异丙酚预处理对ARDS大鼠多器官Gq/11蛋白表达的影响及其保护作用的研究

目的探讨异丙酚预处理对急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)大鼠多器官Gq/11蛋白表达的影响及其保护作用。方法 24只雄性Wistar大鼠随机分为油酸组、预处理组和对照组。油酸组由大鼠尾静脉注射油酸0.2 ml/kg(2 min内)复制ARDS模型。预处理组经左颈静脉输注异丙酚80 mg.kg-1.h-1,30 min后再以相同方式注射油酸。对照组从尾静脉注射同剂量的生理盐水。测定各组大鼠平均动脉压(MABP)、血气、血浆和各器官乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)含量。免疫印迹法检测各器官Gq/11蛋白含量。结果油酸组和预处理组的pH、PaO2较对照组下降(P<0.05)。与对照组相比,油酸组血浆与肺、脑、心、肾、肝、小肠以及预处理组心、肾、小肠LDH活性明显升高(P<0.05)。预处理组血浆、肺、脑、心、肾、肝LDH活性较油酸组降低(P<0.05)。与对照组相比,油酸组血浆、肺、脑、心、肾、肝、小肠以及预处理组血浆、心、肾MDA含量明显升高(P<0.05)。预处理组血浆、肺、脑、心、肾、肝、小肠MDA含量较油酸组降低(P<0.05)。与对照组相比,油酸组和预处理组血浆、肺脏ACE活性明显降低(P<0.05),而肾脏、小肠ACE活性升高(P<0.05)。与油酸组比较,预处理组血浆ACE活性升高(P<0.05),肺脏、小肠ACE活性降低(P<0.05)。油酸组肺、脑、心、肾、肝、小肠以及预处理组肺、脑、心、肾、小肠中Gαq/11蛋白表达较对照组明显升高(P<0.05)。与油酸组比较,预处理组肺、脑、肾、肝中的Gαq/11蛋白表达有所降低(P<0.05),心、小肠的变化无明显差异(P>0.05)。结论异丙酚预处理能减轻ARDS时多器官损伤程度,其抑制Gq/11蛋白高表达变化可能是其保护途径之一。

异丙酚对急性呼吸窘迫综合征时肾Gq/11蛋白的干预作用

目的探讨异丙酚是否通过影响Gq/11蛋白的表达对肾脏起保护作用。方法采用尾静脉注射油酸(OA)法复制急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠模型。将健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C组)、OA组和异丙酚预处理组(P组),并观察血压及相关酶的变化。用蛋白质免疫印迹法检测肾脏中Gq/11蛋白含量。结果P组Gq/11蛋白含量(124.68±19.38)%较C组(100.00±0)%增加了(24.68±19.38)%(P<0.01),但明显低于OA组(149.34±20.04)%(P<0.01)。P组肾组织血管紧张素转换酶(16.52±1.37)μmol·min-·g-1、乳酸脱氢酶(1.20±0.16)kU/g活性和丙二醛(1.51±0.35)μmol/g含量也均明显低于OA组分别为(17.56±1.02)μmol·min-1·g-1,(1.41±0.16)kU/g,(1.94±0.16)μmol/g,P均<0.01。结论预先注射异丙酚能降低Gq/11蛋白在肾脏中的含量,并减轻ARDS时肾损害的程度。

实验性ARDS大鼠心脏Gq/11蛋白的动态变化

目的:观察急性呼吸窘迫综合征(ARDS)时大鼠心脏Gq/11蛋白的动态变化,从分子水平进一步阐明ARDS并发多器官功能障碍的发病机制。方法:选择雄性Wistar大鼠40只,采用尾静脉注射油酸(oleicacid,OA0.2ml/kg)法复制大鼠ARDS模型,并将其分为对照组(C组)和油酸组(OA组),又根据不同时限将其分为30、60、90、120min4个亚组,检测血气、平均动脉血压(MAP)、心功(LVSP、左室±dp/dtmax)、血浆及心肌MDA含量和LDH、CK活性;采用免疫印迹法检测心脏Gq/11蛋白含量。结果:OA组PaO2、MAP随着时间延长呈进行性降低(P<0.05～0.01),LVSP、左室±dp/dtmax逐渐降低,OA90、120min组显著低于C组(P<0.01)。OA组除30min外,血浆MDA含量、LDH活性均较C组明显升高(P<0.01),血浆CK活性从注射OA30min后开始增高(P<0.01)。OA各组心肌MDA含量、LDH活性较C组高,随时间延长呈升高趋势(P<0.05～0.01),心肌CK活性除OA30min组外均较C组高(P<0.01)。OA组除30min外,Gq/11蛋白含量随时间延长较C组分别高(24.72±24.05)%、(40.61±22.41)%、(50.84±24.49)%。形态学观察:OA30min组心肌间质轻度水肿,OA60min组有少量炎性细胞浸润,部分心肌细胞溶解、坏死,OA90、120min组出现较多炎性细胞浸润。

