GnRH-6与麦芽糖结合蛋白的融合表达及鉴定

将人工合成的哺乳动物型GnRH六聚体基因插入原核表达质粒pMAL-c2中,重组质粒转化到大肠埃希菌BL21中,采用IPTG进行诱导表达,用多糖树脂亲和层析法纯化蛋白,用SDS-PAGE对纯化蛋白进行分析,用间接ELISA方法鉴定融合蛋白的反应原性。结果表明,与麦芽糖结合蛋白基因融合的Gn-RH六聚体基因在大肠埃希菌BL21中能够高效表达;用多糖树脂进行亲和层析纯化蛋白,具有良好的纯化效果;表达的融合蛋白分子质量大小与理论值一致,且融合蛋白与GnRH抗体的反应较好。

GnRH-a辅助腹腔镜下卵巢囊肿剥离术对患者外周血TNF-α、IL-6、NLRs表达水平的影响

目的:探讨促性腺释放激素激动剂(GnRH-a)辅助腹腔镜下卵巢巧克力囊肿(OEC)剥离术对NOD样受体(NLRs)mRNA相对表达量及血清肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-6水平的影响。方法:收集2013年1月至2016年1月陕西省延安市延安大学附属医院妇科收治的OEC患者112例,随机分为对照组和观察组,每组56例。对照组采用腹腔镜下OEC剥离手术治疗,观察组在腹腔镜下OEC剥离手术后加用GnRH-a治疗。术后1年,比较两组临床疗效、复发率、不良反应和妊娠率,检测术前和术后6个月、12个月的激素水平,比较NOD1、NOD2mRNA相对表达量及血清TNF-α、IL-6水平。结果:观察组和对照组的总有效率分别为94.54%、80.00%,复发率分别为3.64%、16.36%,有生育需求的患者的妊娠率分别为52.38%、27.50%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。两组术后卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇(E2)浓度先下降后升高,术后6个月时观察组上述指标显著低于对照组,术后12个月时显著高于对照组,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。术后12个月,两组NOD1、NOD2mRNA相对表达量及血清TNF-α、IL-6水平均显著降低,且观察组显著低于对照组(P<0.05)。两组不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:腹腔镜下OEC剥离术后使用GnRH-a辅助治疗能提高临床有效率、降低复发率,提高妊娠率,降低NOD1、NOD2的表达,下调血清TNF-α和IL-6水平,抑制患者体内炎症状态。

[18F]AlF-NOTA-P-L-Lys6-GnRH的自动化合成及初步Micro-PET/CT显像

通过固相合成法合成新型促性腺激素释放激素(Gonadotropin Releasing Hormone,GnRH)衍生物,在商业模块上用[18F]AlF标记法自动化标记该衍生物,所标记示踪剂进一步在PC-3前列腺荷瘤模型裸鼠体内进行小动物PET/CT(Positron Emission Tomography/Computed Tomography)显像。L-Lys^6-GnRH的6-赖氨酸末端氮位上用聚乙二醇(Polyethylene Glycol,PEG)链接三-叔-丁基2,2′,2″(- 1,4,7,10-四氮杂环十二烷-1,4,7-三基)三乙酸(tri-tert-butyl 2,2′,2″(- 1,4,7,10-tetraazacyclododecane-1,4,7-triyl)triacetate,NOTA)官能团合成一种新的GnRH衍生物(NOTA-P-GnRH),在国产模块PET-MF-2V-IT-I中通过一锅一步反应自动化制备[18F]AlF-NOTA-P-L-GnRH,自动化合成时间在 35 min 以内,衰变校正后产率(25±6)%,放射化学纯度>95%,比活度 8~30 GBq·μmol^-1(n=6)。进一步用[^18F]AlF-NOTA-P-L-Lys^6-GnRH在PC-3前列腺荷瘤模型裸鼠体内进行小动物PET/CT动态显像,肿瘤部位清晰可见,具有高的肿瘤与肌肉摄取比值,动态活度与时间曲线显示示踪剂主要通过肾脏排泄。结果表明:[18F]AlF标记法在商业模块中的自动化生产操作简便、高效可靠,[18F]AlF-NOTA-P-L-Lys^6-GnRH是PC-3前列腺肿瘤的潜在显象剂。

睾酮和D-色~6-GnRH对家犬睾丸性激素及垂体促性腺激素分泌功能的影响

本文报告了单用丙酸睾酮和丙酸睾酮加D-色~6-GnRH对正常健康成年雄性家犬睾丸和垂体性激素分泌功能的影响,并与其形态学变化进行了对照研究,发现短期大剂量外源性丙酸睾酮可使睾丸和垂体性激素分泌功能受到抑制,当丙酸睾酮加D-色~6-GnRH后,将使这种抑制性损害更为严重,且与其睾丸和垂体的组织形态学变化相一致.提示其功能的改变是有形态为基础的,故在临床应用时须谨慎.

醋酸加尼瑞克预防OHSS作用及对血清IL-6的影响

目的选择卵巢过度刺激综合征(OHSS)高危患者于取卵后应用促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-ant)醋酸加尼瑞克,观察其在预防早发型OHSS中的作用及其对患者血清IL-6水平的影响。方法选取2018年8月~2019年2月期间于潍坊医学院生殖医院接受体外受精(IVF)的OHSS高危患者60例,随机分为2组。实验组自取卵当日起开始应用醋酸加尼瑞克0.5mg,共5d;对照组自取卵当日起开始使用生理盐水0.5ml,共5d。所有患者定时返院评估是否发生OHSS并抽血测定血清IL-6水平。结果实验组与对照组患者血清IL-6水平均无明显差异;实验组患者OHSS发生率低于对照组。结论取卵后应用GnRH拮抗剂对血清IL-6水平无明显影响;取卵后应用GnRH拮抗剂可一定程度预防早发型OHSS。