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Effects of derivatives of human glycophorin A and their antibodies on the recognition and invasion of Plasmodium falciparum into erythrocytes
1
作者 王向东 骆训懿 +1 位作者 李建新 魏尧梅 《Journal of Medical Colleges of PLA(China)》 CAS 1992年第1期31-35,共5页
Electrophoresis-purified human glycophorin A(GPA)was used to produce its derivatives:(1)separation and purification of glycopeptides from GPA were performed after trypsin-digestion:(2)prepanation of GPA antibody and G... Electrophoresis-purified human glycophorin A(GPA)was used to produce its derivatives:(1)separation and purification of glycopeptides from GPA were performed after trypsin-digestion:(2)prepanation of GPA antibody and GPA glycopeptide antibody;(3)preparation of deglycosylatedGPA(dGPA);(4)incorporating GPA or dGPA into human RBC membrane lipids to form twokinds of liposomes.The products described above were used to test Plasmodim falciparumFCC-1/HN merozoites for their ability to invade human erythrocytes.It was found that GPA-liposomes were able to bind with merozoites and dGPA-liposomes had a negative reaction.GPA,GPA glycopeptide,GPA antibody,GPA glycopeptide antibody and GPA-liposome all had the effectto hinder the invasion of merozoites into human erythrocyte,whereas dGPA-liposome had no suchan effect. 展开更多
关键词 glycophorin ANTIBODIES PLASMODIUM falciparum RECEPTORS MALARIA
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Five types of glycophorin variants found in Southern China 被引量:1
2
作者 卢义钦 刘俊凡 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1999年第7期3-6,共4页
PurposeTosummarizetheresultsofgeneanalysisforfivetypesofglycophorin(GP)variantsfoundinascreeningsurveyconduc... PurposeTosummarizetheresultsofgeneanalysisforfivetypesofglycophorin(GP)variantsfoundinascreeningsurveyconductedinseveralregio... 展开更多
关键词 glycophorin VARIANTS SOUTHERN China
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Glycophorin variants and contents of sialic acid and total sulfhydryl groups on erythrocyte membranes of residents in a malaria hyperendemic area 被引量:2
