痰标本革兰染色联合肺炎链球菌抗原检测快速诊断肺炎链球菌性肺炎

目的:探讨肺炎链球菌抗原快速检测联合痰涂片革兰染色在肺炎链球菌肺炎感染中的临床应用价值。方法:收集临床痰液标本分离得到的草绿色链球菌群、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、嗜麦芽窄食单胞菌、流感嗜血杆菌及卡他莫拉菌共8种细菌各5株,肺炎链球菌培养阳性的痰液标本30例及痰涂片镜下疑似肺炎链球菌且合格的痰液标本40例,利用BinaxNOW试剂盒进行胶体金法肺炎链球菌抗原检测。结果:痰标本中分离得到的8种细菌经抗原检测结果均为阴性;胶体金法检测30例肺炎链球菌培养阳性的痰液标本阳性率为100%;痰涂片联合抗原快速检测阳性率高于痰培养,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:痰液肺炎链球菌抗原检测法具有较好的特异性,与痰培养结果有较好的一致性,且痰涂片革兰染色联合抗原快速检测在早期鉴定肺炎链球菌肺部感染中具有较高的临床应用价值。

基于深度学习构建金黄色葡萄球菌和粪肠球菌的快速图像识别系统

目的基于GoogleNet、ResNet101和Vgg193种深度学习模型,对血流感染病原菌(金黄色葡萄球菌、粪肠球菌)进行高置信度的识别,比较模型间的性能与分类能力,探讨深度学习模型对血流感染病原菌快速识别的应用可行性。方法将革兰染色及摄像预处理后的细菌图像和空白对照图像输入模型,进行训练与验证,共采集1682张金黄色葡萄球菌、1723张粪肠球菌和688张空白对照显微图像,对其中1344张金黄色葡萄球菌、1376张粪肠球菌和544张空白对照图像进行训练,余下的图像用于验证。根据模型间的分类参数评估出性能最佳的模型。结果ResNet101模型识别三类验证集图像的交叉熵损失值(0.0087103)最低,Epoch值(93)最大且准确率(99%)最高;GoogleNet模型识别三类验证集图像的交叉熵损失值为0.06389,Epoch值为86,准确率为98.6%;Vgg19模型识别三类验证集图像的交叉熵损失值为0.035682,Epoch值为86,准确率为97.7%。结论ResNet101模型在对三类验证集图像的分类上性能最佳;深度学习模型可对金黄色葡萄球菌和粪肠球菌的革兰染色图像进行准确、可信的快速识别。

比较细菌培养法与革兰染色法在阴道细菌检验中的应用分析

目的:对比细菌培养法与革兰染色法在阴道细菌检验中的应用价值。方法:选取2021年10月-2022年10月佛山市第三人民医院就诊的120例细菌性阴道炎疑似患者进行研究,所有患者均经细菌培养法和革兰染色法行细菌检验,对比两种方式不同类型阴道细菌阳性检出率,以Amsel临床诊断标准为“金标准”,对比两种方式疾病诊断价值和不同致病菌检出率,另对比两种方式检查时间和满意度情况。结果:细菌培养法诊断阴道细菌的灵敏度为95.65%、特异度为82.14%、准确性为92.50%,阳性预测值为94.62%,阴性预测值为85.19%,革兰染色法诊断阴道细菌的灵敏度、特异度、准确性、阳性预测值和阴性预测值分别为83.70%、50.00%、75.83%、84.62%和48.28%,差异有统计学意义(P<0.05);细菌培养法对加特纳菌、棒状杆菌和肠球菌的检出率明显高于革兰染色法,差异有统计学意义(χ^(2)=6.628、4.694、7.336,P<0.05);细菌培养法检查时间为(4.21±1.18)h,长于革兰染色法的(0.44±0.08)h,差异有统计学意义(t=34.918,P<0.05);患者满意度高于革兰染色法,差异有统计学意义(Z=2.422,P<0.05)。结论:与革兰染色法比较,细菌培养法可准确诊断不同类型阴道细菌,灵敏度和特异度都比较强,患者更为满意。但前者耗时短,能够快速获得诊断结果,可根据临床需求合理选择检验方式。