Gq/11蛋白在ARDS时大鼠肺损伤中的动态变化

目的研究急性呼吸窘迫综合征(ARDS)时大鼠肺Gq/11蛋白的动态变化。方法采用尾静脉注射油酸法复制大鼠ARDS模型,并将其分为对照组(C组)和油酸组(OA组),又根据不同时限将其分为30min、60min、90min和120min4个亚组;紫外法测定血管紧张肽转化酶(ACE)活性,免疫印迹法检测各组大鼠肺组织中的Gq/11蛋白含量。结果OA各组随时间延长Gq/11蛋白含量较C组分别高(19.24±2.38)%、(35.12±2.01)%、(43.93±1.62)%、(48.63±1.88)%(P<0.01),OA组除了30min组其它各组血浆及肺组织的ACE活性显著低于C组,并随着时间延长而更低(P<0.01)。结论Gq/11蛋白的表达上调在ARDS肺损伤中可能占有一定地位,并参与ARDS的发生发展。

Gq/11蛋白在缺血再灌注和缺血预处理中的作用

刺激血管紧张素Ⅱ（ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎⅡ，ＡｎｇⅡ）、血栓素Ａ２等多种细胞膜受体，可激活Ｇｑ／１１蛋白。通过增加磷脂酶Ｃ（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＣ，ＰＬＣ）活性，产生细胞内信使三磷酸肌醇和二脂酰甘油。三磷酸肌醇可促进细胞内储存的钙释放，二脂酰甘...

实验性ARDS大鼠小肠Gq／11蛋白的动态变化

目的:观察Gq/11蛋白在急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)大鼠肠损伤中的变化. 方法:采用尾静脉注射油酸法复制大鼠ARDS模型,根据观测时限再将油酸组分为30 min,60min,901min,120 min 4个组,免疫印迹法检测小肠粘膜中Gq/11蛋白含量,测定血浆、小肠组织匀浆ACE、LDH活性和MDA含量.

中药活性成分对M_1受体及其偶联G_(q/11α)的影响

目的 :观察 ZMA ,QST,QT对 M1 受体及其偶联 G-蛋白结合功能的影响。方法 :以 CH Om 1细胞为模型在使用不同药时 ,用放射配基结合分析法检测 M1 受体密度 ,以非 GTP ase水解的 [35 S] GTPγS与 G-蛋白的不可逆结合检测 G-蛋白的结合活性 ,并计算偶联比率 ;以 Western blot方法检测 Gq/1 1α的量。结果 :ZMA10 - 5 m ol/L 及 QST10 - 5 m ol/L 能够提高M1 受体、M1 受体偶联的 G-蛋白的活性。并改善其偶联比率。Q ST10 - 5 m ol/L 还能够提高 Gq/1 1α的量。结论 :ZMA和 QST作用机理可能不同 :ZMA促进偶联的机理很可能主要是提高 M1 受体后 G -蛋白的结合活性提高 ,并且改善 M1 受体和Gq/1 1α的偶联。Q ST可能还与促进 Gq/1 1α合成有关。

