沉默GOLPH3基因对胃癌细胞增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的观察特异性沉默高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)基因对胃癌细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其机制。方法将人胃癌SGC-7901细胞随机分为3组,A、B组分别转染LV-GOLPH3-RNAi-1、无义链,C组不转染。转染72h后,采用MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot法检测细胞GOLPH3、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-m TOR)和m TOR。结果 A组细胞增殖的OD值较B、C组低,细胞凋亡率(2.70%±0.11%)高于B组(0.42%±0.02%)和C组(0.31%±0.02%),细胞GOLPH3、p-m TOR蛋白表达量较B、C组少,P均<0.05;B、C组间各指标比较,P均>0.05。结论沉默GOLPH3基因能抑制胃癌细胞增殖、促进胃癌细胞凋亡,其机制可能与下调m TOR信号通路中关键因子p-m TOR表达有关。

miR-126与靶基因GOLPH3在胃癌中的表达及其机制

目的探讨miR-126与靶基因GOLPH3在胃癌中的表达及潜在机制。方法选取45例胃癌患者和43例健康体检者为研究对象,qRT-PCR法检测患者和健康组血液中miR-126、GOLPH3、mTOR表达量;免疫组化法检测胃癌组织及癌旁正常胃组织GOLPH3、mTOR表达;分析检测指标与胃癌临床病理特征的关系。生物信息软件预测GOLPH3是miR-126潜在靶基因,利用双荧光素酶报告实验鉴定靶向关系。胃癌SGC7901细胞分组:转染miR-126过表达质粒(miR-126过表达组)、空质粒(空载组)、未转染(空白组),并检测miR-126过表达组GOLPH3表达量。结果癌患者血液中miR-126低于健康组,而GOLPH3、mTOR则高于健康组(P<0.05);癌组织中GOLPH3、mTOR表达均高于癌旁正常胃组织(P<0.05);所测指标与临床TNM分期、淋巴结转移均相关(P<0.05)。双荧光素酶报告实验提示GOLPH3是miR-126靶基因。miR-126过表达组GOLPH3表达量较空载组明显降低(P<0.01)。结论miR-126在胃癌中作为抑癌因子,部分是通过靶向调节GOLPH3发挥作用,并且可能介导mTOR相关通路参与肿瘤的进展。

慢病毒介导的GOLPH3基因沉默对人胃癌SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响

目的:通过体外实验探讨沉默高尔基体磷蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)基因对胃癌SGC-7901细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响。方法:将携带GOLPH3 shRNA的慢病毒载体转染SGC-7901细胞,建立稳定沉默GOLPH3的细胞株LV-GOLPH3-RNAi,分别用实时荧光定量PCR和Western blotting技术检测GOLPH3mRNA和蛋白的表达。MTT法检测细胞增殖力,Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞的迁移力和侵袭力。结果:稳定沉默GOLPH3的细胞株构建成功;GOLPH3 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与scrambled组和空白对照组相比,转染后LV-GOLPH3-RNAi组细胞的增殖力受到抑制(P<0.05),迁移力(56.7±1.5 vs 186.0±3.4、183.3±4.2,P<0.05)和侵袭力(33.5±3.0 vs 85.0±3.9、83.1±4.4,P<0.05)也明显受到抑制。结论:沉默GOLPH3基因的表达可抑制人胃癌SGC-7901细胞的增殖力、迁移力和侵袭力,提示GOLPH3有可能成为潜在的肿瘤标志物和独立的预后因子。

