LV-GlyT2 siRNA对骨癌痛大鼠吗啡耐受形成的影响

目的观察鞘内注射GlyT2 siRNA慢病毒载体(LV-GlyT2 siRNA)对骨癌痛大鼠吗啡耐受形成的影响。方法将骨癌痛模型大鼠随机分为生理盐水组(NS组)、阴性对照病毒组(LV-NC组)和阳性病毒组(LV-GlyT2 siRNA组),每组10只。骨癌痛第7天,3组大鼠分别鞘内注射生理盐水、阴性对照病毒(LV-NC)及GlyT2 siRNA慢病毒载体(LV-GlyT2 siRNA);骨癌痛第9天开始大鼠均鞘内注射吗啡,连续7d。分别于癌细胞接种前及接种后7d测量大鼠术侧后肢机械缩足阈值(MWT);注射吗啡后1d、3d、5d、7d测量大鼠甩尾潜伏期,并计算%MPE值;注射吗啡第7天采用Western blotting检测脊髓GlyT2蛋白的表达。结果 3组大鼠癌细胞接种前及接种后7d的术侧后肢MWT在不同时间上有差异(P<0.05),不同组间及变化趋势无差异(P>0.05)。3组大鼠接种后7d的MWT较接种前下降(P<0.05)。3组大鼠注射吗啡后1d、3d、5d、7d的%MPE在不同时间、不同组间及变化趋势上有差异(P<0.05),注射吗啡后5d和7d,LV-GlyT2 siRNA组大鼠%MPE值较其他组升高(P<0.05)。LV-GlyT2 siRNA组GlyT2蛋白相对表达量低于LV-NC组和NS组(P<0.05)。结论下调GlyT2表达可缓解骨癌痛大鼠吗啡耐受的形成。

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核浅层内GABA样、L-ENK样、GlyT2样阳性末梢与Sindibis病毒转染表达GFP神经元之间的联系

应用GFP基因重组病毒标记技术和免疫荧光组织化学技术 ,在荧光显微镜和激光共聚焦扫描显微镜下观察了大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核 (Vc)浅层内GABA样、L ENK样、GlyT2样阳性纤维和末梢与Sindibis病毒转染表达GFP神经元之间的联系。结果显示 :①将GFP基因重组Sindibis病毒注入一侧Vc浅层后 ,仅在同侧Vc注射部位附近的Ⅰ～Ⅲ层内观察到 4～ 8个逆标的GFP神经元 ,这些神经元的胞体为小型 (直径≤ 15 μm)圆形、梭形或不规则形 ;②Vc浅层内均可见大量的GABA样、L ENK样、GlyT2样阳性纤维和末梢 ,以Ⅰ和Ⅱ层分布最为密集 ;③GABA样、L ENK样、GlyT2样阳性纤维和末梢分别聚集于GFP标记神经元的胞体或树突周围 ,并与之形成密切接触。以上结果表明 :Vc浅层内GFP神经元可能与GABA能、L ENK能、Gly能阳性纤维和末梢形成突触联系并接受这些抑制性神经末梢的调控。

新型镇痛药opiranserin的合成工艺研究

本研究改进了新型镇痛药opiranserin(VVZ-149)的合成工艺。用价廉易得的四氢-4H-吡喃-4-酮为起始原料,经过Strecker反应后还原得到4-氨甲基-N,N-二甲基四氢-2H-吡喃-4-胺(3),再与丁香酸(6)缩合得到N-[[4-(二甲胺基)-四氢-2H-吡喃-4-基]甲基]-4-羟基-3,5-二甲氧基苯甲酰胺(7),最后与正溴丁烷发生取代反应得到目标化合物VVZ-149。改进后的工艺反应步骤缩短,总收率从36.2%提高到65.6%,反应条件温和,适合工业化生产。