一株以甘油为底物产二羟丙酮(DHA)微生物菌种的筛选及鉴定

甘油为微生物可利用的理想碳源,从自然界筛选出21株以甘油为唯一碳源产二羟丙酮(DHA)的菌株,经初步发酵测定发酵液中DHA含量,其中菌株6-8DHA产量最高达6.4g/L。对其进行常规生理生化鉴定实验,并结合16SrDNA基因分析,比对结果表明,菌株6-8与Acinetobacter sp.相似性最高,达99.7%,在细菌分类学上属于假单胞菌目莫拉菌科不动杆菌属。将其命名为Acinetobacter sp.6-8。

微生物转化甘油生产1,3-二羟基丙酮的菌株筛选

对不同地区的土壤进行菌种筛选 ,得到 30余株可将甘油转化为 1 ,3 二羟基丙酮的菌株 ,其中 3株转化活力较高 ,本文仅对其中ZW1 2菌株的培养和转化条件进行了初步研究 ,在较优的培养条件下 ,甘油到 1 ,3 二羟基丙酮的最高转化率可达 1 6 %。

一株高产二羟基丙酮菌株的筛选及鉴定

从腐烂的水果中筛选到一株能发酵生产1,3-二羟基丙酮的菌株。基于生理生化鉴定及16S rRNA基因序列分析结果,确定该菌属于弗托氏葡萄糖酸杆菌,将其命名为Gluconobacter frateurii HD924。初步发酵实验表明该菌能发酵80 g/L的甘油产生63.04 g/L的1,3-二羟基丙酮。

重组肺炎链球菌甘油脱氢酶活性及晶体培养的初步分析

甘油脱氢酶能够氧化胞内甘油为代谢活动提供能量,并参与调控宿主粘附相关细菌蛋白质的表达,是潜在的抗菌药物靶点.本文利用大肠杆菌BL21原核表达肺炎链球菌甘油脱氢酶,获得大量上清表达的目的蛋白.再用Ni-NAT-Sepharose Fast Flow亲和层析、DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析以及Superdex 200分子筛进行纯化.经数据拟合,证实该酶在溶液中以同源二聚体形式存在.光谱实验证实,该重组表达甘油脱氢酶仍具有氧化甘油生成1,3-二羟基丙酮的活性.用Hampton试剂盒初筛晶体及棋盘法优化晶体,在0.1 mol/L Bicine pH 9.6,13%PEG MME 5000,0.2 mol/L KSCN,4%Dioxone条件下,得到了晶型好且有一定衍射能力的单晶,为解析肺炎链球菌甘油脱氢酶的三维结构及研究结构与酶活之间的关系奠定了基础.