沉默GOLPH3基因表达逆转人结肠癌细胞顺铂耐药的研究

背景与目的:化疗是结肠癌的重要治疗方法之一,其方案常含有铂类药物,而化疗耐药会影响结肠癌疗效和预后,其发生机制与基因异常表达有关。高尔基磷酸化蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)是一个癌基因,在结肠癌组织中存在过表达,可促进结肠癌细胞的增殖,与预后不良相关。目前,GOLPH3基因的高表达与结肠癌对铂类耐药的相关性尚不明确。探讨沉默GOLPH3基因逆转人结肠癌HT29细胞对顺铂的化疗耐药效应和机制。方法:HT29细胞分为5组。①对照组:人结肠癌HT29细胞;②转染组:siRNA-GOLPH3转染HT29细胞;③实验组1:经顺铂处理的HT29细胞;④实验组2:经顺铂处理的siRNA-GOLPH3转染HT29细胞;⑤实验组3:经顺铂和细胞外调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated protein kinases,ERK)1/2抑制剂PD98059处理的HT29细胞。四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法、平板克隆形成实验检测各组结肠癌HT29细胞增殖及克隆形成能力。蛋白质印迹法(Westernblot)检测GOLPH3、P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、ERK1/2和pERK1/2蛋白的表达。结果:经顺铂处理后,实验组1、实验组2的细胞在波长490 nm处的吸光度(D)值均显著低于对照组(P<0.05),实验组2的D490值显著低于实验组1(P<0.001);实验组1和实验组2的细胞集落数均显著低于对照组(P<0.01),实验组2的细胞集落数显著低于实验组1(P<0.001)。实验组1的P-gp、GOLPH3、pERK1/2蛋白表达量显著高于实验组2(P<0.01);实验组3的P-gp蛋白表达量较实验组1显著降低(P<0.01)。结论:沉默GOLPH3基因可通过抑制丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(mitogen-activated protein kinase/extracellular signal-regulated kinase,MAPK/ERK)信号通路逆转HT29结肠癌细胞对顺铂化疗的耐药性。

非小细胞肺癌组织中miR-130a、GOLPH3表达变化及意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)癌组织中微小RNA(miR)-130a、高尔基磷蛋白3(GOLPH3)表达及临床意义。方法选取87例NSCLC患者为研究对象,应用荧光定量PCR检测NSCLC癌和癌旁组织中miR-130a、GOLPH3 mRNA表达;采用免疫组化法检测癌和癌旁组织中GOLPH3蛋白表达。采用Pearson线性相关分析miR-130a、GOLPH3 mRNA表达的相关性,统计分析miR-130a、GOLPH3 mRNA表达与患者临床病理参数的关系。采用Kaplan-Meier生存分析miR-130a、GOLPH3表达对NSCLC患者预后的影响,采用Cox回归分析影响NSCLC患者生存预后的危险因素。结果与癌旁组织相比,NSCLC癌组织中miR-130a表达较低,而GOLPH3 mRNA及蛋白表达较高(P均<0.05)。NSCLC癌组织中miR-130a表达与GOLPH3 mRNA表达呈负相关(r=-0.457,P<0.05)。miR-130a、GOLPH3 mRNA表达与肿瘤TNM分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)。miR-130a低表达、GOLPH3高表达的NSCLC患者3年生存率低于miR-130a高表达、GOLPH3低表达患者(P均<0.05)。TNM分期、淋巴结转移、miR-130a低表达及GOLPH3高表达是NSCLC患者不良预后的独立危险因素(P均<0.05)。结论NSCLC癌组织中miR-130a表达降低、GOLPH3表达升高,检测二者表达有助于NSCLC病情判断及预后评估。