24 h卫星血培养可改进急诊病原微生物培养流程

目的 分析24 h卫星血培养对急诊微生物实验室血培养工作流程的影响。方法 收集2020年6月1日—2021年5月31日(第1阶段)和2021年6月1日-2022年5月31日(第2阶段)复旦大学附属中山医院设置卫星血培养前(18 208套)、后(2 810套)相关实验室数据,比较设置卫星血培养前后转运时间(TTI)、报阳时间(TTP)、革兰染色时间(TTG)、最终报告时间[样本周转时间(TAT)]的差异。结果 设置卫星血培养前、后阳性率分别为6.29%(1 146/18 208套)和9.57%(269/2 810套),差异有统计学意义(P<0.001)。在全时段、工作时段和非工作时段,设置卫星血培养后TTI、TTP和TAT均短于设置前(P<0.05),尤其是非工作时段,分别缩短3.78、7.76和16.18 h。设置卫星血培养后,肠杆菌目细菌和葡萄球菌的TTP分别较设置前缩短1.93(P=0.014)和6.59 h(P<0.001),肠杆菌目细菌和肠球菌的TAT分别缩短8.13和6.53 h(P<0.05)。结论 设置卫星血培养可显著提高血培养阳性率,缩短TTI、TTP,进而缩短TAT,实现血培养的流程优化。

BOPPPS教学模式在微生物学与免疫学实验中的应用

微生物学与免疫学是医学院校多个专业的基础必修课,而微生物学与免疫学实验课程作为理论课的延伸,在促进理论知识掌握的同时,也锻炼了学生的专业实践能力,是培养创新型应用人才的重要环节。BOPPPS教学模式强调学生在课堂中的主动角色,秉持“以学为中心”的教学理念,围绕“参与式互动学习”的核心,引导学生进行探究式学习。本文结合微生物学与免疫学实验课程定位与目标,分析传统实验教学模式和BOPPPS教学模式的特点,以综合性实验“咽部细菌的革兰染色与药敏试验”为例,探索BOPPPS模式在实验教学中的具体应用模式,以期为提高微生物学与免疫学及相关课程的实验教学质量提供参考。

无菌鼠细菌检测方法的选择与探讨

目的 比较培养法、革兰染色镜检法和16S rRNA PCR方法对无菌小鼠粪便样品细菌检测的检测性能,为无菌鼠细菌检测方法的选择提供依据。方法 利用培养法、革兰染色镜检法、16S rRNA PCR方法,分别检测GF小鼠粪便、SPF小鼠粪便以及已知含菌量的测试样品(无菌小鼠粪便与金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌混合,人为制作而成),验证3种方法对无菌小鼠粪便中细菌的检测限度;并同时使用3种方法检测临床样品,对比3种检测方法的优缺点,分析3种方法在实际检测中的可行性。结果 培养法、革兰染色镜检法和16S rRNA PCR方法检测灵敏度分别为102CFU/g、108CFU/g和106CFU/g,临床样品检测中阳性率均为1.36%(6/441)。结论 培养法、革兰染色镜检法、16S rRNA PCR法3种检测方法各有优缺点,需要联合使用,取长补短,确保检测结果的可靠。

复发性口腔溃疡口腔菌群微生态变化及其临床意义初探

目的探讨复发性口腔溃疡(ROU)与口腔内菌群变化,为临床ROU防治提供可借鉴依据。方法收集2020年6月~2021年5月在某院就诊的130例ROU患者,按病情发展阶段分为溃疡组(65例)、愈合组(65例),并纳入同期65例体检健康者为对照组。检测并比较革兰阳性球菌(G^(+)c)、革兰阴性球菌(G^(-)c)、革兰阳性杆菌(G^(+)b)、革兰阴性杆菌(G^(-)b)及球菌、直杆菌、梭状菌、丝状菌、弯曲菌、螺旋体百分比在三组的差异。结果三组G^(-)c、球菌、直杆菌和梭状菌百分比比较,差异有统计学意义(P<0.05);组间两两比较结果显示:溃疡组和愈合组G^(-)c百分比显著低于对照组(P<0.05),溃疡组G^(-)c百分比显著低于愈合组(P<0.05);溃疡组球菌百分比显著低于对照组和愈合组(P<0.05),溃疡组直杆菌百分比显著高于对照组(P<0.05),溃疡组梭状菌百分比显著高于对照组和愈合组(P<0.05)。结论微生物菌群变化可能与ROU发病及预后有一定关联,临床上应重视口腔微生态平衡在ROU治疗中的作用。