3
作者 卢义钦 刘俊凡 +8 位作者 唐建华 周玉球 徐金耀 任象琼 王力飞 黄应龙 罗正权 潘忠华 吴秀友 《Chinese Medical Journal》 SCIE CAS CSCD 1998年第7期30-33,共4页
Abstract Objective To conduct a screening survey of glycophorin (GP) variants and observe the content changes of sialic acid (SA) and total sulfhydryl (SH) groups on the erythrocyte membranes among residents in a... Abstract Objective To conduct a screening survey of glycophorin (GP) variants and observe the content changes of sialic acid (SA) and total sulfhydryl (SH) groups on the erythrocyte membranes among residents in a tertian malaria hyperendemic area of Guizhou Province. Methods GP variants were detected in the erythrocyte hemolysates of 173 local residents at two villages of Libo County by SDS PAGE on 10% to 15% gradients gel and Western immunoblotting. Their SA and total SH group contents were estimated in erythrocyte membranes by spectrophotometric methods. 114 healthy subjects in Changsha and 49 individuals at a neighbouring village of the above area showing low morbidity of malaria served as normal and endemic controls respectively. Results Three distinct types of GP variants were found among 19 propositi in this hyperendemic area. The incidence of GP variants was 7.9% (8/101) at Yaolu Village whose population was mainly composed of Yao ethnic group;while that of Buyi ethnic group at Maolan Village was higher (15.3%; 11/72).The erythrocyte membrane contents of SA in residents at both villages exhibited a very significant tendency of decline (P<0.01), whereas those of total SH groups increased prominently in residents of Yaolu Village only (P<0.05). Conclusions The frequency of GP variants in this hyperendemic area does not depend upon the severity of malarial prevalence. The evident reduction of SA contents in the residents may be related to the breaking down of the SA residues on membrane GPs by the invasion of Plasmodium vivax. 展开更多
关键词 glycophorin variants and contents of sialic acid and total sulfhydryl groups on erythrocyte membranes of residents in a malaria hyperendemic area