GOLPH3促进前列腺癌细胞增殖和转移的机制研究

目的研究前列腺癌中新型高尔基相关蛋白GOLPH3的表达特性,并探索其在前列腺癌细胞中的功能作用和分子机制。方法采用定量PCR和Western blot方法检测前列腺癌细胞中GOLPH3表达情况。运用免疫组化法检测前列腺组织中GOLPH3的表达情况。采用CCK-8方法检测敲减GOLPH3后PC-3细胞增殖生长情况;使用Transwell方法检测敲减GOLPH3后PC-3细胞侵袭和迁移能力。Western blot方法检测敲减GOLPH3后PC-3细胞周期蛋白表达的变化;Western blot方法检测EGFRSrc和EGFR-Akt-mTOR信号通路中关键蛋白及其磷酸化在GOLPH3 RNAi及其阴性对照组细胞中的表达变化。结果 GOLPH3在前列腺癌细胞和组织不同程度表达。GOLPH3敲减后,PC-3细胞增殖和生长受到明显抑制作用(P<0.05),PC-3细胞穿过滤膜的细胞数明显减少(P<0.05)。GOLPH3基因沉默后PC-3细胞增殖和转移能力明显下降。GOLPH3敲减后,PC-3细胞在G2/M期出现了非常显著的阻滞,提示GOLPH3基因在G2/M期参与了PC-3细胞增殖周期过程;PC-3细胞中p21的表达明显上调,CDK1/2、cyclin B1表达明显下调,Akt和mTOR表达上调,p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K则下调;pEGFR、p-Src蛋白表达量显著降低,而EGFR、Akt、mTOR、Src、FAK、p-FAK、p70S6K蛋白表达量无明显变化。揭示阻断GOLPH3能抑制EGFR-Src信号通路的活化。结论 GOLPH3在前列腺癌细胞和组织中过量表达。GOLPH3在前列腺癌细胞增殖和转移过程中发挥重要作用。GOLPH3通过抑制p21,激活CDK1/2、cyclin B1等细胞周期蛋白和Akt-mTOR-p70S6K磷酸化来促进前列腺癌细胞增殖。GOLPH3能调控EGFR蛋白磷酸化及其下游Src蛋白磷酸化的表达。GOLPH3可能通过调控EGFR-Src信号通路及其底物MMP9影响前列腺癌的侵袭和转移。

GOLPH3与VEGF在肺腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)与血管内皮生长因子(VEGF)在肺腺癌中的表达及其临床意义。方法收集安徽医科大学无锡临床学院2015年1月至2017年6月进行手术治疗的66例肺腺癌患者的临床病理资料,分析GOLPH3及VEGF表达与临床病理资料及患者预后的关系。结果GOLPH3及VEGF在肺腺癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁组织(P<0.05)。Cox回归分析显示TNM分期(HR=2.110,95%CI:1.048~4.250,P<0.05)、VEGF高表达(HR=2.136,95%CI:1.039~4.391,P<0.05)及GOLPH3高表达(HR=2.239,95%CI:1.075~4.661,P<0.05)是影响患者生存率的独立危险因素。结论在肺腺癌中GOLPH3与VEGF高表达,可能促进了肿瘤的发展及转移,并且提示较差的预后。TNM分期、VEGF高表达及GOLPH3高表达是影响患者生存率的独立危险因素。

miR-9调控GOLPH3抑制食管癌EC109细胞的增殖和迁移

目的探讨微小RNA(microRNA,miRNA,miR)-9在食管癌中的表达水平及其对食管癌细胞生物学功能的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测食管癌患者癌组织及其癌旁组织中miR-9及高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)基因的表达水平;miR-9模拟物转染食管癌细胞系EC109,qRT-PCR检测miR-9的表达水平;MTT试验、平板克隆形成试验、Transwell迁移试验和流式细胞术检测过表达miR-9对EC109细胞生物学功能的影响。构建野生型和突变型GOLPH3双荧光素酶报告基因载体,并检测荧光素酶活性。qRT-PCR及western blot检测过表达miR-9后,GOLPH3mRNA和蛋白质的表达水平。结果与癌旁组织相比,食管癌组织中miR-9的表达水平明显降低(P<0.01),而GOLPH3基因表达水平明显升高(P<0.01)。与阴性对照组相比,miR-9模拟物转染后,食管癌EC109细胞中miR-9的表达水平明显升高(P<0.01),且细胞增殖和迁移能力明显降低(P<0.01),其细胞周期阻滞于G 2/M期(P<0.01)。双荧光素酶报告实验、qRT-PCR和western blot证实miR-9能与GOLPH3特异性结合(P<0.01),并介导GOLPH3mRNA的降解(P<0.01),且GOLPH3蛋白的表达水平降低(P<0.05)。结论miR-9在食管癌中呈低表达,并可通过调控GOLPH3参与食管癌的发生、发展。