尿沉渣革兰染色镜检在尿路感染诊断中的价值

目的:研究尿沉渣革兰染色镜检对尿路感染的诊断价值。方法:分析2021年8月-2021年12月632例送检清洁中段尿培养的门诊及住院患者结果,以临床诊断作为金标准,分析尿沉渣革兰染色镜检对尿路感染的诊断性能。结果:632例患者标本中尿培养阳性218例(34.5%),尿路感染最常见的病原菌为大肠埃希菌,其次为肠球菌属和葡萄球菌属。白细胞、菌量、尿培养的诊断比值比均大于1,白细胞的诊断比值比最高,菌量和尿培养的诊断比值比近似。以白细胞少量为诊断尿路感染的阈值,灵敏度和特异度均较高(分别为88%,79%),约登指数最大(0.67),诊断比值比最高(29.20)。尿沉渣革兰染色镜检观察到的病原菌形态学特征与培养结果一致。结论:尿沉渣革兰染色镜检作为一种快速筛查实验,在尿路感染诊断中具有较高临床价值。

细菌培养与涂片镜检在微生物检验中的临床应用价值研究

探究细菌培养与涂片镜检在微生物检验中的临床应用价值。选取2023年1月—2023年10月北海市第二人民医院检验科收集的100份微生物检验标本,先进行涂片镜检,再进行细菌培养,对比单一涂片镜检(单一组)和涂片镜检联合细菌培养(联合组)的微生物检出率。金标准检查结果显示,100份标本中均存在微生物,主要包括阳性球菌、阴性杆菌以及真菌;单一组和联合组痰液标本、尿液标本、胸腔积液标本的诊断符合率比较,无统计学差异(P>0.05);单一组和联合组的微生物类型检出符合率比较,无统计学差异(P>0.05)。研究发现,涂片镜检和细菌培养在微生物检验中均存在较高的临床应用价值,能够鉴别微生物具体类型,建议两种方法联合应用,并将涂片镜检作为首选方案。

革兰氏染色三步法应用试验探讨

为了提高革兰氏染色实验的教学效果,应用革兰氏染色三步法,探讨了菌龄、涂片厚度、媒染时间和脱色、复染时间对染色结果的影响,并进行了革兰氏染色三步法与四步法的比较试验。获得正确染色结果的条件为:首先将大肠杆菌、枯草芽胞杆菌和金色葡萄球菌在琼脂斜面培养基上分别培养22～25 h、13～17 h和18～24 h;其次是做涂片时,取菌量要少于1/3环,涂菌稀薄、均匀;最后是染色。而染色的第1步是用结晶紫初染60 s;再用碘液媒染60～90 s;第3步用碱性品红乙醇溶液脱色、复染60～120 s。革兰氏染色三步法,基本原理没有改变,只是将四步法中乙醇退色和番红复染的两步合并在一步中进行,从而达到减少操作,提高效率的目的。

影响革兰氏染色结果的原因分析

为了提高革兰氏染色实验的教学效果,应用革兰氏染色法,探讨了菌种的菌龄、细菌涂片厚度、碘液媒染时间和乙醇脱色时间对革兰氏染色结果的影响。实验结果表明获得正确染色结果的条件为:首先将大肠杆菌、枯草芽胞杆菌和金色葡萄球菌在琼脂斜面培养基上分别培养22～25h、13～17h和18～24h;然后是制作细菌涂片时,取菌量要少于1/3环,涂菌稀薄、均匀;最后是染色。染色的第一步是用草酸铵结晶紫初染60s,再用碘液媒染60s,最后乙醇脱色时间是关键,应严格控制在30～45s为宜。只有控制好影响革兰氏染色结果的各个环节,才能得到正确的染色结果。

微生物学实验中革兰氏染色两种方法的比较

对革兰氏染色三步法和四步法进行了试验比较,发现三步法染色过程操作简单,脱色时间易于掌握,便于学生操作和控制,且染色效果较好,明显提高了实验效率,值得在教学中推广使用。