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植物单宁对K562细胞诱导红系分化抑制作用 被引量:4
4
作者 易宗春 张光垚 +2 位作者 孙艳 刘延泽 王钊 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期786-788,共3页
目的研究可水解单宁诃子酸和特里马素I对氯化高铁血红素和丁酸钠诱导K562细胞红系分化的影响。方法四甲基偶氮噻唑蓝法分析诃子酸和特里马素I对K562细胞生长的影响,联苯胺染色法检测血红蛋白合成情况,应用免疫荧光和流式细胞术检测血型... 目的研究可水解单宁诃子酸和特里马素I对氯化高铁血红素和丁酸钠诱导K562细胞红系分化的影响。方法四甲基偶氮噻唑蓝法分析诃子酸和特里马素I对K562细胞生长的影响,联苯胺染色法检测血红蛋白合成情况,应用免疫荧光和流式细胞术检测血型糖蛋白A(GPA)在细胞表面的表达。结果诃子酸和特里马素I在0.04~0.09 mmol/L浓度下均可显著抑制K562细胞的生长增殖。2种单宁化合物(0.002~0.01 mmol/L)可显著抑制丁酸钠诱导的K562细胞血红蛋白合成,2种单宁化合物(0.01~0.05 mmol/L)还可显著抑制氯化高铁血红素诱导的血红蛋白合成,特里马素I(0.01 mmol/L)还抑制丁酸钠诱导的GPA在细胞表面表达。结论诃子酸和特里马素I对红系分化有抑制作用。 展开更多
关键词 诃子酸 红系分化 血型糖蛋白A 特里马素I
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抗血型糖蛋白A非凝集型单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:3
5
作者 董燕 毛建平 +2 位作者 刘斌 林汝仙 孙志贤 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1998年第2期121-124,共4页
抗红细胞非凝集型抗体是建立“全血免疫分析系统”的必要条件。为此,我们采用小鼠骨髓瘤细胞SP2/0和纯化人红细胞膜血型糖蛋白A(GlycophorinA,GPA)免疫的Balb/c小鼠的脾细胞融合,获得了一株分泌抗GP... 抗红细胞非凝集型抗体是建立“全血免疫分析系统”的必要条件。为此,我们采用小鼠骨髓瘤细胞SP2/0和纯化人红细胞膜血型糖蛋白A(GlycophorinA,GPA)免疫的Balb/c小鼠的脾细胞融合,获得了一株分泌抗GPA非凝集型单克隆抗体的杂交瘤细胞系——3C5。3C5分泌的McAb为IgG1亚类,κappa型轻链,能够识别和结合红细胞膜的血型糖蛋白A和血型糖蛋白B(GlycophorinB,GPB),说明其识别的是GPA和GPB分子所共有的抗原决定簇。该McAb可以特异性地与红系细胞的膜抗原结合,其结合不受血型系统的限制,也不引起红细胞的直接凝集,可应用于“全血免疫分析系统”。此外,对红细胞的分化研究和红白血病的特异性诊断也有重要的应用价值。 展开更多
关键词 血型糖蛋白A 单克隆抗体 非凝集型抗体
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恶性疟原虫裂殖子与人血型糖蛋白A之间分子识别的研究 被引量:3
6
作者 骆训懿 王向东 +3 位作者 李建新 魏尧梅 郑尊 严永碧 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期1-3,共3页
用纯化的人血型糖蛋白A(Glycophorin A,简称GPA)和GPA糖肽分别对恶性疟原虫FCC-1/HN株的裂殖子进行免疫胶体金标记。标记样品按常规电镜要求处理,透射电镜观察。结果显示,胶金颗粒呈弥漫状分布于整个裂殖子虫体表面,获得恶性疟原虫裂殖... 用纯化的人血型糖蛋白A(Glycophorin A,简称GPA)和GPA糖肽分别对恶性疟原虫FCC-1/HN株的裂殖子进行免疫胶体金标记。标记样品按常规电镜要求处理,透射电镜观察。结果显示,胶金颗粒呈弥漫状分布于整个裂殖子虫体表面,获得恶性疟原虫裂殖子与GPA及GPA糖肽特异识别结合的直观实验证据,属国内外首次报道。本结果进一步证实GPA是恶性疟原虫裂殖子的受体,及GPA糖肽区域是膜受体的活性部位。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 血型糖蛋白A 电镜
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抗人M和N型GPA特异性单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:3
7