GOLPH3沉默对顺铂诱导的人上皮性卵巢癌A2780/DDP细胞凋亡的影响

目的:探究GOLPH3对顺铂诱导的人上皮性卵巢癌A2780/DDP细胞凋亡的影响。方法:不同浓度顺铂处理A2780和A2780/DDP细胞72h,MTT检测半数抑制浓度IC50,Western blot检测GOLPH3的表达。将培养细胞分为4组:A2780组及A2780/DDP组(对照组、Scrambled siRNA组、GOLPH3 siRNA组)。40μmol/L顺铂处理48h后,MTT检测对细胞活性的影响,流式细胞术检测对细胞凋亡的影响,Western blot检测对Caspase-3、p-Akt和p-m TOR蛋白表达的影响。Western blot检测m TOR抑制剂雷帕霉素(Rapamycin)和PI3K/Akt抑制剂(LY294002)对Caspase-3蛋白表达的影响。结果:顺铂处理72h时,A2780和A2780/DDP细胞的IC50分别为9.8μmol/L和60.14μmol/L。与A2780组相比,A2780/DDP组GOLPH3蛋白表达明显增加(P<0.05)。GOLPH3 siRNA转染可显著下调A2780/DDP细胞中GOLPH3蛋白的表达(P<0.05)。顺铂处理后,与A2780/DDP对照组相比,A2780组和A2780/DDP细胞GOLPH3 siRNA转染组细胞活性显著降低,顺铂敏感性增加,细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达上调,p-Akt和p-m TOR蛋白表达下调;LY294002和Rapamycin处理均显著增加Caspase-3蛋白表达(P<0.05)。结论:GOLPH3沉默可通过抑制Akt/m TOR激活促进顺铂诱导的A2780/DDP细胞凋亡。

GOLPH3在胶质瘤中的研究进展

胶质瘤起源于神经胶质细胞,是最常见的颅内原发性肿瘤,其高发病率、高复发率及低治愈率一直困扰着广大临床医师。高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)是定位于反式高尔基体面上的一类基质蛋白,参与高尔基体对蛋白加工、运输等一系列生物学活动。作为一种新型癌基因,其在多种实体肿瘤,如胶质瘤中存在异常高表达,并通过一些信号通路或特定的蛋白调节胶质瘤细胞的生长与凋亡。随着国内外研究者对GOLPH3在胶质瘤生长过程中作用机制的不断探索,GOLPH3有望成为治疗胶质瘤的新靶点。

GOLPH3通过P-YB1途径抑制胶质瘤细胞侵袭和迁移

目的 探讨癌基因Golgi phosphoprotein 3（G）GoLPH3 shRNA with GFP tagged， 和对照质粒GoLPH3 shNC转入人胶质瘤U25l细胞中，western blot技术检测GoLPH3 ，GoLPH3 L,YB1,P-YB1蛋白表达，细胞划痕试验检测细胞迁移能力，Transwell侵袭实验检测细胞侵袭能力。结果 与对照组比较，转染GoLPH3 shRNA with GFP tagged质粒24 h后U25l细胞侵袭能力下降49％、迁移能力下降58％，差异均有统计学意义（P〈0.01）；转染GoLPH3 shRNA 可以明显降低YB1,P-YB1蛋白的表达。结论 下调GoLPH3可以通过降低YB1,P-YB1的表达，进而抑制胶质瘤细胞侵袭和迁移能力。

高尔基体磷蛋白3在肝细胞癌中的表达特点及其临床病理学意义

目的探讨高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)在肝细胞癌中的表达特点及其临床病理学意义。方法采用免疫组织化学方法检测132例肝细胞癌与配对的癌旁组织中GOLPH3蛋白的表达情况,分析肝细胞癌组织中GOLPH3表达水平与患者组织病理学特征的关系。利用激光共聚焦显微镜检测GOLPH3蛋白在肝细胞癌细胞的亚细胞定位。结果 GOLPH3在肝细胞癌组织中的阳性表达率为70.0%(92/132),在癌旁组织中为42.4%(56/132),GOLPH3在肝细胞癌组织中的表达水平明显高于其癌旁组织(P<0.001)。肝细胞癌组织中,GOLPH3高表达组门静脉癌栓的发生率为21.2%(14/66),而GOLPH3低表达组为6.1%(4/66),GOLPH3高表达组门静脉癌栓的发生率明显高于GOLPH3低表达组(P<0.05)。激光共聚焦免疫荧光结果显示GOLPH3主要存在于肝细胞癌细胞的细胞质中,且在细胞核内存在散在性分布。结论 GOLPH3可作为一种癌基因在肝细胞癌的发生发展中发挥重要作用。

