HPLC法测定丹膝颗粒中丹参酮Ⅱ_A的含量

目的建立测定丹膝颗粒中丹参酮ⅡA含量的HPLC法。方法采用HPLC法,色谱柱:AgilentEclipse XDB-C18(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相:甲醇-水(80∶20);流速:1.0 mL/min;检测波长:270 nm;柱温:30℃。结果丹参酮ⅡA在0.020 50～0.820 0μg范围内与峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为99.76%,RSD=1.33%(n=6)。结论本方法专属性强、重复性好、结果准确可靠,可用于丹膝颗粒的质量控制和评价方法 。

HPLC法测定丹膝颗粒中栀子苷的含量

目的:建立HPLC法测定丹膝颗粒中栀子苷的含量。方法:色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-水(25:75);流速:1.0 ml·min^(-1);检测波长:238 nm;柱温:30℃。结果:栀子苷浓度在0.010～0.204μg范围内与其峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率为100.05%,RSD为2.07%(n=6)。结论:本方法操作快速、结果准确,可以为完善丹膝颗粒的质量控制标准提供依据。

HPLC法测定丹膝颗粒中阿魏酸的含量

目的建立HPLC法测定丹膝颗粒中阿魏酸的含量。方法采用色谱柱为Agilent Eclipse XDBC18（4.6 mm×150 mm,5μm）;甲醇-1.0%醋酸溶液（30∶70）;检测波长为321 nm;流速为1.0 mL/min;进样量：10μL;柱温为30℃。结果阿魏酸在0.312 8~15.64μg/mL范围内与其峰面积线性关系良好（r=0.999 9）,平均回收率分别为96.91%,RSD为1.72%。结论本方法专属性强,重复性好,结果准确可靠,可用于丹膝颗粒的质量控制和评价方法 。

HPLC法测定丹膝颗粒中芍药苷的含量

目的建立HPLC法测定丹膝颗粒中芍药苷的含量。方法采用高效液相色谱法,色谱柱:AgilentEclipse XDB-C18;流动相:甲醇-水(25∶75);流速:1.0 mL.min-1;检测波长:230nm;柱温:30℃;进样量:10μL。结果芍药苷浓度在5.810～116.2μg.mL-1范围内与其峰面积线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为98.73%,RSD为1.13%(n=6)。结果本方法操作快速、结果准确,可用于丹膝颗粒的质量控制。

丹膝颗粒对大鼠及沙土鼠局灶性脑血管损伤的影响

目的:探讨丹膝颗粒对大鼠及沙土鼠脑血管损伤的影响。方法:采用VII型胶原酶注入大脑,复制大鼠脑出血模型;结扎沙土鼠单侧颈总动脉,复制脑缺血病理改变;电凝法阻断大鼠脑中动脉,造成局灶性脑缺血模型。结果:丹膝颗粒能减轻VII型胶原酶所致大鼠脑出血损伤,缓解结扎沙土鼠颈总动脉而出现的脑缺血症状,缩小大鼠局灶性脑缺血损伤的脑梗塞灶,减轻脑梗塞后的神经行为障碍。结论:丹膝颗粒对大鼠及沙土鼠局灶性脑血管损伤有明显保护作用。

丹膝颗粒联合西药治疗对慢性盆腔炎患者血清IL-2、IL-10及TGF-β1的影响

目的探讨丹膝颗粒辅助治疗慢性盆腔炎疗效。方法随机将134例慢性盆腔炎患者分为对照组和观察组,对照组行西药治疗,观察组在此基础上加予丹膝颗粒治疗,治疗2周后,评估两组疗效、主要症状消失时间、平均包块直径变化、血清生化指标水平变化和用药安全性。结果观察组总有效率显著高于对照组(P<0.05);观察组腹痛、白带量多、大便干结或便溏的消失时间显著短于对照组(P<0.05);治疗2周后,观察组平均包块直径显著减小(P<0.05),两组血清IL-2、IL-10及TGF-β1水平显著增加(P<0.05),观察组变化幅度显著大于对照组(P<0.05);两组不良反应总发生率差异不显著(P>0.05)。结论丹膝颗粒能提高治疗慢性盆腔炎疗效,改善临床症状和炎症,安全性佳。