作者 董燕 毛建平 +1 位作者 刘斌 孙志贤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期73-75,共3页
目的:为了建立“血型糖蛋白A(GlycophorinA,GPA)突变分析”技术。方法:采用杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)。结果:获得3株分泌抗GPA特异性McAb的杂交瘤细胞系,这3株McAb均属于IgG2a亚类、Kappa型轻链,其中2株特异性抗M型GPA,另外1株特... 目的:为了建立“血型糖蛋白A(GlycophorinA,GPA)突变分析”技术。方法:采用杂交瘤技术制备单克隆抗体(McAb)。结果:获得3株分泌抗GPA特异性McAb的杂交瘤细胞系,这3株McAb均属于IgG2a亚类、Kappa型轻链,其中2株特异性抗M型GPA,另外1株特异性抗N型GPA。3株McAb所针对的抗原决定簇位于GPA多肽链N末端第1~39位氨基酸之内,抗体与其结合依赖糖链的完整性。结论:制备的McAb可用于“GPA突变分析”的研究,也可以作为血型试剂在血液免疫学、遗传学和法医学的领域中应用。 展开更多
关键词 MN血型 血型糖蛋白A 单克隆抗体 制备
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恶性疟原虫GBP130基因5′近端侧翼序列调控功能的研究(英文) 被引量:2
8
作者 王宪锋 缪军 +3 位作者 刘忠湘 李珣 甄荣芬 薛采芳 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期65-71,共7页
目的 对GBP130的 5′近端侧翼序列进行分析 ,发现可能的强度和期特异性调控元件。 方法 构建含有不同长度GBP130启动子的质粒载体。用pGBPCATΔ 2、pGBPΔ2 /4 0 0和 pGBPΔ2 /80 0分别转染疟原虫 ,在转染后 48h收集虫体制备细胞抽提... 目的 对GBP130的 5′近端侧翼序列进行分析 ,发现可能的强度和期特异性调控元件。 方法 构建含有不同长度GBP130启动子的质粒载体。用pGBPCATΔ 2、pGBPΔ2 /4 0 0和 pGBPΔ2 /80 0分别转染疟原虫 ,在转染后 48h收集虫体制备细胞抽提物 ,检测报告分子CAT活性 ,分析近端侧翼序列不同区域的强度调控功能。另将 pGBPΔ2 /4 0 0和pGBPΔ2 /80 0分别同时转染疟原虫 ,分别于转染后 5h、15h和 46h收集虫体 ,制备细胞抽提物 ,检测CAT活性 ,分析近端侧翼序列不同区域的期特异性调控功能。 结果 强度分析中 ,当从转录起始点下游删除较小的片段 ( pGBPΔ2 /80 0 ) ,CAT表达水平与pGBPCATΔ 2中CAT水平无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,当删除近端较大片段 ( pGBPΔ2 /4 0 0 )时 ,CAT表达水平明显下降 (P <0 .0 5 )。同时 pGBPΔ2 /4 0 0的转录活性与对照组也有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;期特异性分析 ,pGBPΔ2 /4 0 0与pGBPΔ2 /80 0相比 ,在 5h时前者转录活性高于后者 ,但在 15h和 46h时 ,后者转录活性高于前者 ,提示 2种质粒在疟原虫不同生活阶段具有期特异性调控。 结论 推测不同GBP130启动子活性强度的差异是因为 5′UTR长度的不同 ,较长的UTR可促进基因的转录表达 ,可能GBP130基因近端侧翼序列中 2个同聚 展开更多
关键词 恶性疟原虫 GBP130基因 5'近端侧翼序列 调控功能 研究 血型糖蛋白结合蛋白130 基因调控
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人红细胞膜血型糖蛋白的研究进展 被引量:5
9
作者 毛建平 孙志贤 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第6期504-508,共5页
血型糖蛋白(GP)是红细胞膜中主要含唾液酸的跨膜蛋白,有A、B、C和D四种。GPA是MN血型糖蛋白,GPB表达Ss、U血型,GPC、GPD则是Gerbich抗原,四种血型糖蛋白的结构有不同程度的同源性,尤以同类间的同... 血型糖蛋白(GP)是红细胞膜中主要含唾液酸的跨膜蛋白,有A、B、C和D四种。GPA是MN血型糖蛋白,GPB表达Ss、U血型,GPC、GPD则是Gerbich抗原,四种血型糖蛋白的结构有不同程度的同源性,尤以同类间的同源性程度最高,GPA在防止红细胞之间、红细胞与血管内皮细胞之间的相互作用有重要功能,并在配体诱导下影响红细胞膜的物理性质。GPC是维持红细胞正常形状、正常物理性质的重要因子。GPA和GPC的功能还分别与带3蛋白、带4.1蛋白有关。 展开更多
