以绿荧光蛋白基因为报告基因的广宿主启动子探针载体的构建和应用

将以绿荧光蛋白基因（ ｇｆｐ） 的ｃＤＮＡ 为模板，用人工合成引物经ＰＣＲ 扩增获得的０－９ｋｂＤＮＡ 片段克隆到表达载体ｐＥＴ１１Ｃ 上构建成ｇｆｐ 表达载体ｐＨＮ１１５ 。从ｐＨＮ１１５ 上切下的不含启动子，但保留了ＳＤ 序列的ｇｆｐ 基因经克隆载体ＳＫ（ ＋ ） 和ｐＩＪ２９２５ 亚克隆后再克隆到广谱稳定性质粒ｐＴＲ１０２ 上构建成广谱、稳定、可视的启动子探针载体ｐＨＮ１２７ 。并用它从费氏中华根瘤菌ＨＮ０１ 的总ＤＮＡ 中成功地钓出组成型和诱导型表达的启动子。