丹膝颗粒联合丁苯酞序贯治疗动脉粥样硬化性脑梗死的疗效观察

目的观察丁苯酞序贯联合丹膝颗粒治疗动脉粥样硬化性脑梗死的疗效。方法选取2021年1月—2021年10月于福建省龙岩市第二医院神经内科住院的动脉粥样硬化性脑梗死病人72例,随机分为对照组和试验组,每组36例。在抗血小板聚集、他汀类药物稳定斑块等常规治疗的基础上,对照组给予丁苯酞氯化钠注射液25 mg,每日2次,静脉输注14 d后仅口服脑卒中二级预防常规药物,观察至第90天;试验组给予丁苯酞氯化钠注射液25 mg,每日2次,静脉输注14 d后给予丁苯酞软胶囊200 mg,每日3次,口服76 d序贯治疗,90 d内全程联合丹膝颗粒10 g,每日3次,冲服。比较治疗前、治疗后90 d颈动脉内-中膜厚度(IMT)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)等动脉粥样硬化相关指标。比较治疗后14 d和治疗后90 d两组美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分以评估临床疗效,通过改良Rankin量表的评分评估两组治疗90 d后的预后情况。结果治疗后90 d,试验组和对照组LDL-C、hs-CRP水平较治疗前明显下降,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后90 d,试验组hs-CRP水平低于同期对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后14 d,试验组NIHSS评分略低于对照组,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后90 d,试验组NIHSS评分明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后90 d试验组预后良好率明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论丁苯酞序贯治疗联合丹膝颗粒治疗动脉粥样硬化性脑梗死,改善动脉粥样硬化相关的各项指标较传统方案更为有效,并可显著改善病人的神经功能症状,提高90 d的良好预后率。

UPLC-Q-TOF-MS/MS法定性分析丹膝颗粒的化学成分

目的:采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS/MS)对丹膝颗粒中的化学成分进行定性分析。方法:采用Atlantis®T3色谱柱(2.1 mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,柱温35℃,进样量2μL。质谱采用电喷雾(ESI)离子源,正、负离子模式监测,通过保留时间、相对分子质量、质谱碎片等信息,结合对照品碎片裂解规律及文献数据对检测到的化学成分进行定性分析。结果:由一级MS、二级MS/MS高分辨质谱数据共鉴定和推测出102个化合物。结论:首次利用UPLC-Q-TOF MS/MS技术对丹膝颗粒的主要成分进行定性分析,为其质量控制、药效物质基础、药理作用机制研究提供了参考。

丹膝颗粒 HPLC 指纹图谱的建立

目的:建立丹膝颗粒的HPLC指纹图谱,为其质量研究提供依据。方法:使用CAPCELL PAK C18 MGⅡ色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),乙腈-0.05%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速0.8 mL/min,柱温35℃,进样量10μL,DAD和ELSD两检测器串联检测,利用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2012年版建立对照指纹图谱,并进行相似度分析。结果:建立的HPLC-DAD-ELSD指纹图谱共有峰17个,15批次样品DAD检测通道相似度为0.961~0.998,ELSD检测下相似度为0.965~0.999,整体相似度良好。结论:该方法简便可靠,可为丹膝颗粒的整体质量控制和评价标准提供依据。