关键词 红细胞 血型糖蛋白 跨膜蛋白质
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见于我国人群的一例St^a血型糖蛋白 被引量:3
10
作者 卢义钦 卢维敏 +1 位作者 成光杰 王力飞 《生物化学杂志》 CAS CSCD 1993年第1期117-121,共5页
在我国人群中筛查出一例疑似St^a血型糖蛋白(GP)变种。先证者为黎族男青年,属杂合子。家系调查表明,其遗传变异来自母亲。現借助限制性核酸內切酶图谱及一系列序列重叠的寡核苷酸探针,完成了其基因结构的鉴定,确证为見于我国的首例St^aG... 在我国人群中筛查出一例疑似St^a血型糖蛋白(GP)变种。先证者为黎族男青年,属杂合子。家系调查表明,其遗传变异来自母亲。現借助限制性核酸內切酶图谱及一系列序列重叠的寡核苷酸探针,完成了其基因结构的鉴定,确证为見于我国的首例St^aGP变种。在其(δ-α)杂化基因的交叉点,δGP基因断裂于26号氨基酸残基附近,而αGP基因断裂则位于59号氨基酸残基附近。 展开更多
关键词 St^a血型 糖蛋白 变种 红细胞膜
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插入四环素操纵子对恶性疟原虫血型糖蛋白结合蛋白130基因启动子活性的影响(英文) 被引量:1
11
作者 王宪锋 薛采芳 +4 位作者 刘忠湘 李珣 李淑梅 雷俊川 缪军 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期70-75,共6页
目的 构建四环素操纵子 (TetO)修饰的恶性疟原虫血型糖蛋白结合蛋白 13 0基因 (GBP13 0 )启动子 ,并探讨TetO插入后对启动子活性影响的位置效应。 方法 将 7个拷贝的TetO ( 7cot)序列分别克隆入GBP13 0启动子转录起始点附近的 4个位... 目的 构建四环素操纵子 (TetO)修饰的恶性疟原虫血型糖蛋白结合蛋白 13 0基因 (GBP13 0 )启动子 ,并探讨TetO插入后对启动子活性影响的位置效应。 方法 将 7个拷贝的TetO ( 7cot)序列分别克隆入GBP13 0启动子转录起始点附近的 4个位点 ,上、下游各两个 ,产生 4个衍生质粒pG/ 7T( -5 ) ,pG/ 7T( -2 ) ,pG/ 7T( +2 )和pG/ 7T( +5 )。瞬时转染后通过CATELISA检测和分析pGBPCATΔ2和 4个衍生质粒中CAT报告基因的表达水平。 结果 限制性酶切、PCR扩增和DNA测序证明质粒构建成功。转染和CAT检测表明 ,7cot插入到GBP13 0启动子的 4个位点中均可提高启动子的活性 ,并且定位于启动子下游比定位于上游具有更高的活性 ,其中于 +5位点启动子活性最高。 结论 在疟原虫四环素诱导性转基因表达系统中质粒pG/ 7T( +5 ) 展开更多
关键词 恶性疟原虫 血型糖蛋白 载体蛋白质类 四环素 转基因表达系统
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抗人红细胞血型糖蛋白A非多态性表位单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:2
12
作者 张嘉敏 陈和平 +1 位作者 王芬 朱自严 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2008年第3期177-179,共3页
目的制备抗人红细胞血型糖蛋白A(Glycophorin A,GPA)非多态性表位单克隆抗体并鉴定其特性。方法用小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术获得分泌单抗-GPA非多态性表位的杂交瘤细胞株;鉴定抗体特异性和亚型;通过和各种酶处理细胞的反应确定单抗结合... 目的制备抗人红细胞血型糖蛋白A(Glycophorin A,GPA)非多态性表位单克隆抗体并鉴定其特性。方法用小鼠B淋巴细胞杂交瘤技术获得分泌单抗-GPA非多态性表位的杂交瘤细胞株;鉴定抗体特异性和亚型;通过和各种酶处理细胞的反应确定单抗结合抗原位点的特性。结果得到的2株抗-GPA非多态性表位的单克隆细胞株Q6D7和Q7C9,均属IgG1亚类、Kappa型轻链,所针对的抗原位点均抗胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶处理,对无花果酶、木瓜酶、唾液酸酶敏感。结论制备获得2株抗-GPA非多态性表位单克隆抗体。 展开更多