实验性急性呼吸窘迫综合征大鼠脑组织Gq蛋白-肌醇磷脂途径的变化

目的:探讨急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠脑组织中Gq蛋白-肌醇磷脂途径的变化及其作用。方法:健康雄性40只Wistar大鼠随机分为油酸组(OA组)和对照组。OA组由大鼠尾静脉注射OA 0.2 mL/kg(2 min内)复制ARDS模型,根据不同观测时点分为30 min、60 min、90 min和120 min 4个亚组。检测各组大鼠平均动脉血压(MABP),血气,血浆和脑组织丙二醛含量及乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)活性。免疫印迹法检测各组大鼠脑组织中的Gq/11蛋白α活性亚基以及磷脂酶C(PLC)含量。结果:与对照组相比,OA组MABP、PaO2明显降低(P<0.05)。OA90 min和120 min组血浆和脑组织的MDA含量和LDH活性明显升高(P<0.05)。OA组血浆CK活性较对照组明显升高(P<0.05),脑组织CK活性在OA 60 min组升高(P<0.05),随后在90 min和120 min组降低(P<0.05)。脑组织Gαq/11蛋白在OA60 min、90 min和120 min组明显升高(P<0.05)。OA组脑组织PLC表达明显上调(P<0.05)。脑组织Gαq/11蛋白表达与PaO2的改变呈负相关(r=-0.579,P<0.05),与脑组织MDA变化呈正相关(r=0.538,P<0.05),与脑组织LDH的变化亦呈正相关(r=0.624,P<0.05)。结论:ARDS时Gq蛋白-肌醇磷脂信号通路活性增强可能参与了脑组织的损伤。

急性呼吸窘迫综合征大鼠多器官中Gq／11蛋白表达的变化及意义

目的 探讨急性呼吸窘迫综合征（ARDS）大鼠肺、脑、心、肾、肝、小肠中Gq/11蛋白表达及作用.方法 40只Wistar大鼠按随机数字表法分为5组,每组8只.由大鼠尾静脉注射油酸（OA）0.2 ml/kg复制ARDS模型,对照组从尾静脉注射等量生理盐水.模型组分别于制模后30、60、90和120 min检测血浆和各器官中乳酸脱氢酶（LDH）、丙二醛（MDA）、血管紧张素转换酶（ACE）;蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测各器官中Gq/11蛋白α活性亚基Gαq/11蛋白表达.结果 与对照组相比,LDH活性于30 min后在血浆和心呈进行性升高[血浆（kU/L）：9.69±1.66比6.27±1.70,心（kU/g）：0.81±0.12比0.59±0.09],60 min后在肺、脑、肾、小肠呈进行性升高[肺（kU/g）：1.15±0.19比0.87±0.11,脑（kU/g）：2.27±0.37比1.53±0.61,肾（kU/g）：1.13±0.26比0.64±0.09,小肠（kU/g）：0.72±0.10比0.60±0.13],90 min后在肝（kU/g）呈进行性升高（0.50±0.14比0.39±0.05,P〈0.05或P〈0.01）;MDA含量于30 min后在心（μmol/g）呈进行性升高（2.20±0.47比1.45±0.27）,60 min后在血浆、肺、肾呈进行性升高[血浆（μmol/L）：3.10±0.58比2.33±0.35,肺（μmol/g）：5.56±1.30比2.05±0.52,肾（μmol/g）：1.61±0.27比0.98±0.42],90 min后在脑、肝、小肠呈进行性升高[脑（μmol/g）：6.78±1.38比5.83±1.58,肝（μmol/g）：2.58±0.68比2.11±0.42,小肠（μmol/g）：2.14±0.51比0.81±0.26,P〈0.05或P〈0.01];ACE活性于60 min后在血浆和肺呈进行性降低[血浆（μmol·min-1·L^-1）：15.47±1.68比19.87±3.11,肺（μmol·min^-1·g^-1）：20.61±1.81比26.26±1.93],在肾（μmol·min-1·g^-1）呈进行性升高（15.92±1.20比13.67±2.26）,90 min后在小肠（μmol·min-1·g-1）呈进行性升高（4.42±0.34比3.29±0.24,均P〈0.01）;Gαq/11蛋白表达于30 min后在肺、小肠呈进行性升高[肺：（119.24±2.38）%比（100.00±18.74）%,小肠：（138.91±23.03）%比（100.00±19.43）%],60 min后在脑、心、肾呈进行性升高[脑：（141.85±33.82）%比（100.00±16.81）%,心：（124.72±24.05）%比（100.00±16.04）%,肾：（123.98±25.74）%比（100.00±8.50）%],90 min后在肝呈进行性升高[（134.34±19.14）%比（100.00±13.04）%,P〈0.05或P〈0.01].Gαq/11蛋白表达与各器官中LDH的变化呈正相关（r=0.584,P〈0.05）.结论 ARDS过程中肺、脑、心、肾、肝、小肠中Gq/11蛋白表达有不同程度上调,引发肌醇磷脂信号转导通路活性异常,参与了各器官的损伤发生.