高效液相色谱法同时测定丹膝颗粒中8种成分的含量

目的建立高效液相色谱(HPLC)法同时测定丹膝颗粒中天麻素、栀子苷、丹酚酸B、淫羊藿苷、橙黄决明素、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮和丹参酮ⅡA的含量。方法以70%甲醇提取供试样品;采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速:1.0 mL·min-1;柱温:30℃,检测波长为220、238、280 nm。结果天麻素、栀子苷、丹酚酸B、淫羊藿苷、橙黄决明素、丹参酮Ⅰ、隐丹参酮和丹参酮ⅡA质量浓度分别在2.105~21.05μg·mL-1(r=0.9994)、10.54~105.4μg·mL-1(r=0.9993)、23.52~235.2μg·mL-1(r=0.9998)、3.409~34.09μg·mL-1(r=0.9997)、0.6834~6.834μg·mL-1(r=0.9999)、1.013~10.13μg·mL-1(r=0.9997)、1.394~13.94μg·mL-1(r=0.9998)和1.491~14.91μg·mL-1(r=0.9998)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为98.56%(RSD=2.74%)、98.99%(RSD=1.16%)、100.34%(RSD=2.09%)、97.86%(RSD=1.41%)、94.66%(RSD=2.05%)、99.49%(RSD=2.61%)、95.89%(RSD=1.24%)和101.07%(RSD=2.97%)。结论该方法准确度高、重复性好,可为丹膝颗粒的质量控制提供参考。

RP-HPLC同时测定丹膝颗粒中丹酚酸B、丹皮酚和丹参素含量

目的建立RP-HPLC同时测定丹膝颗粒中的丹酚酸B、丹皮酚和丹参素含量的分析方法。方法供试品加甲醇经超声提取。采用Agilent Zorbax eclipse SB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)对提取液进行分离,以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,柱温30℃,检测波长282 nm。结果丹酚酸B、丹皮酚和丹参素在2.0~100μg/ml范围内,与峰面积线性关系良好(r均大于0.995);检测限分别为0.12,0.08,0.28μg/ml;加样回收率分别为95.3%,93.2%,100.7%;精密度和重复性(n=6)RSD均在5.0%以内。结论本方法具有前处理简单、检出限低、重复性好、检测结果准确等优点,可以用于丹膝颗粒的质量控制。

HPLC-DAD-ELSD法测定丹膝颗粒中8种成分的含量

目的:建立HPLC-DAD-ELSD法测定丹膝颗粒中8种成分的含量。方法:色谱柱:CAPCELL PAK C18 MGⅡ(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-0.05%甲酸溶液,梯度洗脱;流速:0.8 ml·min^(-1);柱温:35℃;进样量:10μl。结果:没食子酸、栀子苷、丹酚酸B、淫羊藿苷、丹皮酚、丹参酮ⅡA、人参皂苷Ro、橙黄决明素进样量分别在0.10~1.25μg、0.20~2.50μg、0.40~5.00μg、0.10~1.25μg、0.20~2.50μg、0.03~0.38μg、0.03~0.38μg、0.03~0.38μg(r为0.9989~0.9999)范围内与峰面积呈良好线性关系,平均回收率分别为99.5%,100.1%,98.0%,101.2%,98.9%,99.3%,98.5%,97.8%(RSD<2.0%,n=6)。结论:该方法操作简便、结果可靠,重复性好,可用于丹膝颗粒的质量控制。

芪龙活络颗粒质量标准研究

目的建立芪龙活络颗粒的质量标准。方法采用薄层色谱法对制剂中黄芪、川牛膝、鸡血藤药材进行定性鉴别;采用高效液相色谱法测定丹酚酸B的含量,色谱柱为Eclipse XDB-C_(18)柱(150 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(23∶77,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为286 nm,柱温为30℃,进样量为10µL。结果薄层色谱斑点清晰,且阴性对照无干扰。丹酚酸B的进样量在0.0624~1.248µg范围内与峰面积线性关系良好(r=1.000,n=5);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.00%(n=6);平均回收率为107.61%,RSD为4.28%(n=6)。5批样品中丹酚酸B的含量为1.09~1.32 mg/g。结论该方法专属性好、结果准确,可用于芪龙活络颗粒的质量控制。暂订芪龙活络颗粒中丹酚酸B的含量应不低于1.0 mg/g。