关键词 单克隆抗体 血型糖蛋白A 非多态性表位
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麦胚凝集素作用下膜血型糖蛋白A构象变化研究 被引量:1
13
作者 姜厚理 宋占军 +3 位作者 段耀奎 董晓敏 苏雅娴 林克椿 《生物物理学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期8-14,共7页
为进一步验证麦胚凝集素作用下膜血型糖蛋白A空间构象的变化,本文用傅里叶变换红外技术,定量测定了麦胚凝集素作用下,溶液血型糖蛋白A和脂蛋白体膜血型糖蛋白A的二级结构的改变,发现麦胚凝集素结合于血型糖蛋白A导致血型糖蛋白... 为进一步验证麦胚凝集素作用下膜血型糖蛋白A空间构象的变化,本文用傅里叶变换红外技术,定量测定了麦胚凝集素作用下,溶液血型糖蛋白A和脂蛋白体膜血型糖蛋白A的二级结构的改变,发现麦胚凝集素结合于血型糖蛋白A导致血型糖蛋白Aα—螺旋减少,β—结构增加,麦胚凝集素的抑制剂N—乙酰葡萄糖胺对麦胚凝集素诱导的血型糖蛋白A二级结构的改变有抑制作用。本文同时用扫描隧道显微术直接观察了麦胚凝集素结合前后膜血型糖蛋白A分子形态的变化。 展开更多
关键词 血型糖蛋白A 麦胚凝集素 构象
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MNS杂交糖蛋白GP. Mur的高分辨率熔解曲线(HRM)基因分型 被引量:1
14
作者 魏玲 姬艳丽 +4 位作者 张润青 王贞 温机智 付涌水 罗广平 《中国输血杂志》 CAS 2018年第6期596-599,共4页
目的采用高分辨率熔解曲线(HRM)基因分型方法对MNS杂交糖蛋白GP.Mur做基因分型并验证HRM基因分型方法的可靠性。方法收集254例献血者全血标本(广州地区献血者104例,澳大利亚华裔献血者150例),利用DNA提取试剂盒抽提基因组DNA;以HRM... 目的采用高分辨率熔解曲线(HRM)基因分型方法对MNS杂交糖蛋白GP.Mur做基因分型并验证HRM基因分型方法的可靠性。方法收集254例献血者全血标本(广州地区献血者104例,澳大利亚华裔献血者150例),利用DNA提取试剂盒抽提基因组DNA;以HRM基因分型方法对MNS杂交糖蛋白GP.Mur做基因分型;以多重连接依赖的探针扩增技术(MLPA)或血清学方法对GP.Mur阳性标本做确证试验,同时采用直接测序法对HRM检出的变异曲线标本确证。结果 HRM基因分型254例标本中杂合的GP.Mur有14例,其中11例GP.Mur阳性标本均来自广州献血者,经MLPA基因分型方法证实其基因型为GYP*Mur/GYPB,另外3例为澳大利亚华裔献血者标本,血清学试验证实红细胞表型为GP.Mur。此外,HRM方法还检出了4例变异曲线标本,测序结果显示这4例标本均在GYPB基因上携带有点突变。结论 HRM方法能准确地对GP.Mur糖蛋白做基因分型,该方法在突变扫描方面具有极大的优势。 展开更多
关键词 MNS杂交糖蛋白 GP.Mur 高分辨率熔解曲线 基因分型
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用合成肽制备鼠源性抗-GPB单克隆抗体及特性鉴定 被引量:1
15
作者 郭忠慧 李勤 +1 位作者 王晨 朱自严 《中国输血杂志》 CAS 北大核心 2015年第7期778-780,共3页
目的用合成肽作为免疫原,制备针对血型糖蛋白GPB的单克隆抗体细胞株。方法合成人血型糖蛋白GPBs上1段由GPB蛋白第17-36位氨基酸构成的肽段17TKSYISSQTNGETGQLVHRF36,用钥孔虫血蓝(KLH,keyhole limpet hemocyanin)载体蛋白联接的合成多... 目的用合成肽作为免疫原,制备针对血型糖蛋白GPB的单克隆抗体细胞株。方法合成人血型糖蛋白GPBs上1段由GPB蛋白第17-36位氨基酸构成的肽段17TKSYISSQTNGETGQLVHRF36,用钥孔虫血蓝(KLH,keyhole limpet hemocyanin)载体蛋白联接的合成多肽免疫BALB/c小鼠。采用杂交瘤技术制备鼠源单克隆抗体,经选择培养和有限稀释亚克隆后,ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株,健康小鼠腹腔接种阳性杂交瘤细胞,制备小鼠腹水,谱红细胞凝集试验、酶处理红细胞、特定稀有血型红细胞凝集试验,以及蛋白免疫印记(Western-Blotting)等技术鉴定抗体特异性;鼠源m Ab亚类试剂盒鉴定抗体Ig G亚型。结果 ELISA筛选获得阳性单抗细胞株1株,经鼠源m Ab亚类试剂盒鉴定,所制备的单克隆抗体属于Ig G3,Kappa型轻链。其小鼠腹水制备液与所有谱红细胞在盐水和抗鼠球蛋白介质中均产生凝集(包括Ss,SS,ss,MM,MN,NN表型),与稀有的MkMk细胞不发生凝集。腹水制备液与经木瓜酶、菠萝酶、无花果酶和胰蛋白酶处理的O型红细胞反应,凝集强度与非酶处理红细胞无明显改变。Western-Blotting杂交试验显示小鼠腹水稀释液与红细胞膜蛋白的杂交条带位于GPB的位置。结论制备1株可分泌抗-GPB m Ab的杂交瘤细胞株,为进一步的实验研究奠定了基础。 展开更多