阴道分泌物干化学法检测在常见阴道疾病诊断中的应用

目的探讨阴道分泌物干化学法检测在常见阴道疾病诊断中的应用。方法选取初诊阴道炎患者1800例,采用干化学法检测阴道分泌物5种酶学指标[脯氨酸氨基肽酶(PIP)、唾液酸苷酶(SNA)、凝固酶(COA)、乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)和葡萄糖苷酶(GUS)],并同时进行阴道分泌物涂片革兰染色镜检。结果以革兰染色镜检法结果为标准,干化学法在细菌性阴道病(BV)、外阴阴道假丝酵母菌病和滴虫性阴道炎诊断中的敏感性分别为45.39%、44.68%和92.31%,特异性分别为97.14%、85.70%和96.20%;阳性预测值分别为88.18%、36.73%和34.95%,阴性预测值分别为79.12%、89.29%和99.82%;符合率分别为80.61%、79.28%和96.11%,不符合率分别为19.39%、20.72%和3.89%。1 800例患者阴道分泌物干化学法检测BV的阳性率低于革兰染色镜检法(χ2=515.24,P<0.001);干化学法检测外阴阴道假丝酵母菌病、滴虫性阴道炎的阳性率均高于革兰染色镜检法(χ2值分别为142.36、537.70,P<0.001)。结论目前尚不能用干化学法完全替代革兰染色镜检法,需充分利用2种方法的各自优势,以提高临床检测结果的准确性。

阴道分泌物真菌感染5种检测方法比较

目的比较分析用于检出阴道分泌物中真菌的5种检测方法,从中选择出诊断真菌感染性阴道炎的灵敏度、特异度较好,同时快速、经济、简单的实验方案。方法选取2016年5-8月在该院妇科进行阴道分泌物检测的患者共442例,对442例标本同时进行真菌培养法、盐水KOH悬浮法、革兰染色、瑞氏染色、全自动六联5种方法检测,其中真菌培养为金标准,来评价其他4种方法的特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值、准确性。结果真菌培养法检测442例阴道分泌物标本,真菌感染的阳性率为34.8%(154/442)。与真菌培养法比较,4种检测方法的特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值、准确性分别为盐水KOH悬浮法97.9%、64.9%、83.9%、94.3%、86.4%;革兰染色96.5%、83.1%、91.4%、92.7%、91.8%;全自动六联检测84.7%、46.8%、74.8%、62.0%、71.5%;瑞氏染色96.9%、78.6%、89.4%、93.1%、90.5%。结论革兰染色灵敏度、特异度、准确度在4种检测方法中最高,是对临床送检阴道分泌物标本进行真菌检测的特异、灵敏、快速、经济、简单的检测方案,临床工作中如采用其他方法检测阴道分泌物中真菌,可同时结合革兰染色法以提高其准确度。

革兰氏染色三步法与质量控制

革兰氏染色(Gram stain),是细菌学中一个经常使用和十分重要的方法,自从1884年微生物学家Gram氏发明著名的革兰氏染色法以后,100多年来虽然经过后来学者的几次改进,但都仍然沿用着Gram氏原来的四步法,基本原理也没有改变。最近Allen氏对Ziehl-Neelsen抗酸菌染色法的改进,是一个良好的启示,使我们开始了革兰氏染色三步法的研究并取得了成功。现将我们建立的革兰氏染色三步法与质量控制报告如下。 1 材料和方法 1.1 结晶紫染色液 甲液:结晶紫2g;95％乙醇20ml。 乙液:草酸铵0.8g;蒸馏水80ml。 甲乙二液先分别溶解,然后混合在一起,过滤除去残渣后装入滴瓶中备用。

马尔尼菲青霉菌感染病例报告

目的 探讨马尔尼菲青霉菌的鉴定及临床表现 ,为早期诊断、治疗提供经验 ,降低死亡率。方法 取淋巴结穿刺液、血液进行真菌培养鉴定。结果 氢氧化钠涂片和革兰染色能检出马尔尼菲青霉菌所特有的孢子。结论 氢氧化钠涂片和革兰染色能早期发现真菌孢子 ,是一种快速、可行的方法 ,此外 ,组织病理学也可作为诊断马尔尼菲青霉病的一种很重要的方法 ,但需做过碘酸雪夫染色与荚膜组织胞浆菌病作鉴别。