丹膝颗粒辅助关节镜下清理术治疗膝骨性关节炎临床效果分析

目的探讨丹膝颗粒辅助关节镜下清理术治疗膝骨性关节炎临床效果,及其对红细胞沉降率(ESR)、基质金属蛋白酶(MMPs)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响。方法收集本院2017年6月~2019年8月收治的94例膝骨性关节炎患者临床资料,根据治疗方式不同分为对照组(关节镜下清理术)41例与观察组(关节镜下清理术联合丹膝颗粒治疗)53例。比较两组治疗前后视觉模拟评分(VAS)、骨性关节炎指数评分(WOMAC);治疗后3个月采用Shahariarre评分对两组治疗效果进行评估,并比较两组ESR、MMPS、TNF-α表达情况。结果观察组治疗优良率为94.34%,明显高于对照组(70.73%),差异有统计学意义(χ^(2)=9.606,P<0.05);治疗后两组ESR、MMPs、TNF-α水平及WOMAC评分、VAS评分均较治疗前降低,且观察组低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论丹膝颗粒治疗膝骨性关节炎治疗效较好,可降低ESR、MMPS、TNF-α水平,改善患者疼痛情况,促进患者恢复。

正交试验法优选丹膝颗粒中牛膝等药材的醇提工艺

目的以齐墩果酸、干膏得率为考察指标,研究丹膝颗粒中牛膝等药材的醇提工艺。方法采用正交试验设计进行优化,薄层色谱扫描法测定齐墩果酸含量,干燥失重法测定干膏得率。结果乙醇浓度、回流时间和加乙醇量对齐墩果酸的影响均有显著性差异(P<0.05);乙醇浓度对干膏得率的影响有具显著性差异(P<0.05),回流时间和加乙醇量对干膏得率的影响无显著性差异(P>0.05)。结论丹膝颗粒中牛膝等药材的最佳醇提工艺为70%乙醇回流提取2次,每次1h,每次加乙醇量均为药材量的6倍。

丹杞颗粒联合硫酸氨基葡萄糖治疗骨性关节炎的疗效研究

目的探索丹杞颗粒联合硫酸氨基葡萄糖治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)患者的临床疗效。方法对2014年7月至2017年6月期间在我院治疗的128例KOA患者随机分为对照组和治疗组,每组64例患者,治疗组患者给予丹杞颗粒联合硫酸氨基葡萄糖治疗,对照组患者予以硫酸氨基葡萄糖治疗。比较治疗前后两组患者临床疗效和Lequesne、VAS、WOMAC及SF-36评分改善情况,同时检测两组患者的血清白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-α)的水平变化,并记录治疗期间两组患者出现的药物不良反应情况。结果治疗前,两组患者的Lequesne、VAS、WOMAC及SF-36评分和血清IL-1β、IL-6和TNF-α的水平比较无统计学差异(P>0.05)。经过6个月的治疗,两组患者的Lequesne、VAS、WOMAC及SF-36评分和血清IL-1β、IL-6和TNF-α水平较治疗前均有显著改变(P<0.05),而治疗组上述指标改变幅度较对照组更为明显(P<0.05);治疗组有效率显著高于对照组(P<0.05),而两组的药物不良反应比较无统计学意义(P>0.05)。结论丹杞颗粒结合硫酸氨基葡萄糖可以显著改善膝骨关节炎的临床症状。

肾石通颗粒质量标准的研究

目的:研究肾石通颗的质量标准。方法:增加TLC法鉴别木香、牛膝、丹参、延胡索及RP-HPLC法测定丹酚酸B的含量。含量采用Waters C18色谱柱(4.6mm×200mm,5μm);流动相为甲醇-乙腈-甲酸-水(30∶10∶1∶59),流速1mL·min-1,检测波长286nm。结果:鉴别:阴性对照均无干扰;含量:0.053165～1.0633μg范围内有良好的线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为100.5%(n=6)。结论:所建方法简单、可靠,可用于肾石通颗的质量控制。

