大豆GmRAV基因与暗形态建成相关

实时定量PCR(RT-PCR)研究表明大豆GmRAV基因表达受黑暗强烈诱导,转基因烟草研究发现该基因在黑暗下促进植株的黄化,抑制子叶的展开和促进下胚轴的伸长,说明该基因可能参与大豆暗形态建成过程。

大豆GmRAV基因参与BR信号传导途径及重组蛋白可溶性分析

对大豆东农42喷施表油菜素内酯(epi BL),进行GmRAV定量,研究油菜素内酯(BR)对GmRAV基因表达的影响,同时对T5代GmRAVox烟草外源添加epi BL,研究GmRAV基因是否也参与BR信号从而抑制植物的生长发育。结果表明:BR抑制GmRAV基因表达,并且外源添加epiBL并未促进GmRAVox烟草植株茎延伸,表明GmRAV可能为BR促进植物的生长发育信号传导途径的负调节因子。同时,将大豆中已克隆的GmRAV基因克隆到原核表达载体p ET28a上,构建与His标签融合的重组蛋白pET28a-GmRAV质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)中,对其进行37℃、28℃两种不同温度下0.5mmol·L^(-1)IPTG诱导,诱导时间为6 h。SDS-PAGE电泳结果表明:分子量大约为40 kDa的重组蛋白在不同温度下均表达,低温可以明显增强GmRAV蛋白的可溶性。

烟草中细胞分裂素诱导表达的大豆GmRAV基因参与不定芽再生

通过实时定量RT-PCR研究表明,大豆GmRAV基因的表达受细胞分裂素强烈诱导。对转GmRAV基因烟草研究发现,该基因在0.05mg/L 6-BA存在时,即可促进外植体的不定芽再生,另外,GmRAV基因在过量表达的烟草植株中明显促进烟草细胞周期蛋白CyclinD编码基因的转录,推测其参与细胞增殖和分化过程。

RAV基因对拟南芥和大豆不定芽再生的影响

RAV基因是具有AP2/ERF结构域的转录因子家族成员之一,以拟南芥rav突变体和GmRAV干涉(GmRAV-i)大豆的不同外植体为材料进行愈伤组织诱导,分别在芽诱导培养基中加入不同浓度的外源细胞分裂素2-ip和6-BA,考察平均不定芽数和不定芽再生频率。结果表明:与野生型材料相比,拟南芥rav突变体和GmRAV-i大豆在适宜的2-ip和6-BA浓度下平均不定芽数和不定芽再生频率均有所降低。证明RAV基因同系物在不同植物间具有功能保守性,并且在细胞分裂素存在下促进植物不定芽的再生。