关键词 GPB 合成肽 单克隆抗体
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鼠抗人A_1亚型红细胞单克隆抗体研制及其免疫学性质研究 被引量:1
16
作者 袁凌云 徐从贞 +1 位作者 陈华堂 王晓琴 《安徽医科大学学报》 CAS 1995年第3期165-168,共4页
应用杂交瘤技术,以2种抗原分别免疫BALB/C小鼠。从3次细胞融合中,筛选出4株分泌高滴度、高特异性抗A1血型物质单克隆抗体的杂交瘤细胞系。经多种免疫化学试验证明:其中B523-H10、D243-H92株杂交瘤扩大培... 应用杂交瘤技术,以2种抗原分别免疫BALB/C小鼠。从3次细胞融合中,筛选出4株分泌高滴度、高特异性抗A1血型物质单克隆抗体的杂交瘤细胞系。经多种免疫化学试验证明:其中B523-H10、D243-H92株杂交瘤扩大培养上清液仅凝集A1红细胞,而不凝集A2、B、O型红血胞。它们结合部位的结构互补于:人工接上脂肪链的A-活性三糖。从而表明该2株单抗为首次获得的抗A1亚型红细胞单克隆抗体。不仅为研究A1亚型血本质提供了极好的材料,也为医学临床提供A1亚型血分型试剂准备了条件。 展开更多
关键词 杂交瘤 单克隆抗体 血型糖蛋白类 红细胞
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我国人红细胞膜MiⅢ血型糖蛋白的基因结构分析 被引量:2
17
作者 刘俊凡 卢义钦 +1 位作者 夏晖 徐金耀 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第3期267-273,共7页
在114名青年人中筛查出的两例血型糖蛋白(GP)变种,携有MiⅢ基因特殊的变异片段.先证者均为海南省黎族男性,属杂合子.借助聚合酶链式反应(PCR)获得跨越MiⅢ基因外显子2~4的基因组序列,再进行被扩增DNA的直接... 在114名青年人中筛查出的两例血型糖蛋白(GP)变种,携有MiⅢ基因特殊的变异片段.先证者均为海南省黎族男性,属杂合子.借助聚合酶链式反应(PCR)获得跨越MiⅢ基因外显子2~4的基因组序列,再进行被扩增DNA的直接测序,确证其基因结构属(δ-α-δ)杂化体.通过基因的微转换机理,δ基因的假外显子在其3'端同显示5'剪接信号的α基因外显子3及内含子3融合,前两者形成一组合外显子3.MiⅢ基因的近端(δ-α)断点(Breakpoint)在组合外显子3内(第825~850位核苷酸);而远端(α-δ)断点则在内含子3内(第904~968位核苷酸). 展开更多
关键词 红细胞膜 MiⅢ血型糖蛋白 基因结构
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Ⅱ型糖尿病的红细胞膜GPA基因表达 被引量:1
18
作者 吉琼梅 刘俊凡 卢义钦 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第5期622-626,共5页
为了研究Ⅱ型糖尿病(NIDDM)患者红细胞膜血型糖蛋白A(GPA)的基因表达,采用不连续聚蔗糖(Percol)密度梯度法分离15名正常人和25例NIDDM患者外周血的网织红细胞,提取其总RNA,继以Northern斑... 为了研究Ⅱ型糖尿病(NIDDM)患者红细胞膜血型糖蛋白A(GPA)的基因表达,采用不连续聚蔗糖(Percol)密度梯度法分离15名正常人和25例NIDDM患者外周血的网织红细胞,提取其总RNA,继以Northern斑点杂交观测此两组的红细胞膜GPA基因的表达水平.采用碱性磷酸酶酶联免疫检测完成红细胞膜GP的Western印迹.结果表明,NIDDM患者组红细胞膜GPA的mRNA含量较正常人组显著增加(分别为11.92±10.5和10.18±1.08积分光密度,P<0.01).免疫印迹图谱显示,有6例NIDDM患者的区带3a、3b界限模糊,3例的区带3a、3b和4明显浅染.推测NIDDM患者红细胞膜GPA减少可能引起其基因表达呈代偿性增强,而障碍或许出现在翻译环节上,这些与NIDDM患者红细胞变形能力(RCD)的明显降低甚为相符. 展开更多
关键词 糖尿病 GPA 基因表达