丹膝颗粒联合曲克芦丁治疗急性脑梗死恢复期的临床研究

目的探讨丹膝颗粒联合曲克芦丁治疗急性脑梗死恢复期的临床疗效。方法选取2018年6月—2023年6月国家电网公司北京电力医院脑神经内科收治的120例急性脑梗死恢复期患者,按照随机数字表法将所有患者分为对照组和治疗组,每组各60例。对照组患者静脉滴注曲克芦丁氯化钠注射液,0.48 g/次,1次/d。治疗组在对照组的治疗基础上口服丹膝颗粒,1袋/次,3次/d。两组用药20 d观察治疗情况。观察两组临床疗效,比较两组症状好转时间、神经行为认知状态检查表(NCSE)评分、日常生活活动能力量表(ADL)评分、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、脑源性神经营养因子(BDNF)、同型半胱氨酸(Hcy)水平及不良反应情况。结果治疗后,治疗组总有效率是96.67%,显著高于对照组的83.33%(P<0.05)。治疗后,治疗组头晕、眩晕、肢体麻木、中枢性面瘫好转时间均显著短于对照组(P<0.05)。治疗后,两组NCSE评分、ADL评分均显著高于同组治疗前(P<0.05);且治疗后,治疗组NCSE评分、ADL评分高于对照组(P<0.05)。治疗后,两组Lp-PLA2、NSE、Hcy水平均显著降低,而BDNF水平显著升高(P<0.05);治疗后治疗组Lp-PLA2、NSE、Hcy水平低于对照组,而BDNF水平高于对照组(P<0.05)。治疗后,治疗组不良反应发生率是5.01%,显著低于对照组的13.33%(P<0.05)。结论丹膝颗粒联合曲克芦丁治疗脑梗死恢复期具有较好的临床疗效,显著提高患者神经行为认知能力和日常活动能力,降低机体炎症反应,值得临床借鉴应用。

HPLC测定丹膝颗粒中丹酚酸B的含量

目的:建立测定丹膝颗粒中丹酚酸B的含量。方法:采用高效液相色谱法,Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6mm×150 mm,5μm),甲醇-1%甲酸溶液(40∶60),检测波长286 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃。结果:丹酚酸B在0.207～8.264μg与其峰面积线性关系良好(r=0.999 9),平均回收率分别为100.20%,RSD 1.14%。结论:方法专属性强、重复性好、结果准确可靠,可用于丹膝颗粒的质量控制和评价方法。

丹膝颗粒组成药味UPLC指纹图谱的1次稳态投料量研究

目的建立丹膝颗粒组成药味的UPLC指纹图谱,并运用总量统计矩、信息熵和信息量及1次投料量数学模型,计算出稳态1次投料量,建立动态中药成分群的稳态性质量提取方法。方法采用UPLC法,色谱柱为Acquity UPLC HSS T3(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;体积流量为0.4 mL/min;240 nm UV检测;柱温为30℃;进样量为3μL。建立丹参、牛膝、川芎等12味丹膝颗粒组成药味的UPLC指纹图谱,采用总量统计矩、信息熵和信息量分析方法获得指纹图谱的动态性参数,并根据遗传统计学原理获得单味药材及全方的1次投料量,指导工业化大生产,获得成分稳态的丹膝颗粒。结果丹膝颗粒12味组成药味的平均总量统计矩零、一、二阶矩、信息熵、信息量分别为6.56×10^(4)、13.36、50.71、5.75、3.59×10^(5);其中以桑寄生药材信息量的RSD最大,以川芎药材的RSD最小,平均为24.51%;按单味药材投料,据全方累积信息量的RSD计算出1次投料量为2.13 kg,按全方的比例投料,全方1次稳态投料量为335.35kg,远远大于《中国药典》2020年版规定。结论丹膝颗粒组成药味的指纹图谱动态性可用总量统计矩、信息熵、信息量进行分析,据此可获得稳态的一次投料量,据此投料生产可保证丹膝颗粒质量的稳定。