‘金草鱼’和普通草鱼肌肉营养成分比较分析及其营养价值评价

【目的】比较分析‘金草鱼’与普通草鱼肌肉营养成分的异同,旨在进一步了解‘金草鱼’的开发利用价值.【方法】对‘金草鱼’和普通草鱼肌肉中的主要营养成份、氨基酸、脂肪酸以及矿物元素含量进行了比较分析,并对其营养价值进行了评价.【结果】‘金草鱼’脂肪显著高于普通草鱼,水分显著低于普通草鱼,但粗蛋白和灰分差异不显著.‘金草鱼’和普通草鱼肌肉16种氨基酸总量分别为17.99%和17.43%,其中7种必需氨基酸分别占氨基酸总量的41.25%和41.37%;‘金草鱼’鲜味氨基酸总质量分数显著高于普通草鱼;必须氨基酸指数分别为79和78.金草鱼肌肉中脂肪酸种类比普通草鱼少2种(C21∶0和C20∶3),饱和脂肪酸总含量和多不饱和脂肪酸含量比普通草鱼低.‘金草鱼’和普通草鱼都含有较丰富的矿物元素,‘金草鱼’肌肉中矿物质总量比普通草鱼高,金草鱼的铜、铁、锌的比值较普通草鱼更为合理.【结论】与普通草鱼相比,‘金草鱼’具有较好的鲜味程度和更为合理的矿物元素组成.

鲫、草鱼外周血中淋巴细胞和单核细胞对鲤血管内皮细胞的粘附

借鉴哺乳动物内皮细胞体外培养技术 ,结合鱼类细胞自身特点 ,纯化培养鲤血管内皮细胞并传至 3代 ,以此作为粘附材料。应用淋巴细胞分离液离心技术并结合玻璃粘附法分离纯化鲫、草鱼外周血中淋巴细胞、单核细胞 ,并与上述 3代内皮细胞进行免疫粘附试验 ,同时进行免疫粘附动力学观察。结果显示 ,鲫、草鱼两类细胞对内皮细胞的粘附率分别为 :0 .0 9± 0 .0 13,0 .2 0± 0 .0 18;0 .11± 0 .0 15,0 .2 1± 0 .0 2 3。表明鲤科鱼类不同种的同类细胞粘附率差异不大 ,而同种不同类细胞则差异显著。动力学观察分析表明 ,淋巴细胞粘附较快 ,60min进入平台期 ;单核细胞粘附慢 ,12 0min进入平台期。初步证明鱼类内皮细胞具有免疫介导作用。

金草鱼Serpinc1基因克隆及其序列分析

获取金草鱼Serpinc1基因序列,研究金草鱼与草鱼Serpinc1基因的差异,并预测金草鱼Serpinc1基因序列的特征及其编码蛋白的高级结构。本研究利用RT-PCR克隆测序技术获得金草鱼Serpinc1基因序列,分析其与草鱼Serpinc1基因的差异,并通过生物信息学方法预测金草鱼Serpinc1基因序列的特征及其编码蛋白的高级结构。结果显示,金草鱼Serpinc1基因与草鱼相比共有4个核苷酸位点发生改变(c.1091T>A、c.1116A>T、c.1176T>G和c.1179C>T),其中仅有1个位点(c.1091T>A)为错义突变,导致第364位缬氨酸(Val)转变为谷氨酸(Glu)。生物信息学预测结果表明,金草鱼Serpinc1基因开放阅读框长度为1353 bp,共编码450个氨基酸,分子量为50.89 kDa,理论等电点为6.58,不稳定指数为34.55,属于不稳定蛋白;编码氨基酸包含20种标准氨基酸,其中亮氨酸最多(10.2%),而色氨酸(Trp)含量最少(1.3%);整条肽链的亲疏水平均值为-0.213,表现为亲水性;包含4个糖基化位点和37个磷酸化位点;蛋白质二、三级结构以α螺旋和无规则卷曲为主。研究结果可为深入研究金草鱼Serpinc1分子结构和功能及其发挥该功能的活性位点的验证奠定了基础,为金草鱼出血性疾病相关分子标记的筛选提供了理论基础。

淡水鱼华支睾吸虫囊蚴感染的胶体金免疫检测技术建立

目的建立一种淡水鱼华支睾吸虫感染的胶体金免疫检测技术。方法用蛋白A(Protein A)纯化草鱼血清中IgM,将其免疫新西兰兔后,纯化获取兔抗草鱼IgM的IgG二抗;胶体金标记兔抗草鱼IgM的IgG作为金标诊断抗体,按间接法检测原理组装胶体金检测试纸条,用华支睾吸虫虫体总蛋白为抗原,检测阳性及阴性草鱼血清样品中特异抗体,观察检测结果,初步评价该技术的敏感性、特异性等。结果胶体金溶液的最大吸收值(Amax)为0.845,最大吸收峰(λmax)位于525 nm波长处。进一步用扫描电镜(TEM)分析制备的胶体金,结果显示其颗粒大小均一,形状规则,分布较均匀。建立的胶体金试纸条能在10 min左右完成对草鱼血清中特异抗体的检测,血清稀释到1∶500后依然能被检测出;9份阳性血清有7份被检测出特异抗体,5份阴性血清均无条带显示,试纸条特异性较好。结论建立的免疫检测试技术可望用于鱼体内华支睾吸虫感染的快速检测,值得进一步优化及转化应用,为华支睾吸虫病综合防治提供技术支撑。