猪接触传染性胸膜肺炎的诊治

采用冰冻切片,H.E染色,支气管分泌物涂片,Gram染色,对临床自然发病猪的支气管分泌物、肺脏、肝脏、脾脏和淋巴结进行了细菌学和组织病理学观察。结果表明:在支气管分泌物涂片中含有大量呈革兰氏阴性的胸膜肺炎放线杆菌;肝脏淤血,肺组织坏死、出血、显著纤维化及嗜中性粒细胞和巨噬细胞浸润;脾脏呈坏死性脾炎变化,淋巴结呈出血性淋巴结炎变化。根据细菌学检查和组织病理学观察结果诊断为猪接触传染性胸膜肺炎,同时筛选出抗菌王为临床治疗该病的首选药物。

尿沉渣涂片革兰染色对细菌性泌尿道感染的检测效能

目的探讨中段尿沉渣涂片革兰染色镜检在细菌性泌尿道感染中的作用。方法对临床送检的298例中段尿标本分别进行定量细菌培养和尿沉渣涂片革兰染色镜检,对两种方法进行分析比较;收集上述标本的221例尿常规检测结果并与细菌培养、尿沉渣涂片革兰染色镜检结果作分析比较。结果尿沉渣涂片革兰染色镜检与细菌培养符合率为93.3%。与尿常规相比,尿沉渣涂片革兰染色镜检灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值均高,灵敏度是91.9%,特异度是94.1%,阳性预测值为90.2%,阴性预测值为95.1%。结论尿沉渣涂片革兰染色镜检在检测尿液病原菌感染时有较高的灵敏度和特异度,高于尿常规白细胞检查,能在较短的时间内给临床提供检验信息,可作为泌尿道感染的快速筛查方法。

A^2/O工艺强化反硝化除磷体系中微生物特性分析

为了更直观地认识反硝化除磷体系中生物脱氮除磷机理及运行状态,本文尝试了对A2/O工艺强化反硝化除磷体系在稳定运行期的活性污泥采取直接染色的手段,观察聚-β羟基丁酸(PHB)和聚磷酸盐(Poly-P)的沿程变化状况,同时结合活性污泥的电镜扫描图像,考察该系统的微生物菌群特征.试验结果表明,在厌氧阶段,微生物细胞内PHB的量大幅提高,上清液中磷酸盐的含量上升,聚磷酸盐含量明显下降,粒径为1~1.5μm、呈球状和棒状的菌群构成的葡萄状细胞簇占居优势;在缺氧阶段,微生物细胞内PHB的量下降,上清液中磷酸盐含量下降,聚磷酸盐含量上升,粒径为0.5~1μm的椭球菌与1.0~1.5μm的球杆菌占优势;在好氧阶段,微生物细胞内PHB的量较低或接近零,上清液中磷酸盐的含量接近零,聚磷酸盐含量明显上升,此时粒径1.0~1.5μm的球菌以单个或成对出现,球菌不再饱满,呈现接近消失的状态.相比之下,单纯的脱氮系统则不存在上述微生物特性的变化.

微生物教学实验中菌株革兰氏染色反应快速判定

依据荧光标记的凝集素能够与革兰氏阳性菌细胞壁肽聚糖中的N-乙酰葡糖胺结合,却无法透过革兰氏阴性菌的细胞壁外膜与革兰氏阴性菌肽聚糖层中的N-乙酰葡糖胺结合的特点,提出快速判定菌株革兰氏染色反应的荧光法。针对供试的27株菌,该法革兰氏染色反应判定的准确率高达98.76%,且不受菌龄影响。设置阳性对照抑制实验,有利于提高判定准确率。与常规革兰氏染色法相比,该法具有所需药品少、简单、快速、准确率高的特点,尤其在不可培养样品的革兰氏染色反应判定方面具有很大的应用前景。在微生物教学中可以考虑将该法与传统革兰氏染色法联合使用,以提高教学效果。