高尔基磷蛋白3在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测高尔基磷蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)在人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织及癌旁肺组织中的表达,探讨GOLPH3表达与非小细胞肺癌临床病理特征及预后中的意义。方法:选取2004年2月至2006年2月在山东大学齐鲁医院胸外科行手术治疗的116例NSCLC患者组织标本及43例癌旁肺组织标本,采用免疫组化方法检测NSCLC组织和癌旁肺组织标本中GOLPH3蛋白表达水平,采用SPSS 13.0软件对数据进行统计学分析。结果:与癌旁肺组织相比,肺癌组织中GOLPH3蛋白的阳性表达率明显增高[57.8%(67/116)vs 28.0%(12/43),P<0.01]。NSCLC组织中GOLPH3蛋白表达水平在不同的年龄、性别、病理类型、肿瘤细胞分化程度、有无淋巴结转移及肿瘤浸润程度组间的差异均无统计学意义(P>0.05);单因素及多因素分析结果显示,GOLPH3蛋白高表达与患者不良预后有关。结论:GOLPH3蛋白高表达在NSCLC发生发展过程中起到重要作用,并与患者不良预后显著相关,可作为肺癌生物学特征和预后判断的参考指标之一。

高尔基体磷蛋白3在卵巢癌中的表达及临床意义

目的探讨高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)在卵巢癌中的表达及其与卵巢癌的临床病理特征和预后的关系。方法选取2007年1月至2012年1月在解放军第180医院行手术治疗的132例卵巢癌患者组织标本及80例卵巢良性肿瘤组织标本,用免疫组织化学法检测标本中GOLPH3的表达水平,并分析其表达量与卵巢癌临床病理参数的关系,同时采用Kaplan-Meier法分析GOLPH3的表达水平与患者生存时间的关系。结果卵巢癌中GOLPH3的阳性表达率为72.7%,高于卵巢良性肿瘤(38.8%),差异有统计学意义(P<0.05)。GOLPH3在Ⅲ期和Ⅳ期卵巢癌患者中的表达显著高于Ⅰ期和Ⅱ期患者,在高分化患者中的表达显著低于中低分化患者(P<0.05),而与年龄及有无淋巴结转移无关(P>0.05)。生存曲线显示GOLPH3低表达患者与高表达患者相比总生存期更长(P<0.05)。结论 GOLPH3在卵巢癌中高表达,其高表达可能提示肿瘤恶性程度高,患者生存时间短、预后差。

