纳米胶体金免疫标记技术在牛病检测中的研究和应用

作者综述了以胶体金免疫渗滤法和胶体金免疫层析法为代表的纳米胶体金免疫标记技术近年来在牛病检测方面的研究和应用进展,并分析和预测其应用前景,为该技术在牛病临床检测领域的进一步研究与应用提供参考。

免疫金渗滤试验检测食品中沙门氏菌的研究

分别用抗沙门氏菌多价抗体和葡萄球菌A蛋白包被胶体金制备探针 ,采用免疫渗滤法可检出 85 %的引起食物中毒的沙门氏菌 ,灵敏度为 2 4× 10 7cfu/ml。对最常见的鼠伤寒、猪霍乱和肠炎沙门氏菌 ,检出率达 10 0 %。人工染菌的食品样品经简单处理 ,即可用于检测。该方法简单快速 。

基于抗单增李斯特菌单链抗体的胶体金探针制备及其活性鉴定

以大肠杆菌表达系统制备抗单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)的单链抗体,以胶体金作为示踪物,优化胶体金探针的制备,并经免疫渗滤法鉴定胶体金探针的活性。结果表明该胶体金探针应用于免疫渗滤法时,具有高度特异性,通过胶体金探针的直接显色,可判断阳性样品;对Lm的最低检测限约为107 CFU/m L;完成检测过程仅需10 min左右。该方法简单、快速、准确,可用于食品中Lm的检测。

胶体金免疫渗透试验定量检测D-dimer评价

目的 :通过与酶联免疫吸附试验 (ELISA)对比 ,对胶体金免疫渗透试验 (GIA)定量检测D -dimer进行评价。方法 :同时用酶联免疫吸附试验和胶体金免疫渗透试验测定血浆D -dimer含量 ,并对结果进行比较。结果 :取cut -off值为0.30mg/L ,ELISA法检测D -dimer的敏感性、特异性为90.7 %、94.5 % ,GIA法为92.5 %、96.2% ;对两种方法进行配对资料t检验 ,无显著性差异 (P>0.05) ;按照NCCLSEP9 -A文件对两种方法进行直线回归分析 ,结果相关性较好 (r=0.9966)。结论 :GIA试验具有ELISA的准确、定量的优点 ,同时又有其自身的快速、简便的特点 ,非常适用于临床实验室常规及急症应用。

SARS病毒快速检测膜研制

建立一种快速检测严重急性呼吸综合症冠状病毒(SARS-CoV)的方法。从SARS冠状病毒刺突蛋白基因中扩增出羧基端片段,克隆并表达。用经Ni-NTA树脂纯化的表达蛋白作为抗原包被硝酸纤维素膜,捕获感染SARS病人血清中的抗体。抗原抗体通过渗滤在膜上反应,5min肉眼即可观察到结果。通过比较不同试剂用量条件下的结果确定检测抗原的最佳浓度。通过本产品检测已经过ELISA验证的50份血清样品证明两种检测结果无显著性差异(P>0.05)。与ELISA相比,该检测方法特异性、灵敏性几乎相当,但具有简单、快速、成本低廉等ELISA所无法比拟的优点,适合于初步诊断和流行病学调查。