超声提取葡萄籽原花青素工艺的优化及其抗氧化活性研究

研究利用响应曲面法优化超声提取葡萄籽原花青素的工艺。在单因素实验基础上,采用中心组合设计响应面实验,考察了提取温度、液料比、乙醇浓度以及超声时间对原花青素提取率的影响,并建立回归模型。优化后的工艺:提取温度55℃,液料比20(mL/g),乙醇浓度65%,超声时间10min;在此条件下葡萄籽原花青素的提取率为2.482%,与回归模型预测值的相对偏差为0.36%。同时进行了提取物的抗氧化性检验,结果表明葡萄籽原花青素对超氧阴离子自由基具有较好的清除能力,且呈剂量相关性。

葡萄籽原花青素对肾血管性高血压大鼠血压和TNF-α水平的影响

目的:探讨葡萄籽原花青素(GSP)对肾血管性高血压(RH)大鼠动态血压和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量、腹主动脉、肾皮质和海马组织中TNF-α蛋白表达的影响。方法:采用两肾一夹(2K1C)法建立RH大鼠模型,并设立假手术组(n=7)。术后2周,选取鼠尾动脉收缩压(SBP)超过130mmHg的大鼠28只为RH大鼠,并随机分为4组(n=7):高血压模型组;低剂量葡萄籽原花青素治疗组(50mg/kg/d);高剂量葡萄籽原花青素治疗组(200mg/kg/d)及卡托普利阳性对照治疗组(30mg/kg/d),观察各组大鼠尾动脉SBP的动态变化,治疗6周后,分别采用ELISA和Western blotting法检测各组大鼠血清和腹主动脉、肾皮质及海马组织中TNF-α水平。结果:应用葡萄籽原花青素治疗后,与假手术组相比,高血压模型组大鼠尾动脉SBP一直明显升高;治疗6周后,高血压模型组大鼠血清中TNF-α含量和腹主动脉、肾皮质及海马组织中TNF-α的蛋白表达水平均较假手术组明显升高。与高血压模型组相比,用葡萄籽原花青素治疗2周即可使RH大鼠尾动脉SBP降低,用药6周后降压效果更明显。同时亦能显著降低RH大鼠血清中TNF-α含量和腹主动脉、肾皮质及海马组织中TNF-α的蛋白表达水平,其中以高剂量葡萄籽原花青素治疗组的作用尤为明显,与卡托普利治疗组的作用相当。结论:葡萄籽原花青素可以通过减少RH大鼠体内促炎介质TNF-α的生成而发挥降压和抗炎作用。

葡萄籽原花青素对自发性高血压大鼠肾损伤的保护作用

目的:研究葡萄籽原花青素对自发性高血压大鼠(SHR)肾损伤的保护作用并对其机制进行探讨。方法:8周龄雄性自发性高血压大鼠24只随机分成4组,每组6只:模型组、葡萄籽原花青素50mg/kg剂量组和200mg/kg剂量组、卡托普利组(30mg/kg),6只8周龄雄性Wistar-Kyoto大鼠设为对照组。治疗6周后,测定大鼠尾动脉收缩压(SBP);ELISA法测定大鼠尿中视黄醛结合蛋白(RBP)和α1微球蛋白(α1-MG)含量;HE染色下用图像分析软件测定肾内小动脉中膜厚度与血管内径比值(MT/LD);Masson染色下观察肾脏纤维化情况,测量并计算肾小球胶原纤维沉积评分(GCDS)及肾小管间质病变评分(TIDS);Western blot法检测肾皮质中磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)蛋白表达情况。结果:葡萄籽原花青素50mg/kg和200mg/kg剂量组能显著降低自发性高血压大鼠尾动脉收缩压、尿液中RBP和α1-MG含量、肾内小动脉MT/LD,减少肾脏组织中胶原纤维含量、降低GCDS和TIDS以及肾皮质中p-ERK1/2蛋白表达,葡萄籽原花青素200mg/kg剂量组的作用尤为显著。结论:葡萄籽原花青素对自发性高血压大鼠肾脏损伤有减轻作用,其机制可能与葡萄籽原花青素降低尾动脉收缩压、减少肾皮质中p-ERK1/2蛋白表达有关。

葡萄籽原花青素缓解肾血管性高血压大鼠的血管重塑

目的:探讨葡萄籽原花青素(GSP)对肾血管性高血压(RH)大鼠血管重塑的影响。方法:采用两肾一夹法建立RH大鼠模型,并设立假手术组。术后2周,选取鼠尾动脉收缩压升至130mmHg以上的大鼠28只为RH大鼠,随机分为4组:高血压模型组,GSP低剂量治疗组(50mg/kg);GSP高剂量治疗组(200mg/kg)和卡托普利阳性对照治疗组(30mg/kg)。治疗6周后,分别测定各组大鼠尾动脉收缩压,苏木精-伊红染色法染色并观察胸主动脉形态,测量中膜平滑肌层数,中膜厚度(MT),管腔内径(LD)及MT/LD等血管重塑形态学参数。ELISA法测量腹主动脉血管组织中内皮素(ET)的含量,Western blotting法检测腹主动脉血管组织中ERK1/2蛋白的表达水平。结果:治疗6周后,与假手术组比较,高血压模型组大鼠的尾动脉收缩压,MT、MT/LD,ET含量,中膜平滑肌层数,ERK1/2蛋白表达水平明显升高;胸主动脉内膜不完整,中膜平滑肌增多,管壁明显增厚,而LD减小。与高血压模型组相比,GSP低(50mg/kg)、高(200mg/kg)剂量均能降低RH大鼠的尾动脉收缩压、MT和MT/LD,减少ET的含量、中膜平滑肌层数的增多,和ERK1/2的蛋白表达水平,亦可以使内膜不完整、,中膜平滑肌增多、管壁增厚及LD减小的现象得到缓解,其中,以高剂量(200mg/kg)GSP治疗组的作用尤为明显,与卡托普利(30mg/kg)治疗组的作用相当。结论:GSP不仅能显著降低RH大鼠尾动脉收缩压,而且对血管重塑有缓解作用,其机制可能与GSP能降低腹主动脉中ET的含量和ERK1/2的蛋白表达有关。