高尔基体磷蛋白3基因过表达对胃癌细胞增殖的影响

目的:观察高尔基体磷蛋白3(Golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)基因过表达后胃癌细胞增殖的情况.方法:构建GOLPH3基因过表达重组慢病毒颗粒pGC-FU-GOLPH3-EGFP,用慢病毒法感染胃癌细胞株SGC-7901,利用荧光显微镜(Axiovert200)观察感染后细胞内EGFP表达的情况,利用流式细胞技术检测慢病毒的感染效率,采用实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction)和蛋白质印迹(Western blot)技术分别在基因水平和蛋白水平检测GOLPH3在SGC-7901-GOLPH3组(感染pGC-FU-GOLPH3-EGFP质粒的SGC-7901)、SGC-7901-empty-vector组(感染pGC-FU-EGFP质粒的SGC-7901)和SGC-7901-blank组(未感染慢病毒的SGC-7901)的表达水平;以四唑蓝比色法(MTT)检测GOLPH3基因过表达后胃癌细胞增殖的情况;Western blot技术检测胃癌细胞SGC-7901稳转细胞株中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达水平.结果:建立了慢病毒感染率接近100%的胃癌细胞株SGC-7901,在体外能够长期稳定表达绿色荧光蛋白;SGC-7901-GOLPH3组GOLPH3mRNA和蛋白表达水平明显高于SGC-7901-e m p t y-v e c t o r组和S G C-7901-b l a n k组(均P<0.05);MTT法结果显示胃癌细胞GOLPH3基因过表达后,增殖能力明显增强,与SGC-7901-empty-vector组和SGC-7901-blank组相比差别有统计学意义(均P<0.05);SGC-7901-GOLPH3组、SGC-7901-empty-vector组和SGC-7901-blank组中mTOR总蛋白的表达无明显变化,而SGC-7901-GOLPH3组p-mTOR蛋白表达量较SGC-7901-empty-vector组和SGC-7901-blank组明显升高,与两对照组相比,上调GOLPH3能明显促进SGC-7901-GOLPH3组p-mTOR蛋白的表达(均P<0.05).结论:GOLPH3基因可能是通过上调mTOR信号通路中mTOR蛋白磷酸化水平来促进胃癌细胞增殖.

结肠癌微小RNA-126的表达情况及其与高尔基体磷酸化蛋白3的关系

目的探讨结肠癌微小RNA-126(miR-126)的表达情况及其与高尔基体磷酸化蛋白3(GOLPH3)的关系。方法选取10例结肠癌及相应正常结肠上皮组织标本,检测miR-126的表达水平。将miR-126的模拟物和阴性对照(N.C.)分别转染至HCT116细胞,48 h后检测细胞中GOLPH3 mRNA和蛋白的表达情况。采用生物学信息方法预测miR-126和GOLPH3是否在存在靶向作用关系。构建p-GOLPH3 3'-UTR和p-GOLPH3 3'-UTR mut两种报告基因质粒,与miR-126模拟物进行共转染结肠癌细胞HCT116,同时以未转染的HCT116细胞为空白对照,仅转染N.C.的HCT116细胞为阴性对照组,检测各组细胞的荧光强度。结果结肠癌组织中miR-126的相对表达水平低于相应正常结肠上皮组织(P<0.05),转染miR-126模拟物的结肠癌细胞HCT116的GOLPH3 mRNA及蛋白表达水平均低于转染N.C.的结肠癌细胞HCT116。生物信息学分析结果提示miR-126与GOLPH3存在靶向作用关系。与空白对照组及阴性对照组比较,p-GOLPH3-3'UTR组的荧光值降低(P<0.05),但p-GOLPH3-3'UTR mut组的荧光值变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论 miR-126在结肠癌组织中表达下调,其通过调控GOLPH3在结肠癌细胞中的表达可能是结肠癌的发病机制之一。

高尔基体磷蛋白3在结直肠癌组织中表达及其对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响

目的分析高尔基体磷蛋白3(GOLPH3)在结直肠癌组织中的表达情况,及其对结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响。方法收集术前未经放、化疗治疗,经手术切除患者的结直肠癌组织及其相应的癌旁组织(40例);采用免疫组织化学法检测组织中GOLPH3的表达,分析GOLPH3与结直肠癌临床病理特征的关系;构建稳定沉默GOLPH3的结直肠癌细胞株,并设立阴性对照组和空白对照组,Western blotting法检测3组细胞中GOLPH3蛋白的表达,MTT法检测3组细胞的增殖活性,Transwell实验分别检测3组细胞的侵袭和迁移能力。结果 GOLPH3在癌组织中主要为阳性表达,且阳性表达率(65.0%)显著高于癌旁组织(35.0%)(P<0.05);GOLPH3在TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、浸润深度≥2 cm、中低分化及有淋巴结转移的癌组织中的阳性表达率明显高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、浸润深度<2 cm、高分化及无淋巴结转移的癌组织(P<0.05)。与阴性对照组和空白对照组比,基因沉默组GOLPH3蛋白表达量、细胞增殖活性、侵袭能力及迁移能力均明显降低(P<0.05)。结论 GOLPH3在结直肠癌组织中高表达,其表达与肿瘤分期、侵袭深度、分化程度及淋巴结转移有关,抑制GOLPH3基因表达可下调GOLPH3蛋白表达,抑制结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移。

