻状态并测体重等。分别于第4天上午、第7天上午取大鼠结肠,免疫组化法检测AQP4蛋白的表达,原位杂交方法检测AQP4 mRNA的表达。结果:腹泻模型组、口服盐液组、五苓散低剂量组结肠AQP4及AQP4mRNA表达明显下调,氢氯噻嗪组、五苓散中剂量组AQP4及AQP4mRNA表达下调但明显高于模型组,五苓散高剂量组结肠AQP4及AQP4mRNA表达下调不明显。结论:AQP4及AQP4mRNA表达下调是番泻叶致大鼠腹泻的机制之一,上调腹泻模型大鼠结肠AQP4及AQP4mRNA表达是五苓散的止泻机理之一,但与剂量相关,5.4g/kg灌胃效果较好。

小青龙汤及其加味方对变应性鼻炎大鼠IL-4和IL-4mRNA表达的影响

目的:观察小青龙汤及其加味方对变应性鼻炎(AR)大鼠血浆IL4含量和脾细胞IL4mRNA表达水平的影响。方法:采用卵蛋白全身致敏与局部攻击方法制作AR大鼠模型,观察小青龙汤加味治疗后血浆IL4含量和脾细胞IL4mRNA的表达。结果:模型组血浆IL4含量和脾细胞IL4mRNA的表达明显升高,小青龙汤加味治疗组血浆IL4含量和脾细胞IL4mRNA的表达明显降低,小青龙汤加味治疗组优于小青龙汤治疗组。结论:小青龙汤加味治疗AR的作用途径之一可能是通过降低IL4mRNA的表达水平,间接降低IL4含量,从而减轻鼻粘膜变应性炎症。

实验性胰腺炎小鼠小肠隐凹素-4mRNA表达变化的研究

目的 检测实验性胰腺炎时小鼠小肠隐凹素 - 4 m RNA表达的变化 ,从分子水平上探讨胰腺炎时肠粘膜屏障受损的机制。方法 36只 ICR小鼠随机分成 6组 ,每组 6只。实验组 (A～ E组 )腹腔注射雨蛙素 ,5 0μg/(kg· h) ,共 7次 ,于首次注射后第 9、18、2 4、4 8和 72 h处死 ;对照组 (F组 )注射相应体积的生理盐水 ,于第 18h处死。取血送淀粉酶检查 ,胰腺送病理检查。用 U VI软件分析 PCR产物凝胶图像以检测各组隐凹素 - 4 m RNA的表达变化。结果 大剂量雨蛙素腹腔注射导致了 ICR小鼠急性坏死性胰腺炎 ,胰腺病理损害以首次注射后第 18h最明显。第 9h隐凹素 - 4 m RNA表达轻微下调 ,18h下调最明显 (P<0 .0 5 ) ,2 4 h后逐渐升高 ,72 h接近正常水平。结论隐凹素 - 4的获得性缺陷可能是胰腺炎时发生肠道细菌移位的重要原因之一。

湖羊BMP2、BMP4、BMP6和BMP7基因mRNA表达水平与排卵数关系的研究

【目的】研究湖羊卵巢组织BMP2、BMP4、BMP6和BMP7基因mRNA表达水平与排卵数的相关性,筛选影响湖羊多胎性状的候选基因,为揭示湖羊高繁多胎分子遗传机理提供参考。【方法】选取16只经产湖羊母羊,分为产单羔组和多羔组,发情后24～36h屠宰,取卵巢,计数排卵点,记录排卵数;应用RT-PCR技术检测BMP2、BMP4、BMP6和BMP7基因的组织表达特征,进一步利用实时荧光定量PCR技术分析各基因mRNA在单羔组和多羔组卵巢组织中的表达差异。【结果】BMP2、BMP4和BMP7基因在湖羊母羊卵巢组织内表达,而且在垂体及下丘脑、子宫、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、输卵管组织中均有表达;BMP6基因仅在湖羊母羊卵巢、肾脏、肌肉和输卵管组织中表达。在卵巢组织,多羔组排卵数极显著高于单羔组(P<0.01),且多羔组BMP4基因mRNA表达极显著高于单羔组(P<0.01),而BMP2、BMP6和BMP7基因mRNA表达在单羔组和多羔组间无显著差异(P>0.05);相关分析表明在卵巢组织中,只有BMP4基因mRNA表达与排卵数呈正相关(r=0.741,P<0.05)。【结论】BMP4基因mRNA表达在单羔组和多羔组间差异显著,可能对湖羊排卵数起关键作用,是影响湖羊排卵数的候选基因。

强直性脊柱炎患者PBMC中IP-10、IFN-γ和IL-4 mRNA表达水平及意义

为探讨强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中诱导蛋白10(IP-10)、干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)mRNA水平及意义。选取强直性脊柱炎患者92例(观察组),其中稳定期42例,活动期50例;同时选取健康体检者100例作为对照组,采用RT-PCR检测PBMC中IP-10、IFN-γ和IL-4mRNA表达。观察组PBMC中IP-10、IFN-γ和IL-4mRNA相对表达量分别为明显高于对照组;观察组活动期患者PBMC中IP-10、IFN-γ和IL-4mRNA相对表达量分别明显高于稳定期;观察组患者ASDAS评分、IP-10、IFN-γ和IL-4mRNA相对表达量与ASDAS评分呈正相关。结果显示强直性脊柱炎患者PBMC中IP-10、IFN-γ和IL-4mRNA表达明显升高,与病情程度有一定关系。

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中IL-4和IL-13mRNA的表达

目的 :探讨Th2型细胞因子在系统性红斑狼疮 (SLE)发病机制中的作用及其意义。方法 :应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测了 34例活动期SLE患者和 30例正常人外周血单个核细胞 (PBMC)中IL 4和IL 1 3mRNA的表达水平。结果 :活动期SLE患者IL 4和IL 1 3的阳性表达率与正常人对照组相比均无明显差异 ( P >0 0 5) ;活动期SLE患者PBMC中IL 4和IL 1 3mRNA的平均表达水平 ( 0 9386± 0 1 6 89,0 8983± 0 1 1 53)均明显高于正常人对照组 ( 0 54 94± 0 1 51 0 ,0 6 0 85±0 0 90 3) ,差异非常显著 (P <0 0 0 1 )。结论 :Th2型细胞因子IL 4和IL 1 3在SLE患者中呈高水平表达 ,这可能与SLE患者外周血T细胞高度活化、功能异常有关。

内脂素对2型糖尿病kkay小鼠骨骼肌组织PI3K和GLUT-4的影响

目的观察内脂素(visfatin)对kkay糖尿病小鼠骨骼肌组织磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)和葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)的影响。方法 C57BL/6J小鼠随机分为普通饲料喂养组(CON)、高脂饲料喂养组(HFD),kkay小鼠随机分为糖尿病模型组(DM)和visfatin治疗组(V)。采用实时荧光定量PCR和Western blot方法测定各组小鼠骨骼肌中PI3K和GLUT-4的mRNA和蛋白表达。结果 V组腹腔注射visfatin后的血糖较注射前下降(P=0.013),差异有统计学意义。DM组PI3K、GLUT-4的mRNA及蛋白表达量较CON组、HFD组降低(P<0.05),差异有统计学意义;V组PI3K、GLUT-4的mRNA及蛋白表达量较DM组增加(P<0.05),差异有统计学意义。结论内脂素可上调骨骼肌组织PI3K和GLUT-4的表达。