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编码糖蛋白B的裸基因疫苗诱导单纯疱疹病毒Ⅰ型感染小鼠的体液和细胞免疫 被引量:1
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作者 金美兰 由田 +6 位作者 张庆镐 金丹 李红花 李芳芳 金权鑫 曹卉 崔逢德 《延边大学医学学报》 CAS 2010年第3期157-162,共6页
[目的]用编码单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)糖蛋白B的pDNA转染小鼠,研究基因疫苗治疗感染性疾病的有效性,并分析免疫反应.[方法]采用血管内注射方法,将含有不同剂量、不同pDNAs的生理盐水注入Balb/c小鼠体内,1周后行再次免疫,观察以不同组合p... [目的]用编码单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)糖蛋白B的pDNA转染小鼠,研究基因疫苗治疗感染性疾病的有效性,并分析免疫反应.[方法]采用血管内注射方法,将含有不同剂量、不同pDNAs的生理盐水注入Balb/c小鼠体内,1周后行再次免疫,观察以不同组合pDNA进行免疫的实验组和对照组小鼠被致死剂量HSV-1感染后生存率间的差异.通过潜伏感染的检测、血清中细胞因子水平的测定、细胞毒性反应的测定及中和实验评价免疫效果.[结果]接种pG.gB或接种pGEG.gB的小鼠,与相应对照组比较,生存率和诱导产生中和抗体的效价与剂量呈正相关,pGEG.gB免疫组对P815.gB细胞有显著的细胞毒性作用,pGEG.gB免疫小鼠的脾细胞增殖反应显著强于pG.gB免疫的小鼠;pG.gB和pGEG.gB免疫后的小鼠血清中IL-12和IFN-γ水平均显著升高.[结论]裸pDNA的经小鼠尾静脉免疫可诱导HSV-1感染小鼠的体液和细胞免疫应答,对小鼠HSV-1急性感染有明显的预防和治疗作用,且含有EBNA1和oriP的EBV质粒载体明显增强CTL活性和增殖反应. 展开更多
关键词 编码 糖蛋白 基因疫苗 诱导 单纯疱疹 病毒Ⅰ型 感染性疾病 Balb/c小鼠 体液和细胞免疫应答 mice simplex HSV-1 脾细胞增殖反应 细胞因子水平 细胞毒性作用 细胞毒性反应 生存率 致死剂量 对照组 IFN-Γ水平
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抗血型M、N及抗血型糖蛋白A/B单克隆抗体的制备及其特性鉴定 被引量:2
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作者 陈琦 曹慧 +3 位作者 张海燕 高哓飞 王芬 李厚达 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期556-558,共3页
目的: 制备抗血型M、N及抗血型糖蛋白A/B(GPA/GPB)的单克隆抗体(mAb), 并进行特性鉴定.方法: 用人“O”型血红细胞作为免疫源, 免疫BALB/c小鼠.采用淋巴细胞杂交瘤技术制备mAb, 用谱红细胞筛选阳性克隆; 采用直接、间接血凝试验... 目的: 制备抗血型M、N及抗血型糖蛋白A/B(GPA/GPB)的单克隆抗体(mAb), 并进行特性鉴定.方法: 用人“O”型血红细胞作为免疫源, 免疫BALB/c小鼠.采用淋巴细胞杂交瘤技术制备mAb, 用谱红细胞筛选阳性克隆; 采用直接、间接血凝试验检测杂交瘤细胞培养上清及腹水中mAb的效价.分别用快速定性试纸和酶处理红细胞检测mAb的Ig亚类及抗原表位.用Western blot鉴定抗GPA/GPB mAb的特异性.结果: 获得4株分泌抗M、1株抗N及3株抗GPA/GPB mAb的杂交瘤细胞株.杂交瘤细胞培养上清mAb的效价介于1×2^-4 ~1×2^-8之间, 腹水mAb的效价在1×2^-7 ~1×2^-12之间.除1株mAb 1C1C9C4为IgM外, 其他7株mAb均为IgG.通过杂交瘤细胞培养上清与谱红细胞的反应格局, 结合mAb抗原表位的检测, 确定4株和1株mAb可分别特异性结合于GPA的M、N抗原表位; 另3株mAb 6D7C9、7C9H4和7C9G11 与“O”型血红细胞膜的Western blot结果显示, 均可结合GPA、GPB蛋白.结论: 成功地建立了4株分泌抗M、1株分泌抗N及3株分泌抗GPA/GPB mAb的杂交瘤细胞株, 可用于MNSs血型系统的研究及鉴定, 并为制备双功能抗体用于病毒、肿瘤疾病的诊断和治疗打下了坚实的基础. 展开更多
关键词 MN血型系统 血型糖蛋白A 血型糖蛋白B 谱红细胞 单克隆抗体
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