神经递质调节M电流的机制

M通道是神经系统广泛分布的一种电压依赖性钾离子通道,该通道在神经元阈电位附近激活,产生M电流。中枢许多神经递质和激素通过Gq/11偶联膜受体可以调节M电流,影响神经兴奋性、神经传导和神经递质释放。本文针对受体激活后下游信号转导途径,从G蛋白、细胞内钙、膜磷脂、磷酸激酶等4个方面,对M电流的调节作一综述。

实验性急性肺损伤大鼠脑组织中Gq／11蛋白的动态变化

目的观察急性肺损伤（acute lungin iury，ALI）大鼠脑组织中Gq／11蛋白的动态改变，从分子水平研究油酸（0A）性ALI导致脑损伤以及ALI导致多器官功能障碍综合征的可能机制，为ALI和多器官功能障碍综合征的发病机制提供实验和理论依据。方法用尾静脉注射OA法复制ALI大鼠模型，将40只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组（C组）和实验组（OA组），OA组又根据不同时限将其分为30min、60min、90min和120min4个亚组。观察检测各组大鼠血气（pH、Pa02、PaCO2）、平均动脉压（MABP）、血浆及脑组织乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）。免疫印迹法检测各组大鼠脑组织中的Gq／11蛋白含量。结果Gq／11蛋白含量：除OA30min组外，其余OA各组随着时间延长较C组分别增加至（141．85±33．82）％、（165．84±30．27）％、（174．31±32．52）％（P〈0．01）。除OA30min组外，其余OA各组血浆MDA含量均较C组升高（P〈0．01）；OA30min组和OA60min组脑组织MDA含量与C组比较差异无统计学意义，OA 90min组和OA 120min组脑组织MDA含量较C组升高（P〈0．01）。OA各组血浆LDH活性均较C组升高（P〈0．01）；除OA30min组外，其余OA各组脑组织LDH活性均较C组升高（P〈0．01）。脑组织CK活性在60min时达到峰值（P〈0．01），以后呈下降趋势。结论ALI可导致远隔器官脑的损伤，引起细胞信号转导功能异常和脑代谢及形态的变化，Gq／11蛋白的高表达变化可能参与了ALI过程及脑损害的病理性信号转导。

异丙酚预处理对急性肺损伤脑组织Gq／11蛋白表达的干预作用

目的观察异丙酚预处理后Gq／11蛋白在急性肺损伤（acute lung injury，ALI）大鼠脑组织中的动态变化，探讨异丙酚是否通过影响Gq／11蛋白的表达对脑组织起保护作用。方法用尾静脉注射油酸法复制ALI大鼠模型，将24只健康雄性Wistar大鼠随机分为对照组、ALI组和异丙酚预处理组。检测各组大鼠血气（pH值、PaO2、PaCO2）、平均动脉血压（MABP）以及血浆和脑组织乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、丙二醛（MDA）。Western blot检测各组大鼠脑组织中的Gq／11蛋白含量。结果异丙酚预处理组Gq／11蛋白含量为（133．89±21．59）％，较对照组增加（33．89±21．59）％（P〈0．01），但低于ALI组[（165．84±30．27）％，P〈0．053。异丙酚预处理组及ALI组PaO2较对照组明显降低（P值均〈0．01），但异丙酚预处理组高于ALI组（P〈0．01）。异丙酚预处理组及ALI组MABP均较对照组降低（P值均〈0．01），异丙酚预处理组低于ALI组（P〈0．01）。异丙酚预处理组脑组织LDH和CK活性分别为（1．51±0．58）U／mg、（35．83±7．09）U／mg，MDA含量为（4．70±1．59）U／mg，均低于AI。I组[分别为（2．38±0．72）U／mg（P〈0．01），（44．31±8．15）U／mg（P〈0．01），（6．78±1．38）U／mg（P〈0．05）]。血浆LDH和CK活性、MDA含量呈现与之相似的变化趋势。结论异丙酚预处理能减轻ALI时脑的损伤程度，其保护作用可能与下调Gq／11蛋白有关。

急性肺损伤时大鼠肝脏Oαq／11蛋白的动态变化

Gαq／11亚单位作为Gq／11蛋白的活性亚基，可与多种激素、肽类及炎性介质的受体耦联，通过肌醇磷脂信号转导系统等启动多级信号调控^[1]。本研究采用油酸致急性肺损伤（ALI）模型观测肝脏Gαq／11亚单位的动态变化及肝脏结构与功能的改变，探讨肌醇磷脂信号转导系统与ALI发生、发展的关系。