浸润性膀胱癌患者血清高尔基体磷酸化蛋白3和内皮生长因子水平与临床病理特征和术后生存率的关系研究

目的探讨血清血管内皮生长因子(VEGF)和高尔基体磷酸化蛋白3(GOLPH3)与浸润性膀胱癌患者临床病理特征及术后生存率的关系。方法110例MIBC患者(MIBC组)和90例健康体检人员(对照组),使用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清GOLPH3、VEGF水平,分析两种指标水平在不同MIBC临床病理特征的差异。根据受试者工作特征(ROC)曲线将MIBC患者分为高水平组和低水平组,分析不同血清GOLPH3、VEGF水平患者的生存率。结果MIBC组血清GOLPH3、VEGF水平高于对照组(P<0.05)。不同组织分化程度、初发和复发、有无淋巴结转移、有无血管淋巴浸润、不同肿瘤数量和肿瘤直径患者血清中GOLPH3、VEGF水平差异有统计学意义(P<0.05)。血清GOLPH3、VEGF低水平组术后36个月的生存率高于高水平组(P<0.05)。GOLPH3、VEGF与组织分化程度、初发和复发、淋巴结转移、血管淋巴浸润、肿瘤数量和大小呈正相关(P<0.05)。结论MIBC患者血清GOLPH3、VEGF水平升高,GOLPH3、VEGF水平与临床病理特征和术后生存率关系密切,检测血清GOLPH3、VEGF有助于评估MIBC患者的病情状况和术后生存率。

高尔基体磷蛋白3通过促进细胞自噬抑制紫杉醇诱导的hela细胞凋亡

目的探讨紫杉醇处理hela细胞时,高尔基体磷蛋白3(Golph3)对细胞自噬的调控和对紫杉醇引起的细胞凋亡的影响。方法通过慢病毒感染的方法上调hela细胞中Golph3的表达;通过转染siRNA方法下调hela细胞中Golph3的表达;使用透射电镜观察细胞中的自噬小体;免疫印记检测自噬标记物LC3II的蛋白表达水平;通过流式细胞仪检测细胞凋亡率;使用自噬抑制剂3-MA抑制hela细胞自噬。结果 Golph3慢病毒可上调hela细胞Golph3蛋白表达,siRNA可抑制hela细胞Golph3蛋白表达。透射电镜观察结果显示,Golph3过表达组细胞自噬小体的数量增多,siRNA组细胞自噬小体的数量减少。免疫印迹结果显示,Golph3组细胞中自噬标记物LC3II表达增强,p62表达减弱;siRNA组LC3II表达抑制,p62表达增强。凋亡检测结果显示,Golph3组紫杉醇诱导的细胞凋亡率下降(P<0.01),siRNA组细胞凋亡率上升(P<0.01)。自噬抑制剂3-MA单独处理不会显著增加hela细胞凋亡率。3-MA处理同时下调Golph3表达可以促进紫杉醇引起的细胞凋亡(P<0.01)。结论紫杉醇处理hela细胞时,上调Golph3促进hela细胞自噬,抑制细胞凋亡;下调Golph3抑制hela细胞自噬,促进细胞凋亡。Golph3通过调控细胞自噬影响紫杉醇引起的hela细胞凋亡。

高尔基磷酸化蛋白3在肿瘤中的研究进展

高尔基磷酸化蛋白3(golgi phosphoprotein 3,GOLPH3)具有典型的高尔基体结构,发挥着维持高尔基体正常形态结构和生理功能的重要作用。在多种肿瘤的研究中,GOLPH3均被证明呈高表达状态,与肿瘤的发生和转移密切相关。近年来随着研究的不断深入,成为肿瘤诊治的重要靶点,因此文章对高尔基磷酸化蛋白3在肿瘤中的研究进展进行综述。