灰树花多糖脱色技术研究

从脱色剂的种类、脱色剂用量、脱色时间、温度、pH值、脱色次数等不同角度对灰树花多糖的脱色技术进行了较为系统的研究。结果表明 :脱色剂的种类不同对脱色效果影响极大 ;脱色剂的用量不同 ,其脱色效果差别很大 ,从V (样品 )∶V (脱色剂 ) =1∶2开始变得非常明显。对于复合脱色剂而言 ,脱色 30min已基本达到效果。脱色温度为室温与 5 0℃时的脱色效果差别不大 ,而低温 12℃的脱色效果最好。脱色次数不同 ,脱色效果有很大差异。其中前 2次的脱色效果最为明显 ,第三次与第二次差异不太大。在实际生产过程中 ,考虑到工时与成本以进行 2次脱色为好。

几种测定灰树花多糖中蛋白质含量方法的比较研究

用双缩脲法、紫外吸收法、考马斯亮蓝G -2 5 0染色法三种方法对灰树花多糖中蛋白质含量进行测定 ,并同微量凯氏定氮法进行对比。结果表明 :在蛋白质量浓度 0 1～ 1 0mg/mL范围内 ,其测量误差分别为双缩脲法大于 5 0 % ,紫外吸收法大于 30 % ,考马斯亮蓝G -2 5 0染色法最低可小于 3%。考马斯亮蓝G - 2 5 0染色法简单 ,迅速 ,且相对较为准确 ,是测定灰树花多糖中蛋白质含量的有效方法。

灰树花胞内多糖抗辐射作用的初步研究

利用深层培养方法获得菌丝体,经热水提取后获得灰树花的菌丝体胞内多糖。以之为材料,研究了其对60Co-γ辐照小鼠白细胞数目以及存活率的影响,发现灰树花胞内多糖具有明显的促进辐照小鼠白细胞数目恢复以及提高存活率和存活时间的作用。此结果说明灰树花胞内多糖具有一定的抗辐射作用。

超滤膜分离灰树花多糖的工艺条件优化

利用超滤膜分离技术对灰树花多糖进行分离,选择截留分子量6.0×104的PS膜分离灰树花多糖,膜通量较好。正交试验表明,影响膜通量的主要因素是料液温度,其次是膜分离操作压力;综合考虑膜的使用寿命和生产成本,采用超滤膜分离时料液在中性情况下,料温为30℃、操作压力为0.25MPa为膜分离的优化工艺。

灰树花在米糠培养基上固态发酵产多糖研究

为高效利用稻谷加工副产品米糠并拟在固态发酵设备中发酵生产多糖保健食品,以米糠为基础培养基,对灰树花固态发酵米糠产多糖条件进行探索。针对定量米糠,选取水分、蛋白胨、葡萄糖和pH值影响因素,以总多糖含量为评价指标进行试验,按L16(45)的正交试验方案得到优化培养基,并进一步通过单因素试验选择得到较优的固态发酵工艺条件。结果表明:优化固态培养基组成为原始米糠(水分为65%,按原始米糠质量计)、蛋白胨0.5%、葡萄糖4%、pH5.5、装样量20g/250mL三角瓶,发酵条件为:接种量10%、培养温度25℃、摇床转速170r/min、培养时间11d,多糖得率以米糠为标准计算,可达4.52%。用SPSS软件处理数据,得到表征多糖产量和培养基成分关系的回归方程。

灰树花多糖促进干扰素诱生作用的研究

灰树花多糖以２０００，１００Ｏ，５００ｍｇ／ｋｇ／ｄ的剂量给ＮＩＨ小鼠灌胄７天，然后腹腔注射１２８０ＨＡＵ／ｍｌ的ＮＤＶ（新城鸡瘟病毒）０．５ｍｌ。６ｈ后放血，分离血清，以Ｌ９２９细胞、ＶＳＶ病毒检测鼠干扰素。结果发现，灰树花多糖能够促进ＮＤＶ诱生干扰素。各实验组、ＮＤＶ对照组和生理盐水对照组的干扰素活性分别为４４．５，４５．０，２９．０，１２．０和２．０Ｕ／ｍｌ，据此认为，灰树花多糖抗病毒感染的作用可能由干扰素系统介导，但也可能有其他机理参与。

灰树花液体深层培养多糖组份的分析鉴定研究

研究了液体深层培养的灰树花多糖组份和结构。应用气相色谱分析测得灰树花胞外多糖 (HPT1)和灰树花胞内多糖 (HPT2 )的组份均含有葡萄糖 (Glu)、甘露糖 (Man)和木糖 (Xyl) ;其摩尔比HPT1为 1 0 0∶0 2 7∶0 11,HPT2为 1 0 0∶0 3 5∶0 2 6。运用隧道扫描显微镜 (STM )对多糖进行了结构的扫描研究 ,结果表明 :HPT2可以清楚地看出主链上带有环状侧链 ,HPT1不清楚 。

灰树花多糖的提取及纯化技术初探

采用正交试验等方法对灰树花多糖提取和纯化条件进行了优化研究 .结果表明 :灰树花子实体多糖提取的最佳工艺条件为 :pH6 5～ 7 0 ,98℃浸提 3h ,料水比为 1∶30 ,醇析浓度为70 % ,最佳浸提次数为 2次 ,两次浸提液合并 ,粗多糖得率可达 1 2 %～ 1 5 % .杂蛋白质去除时 ,样品 /氯仿 +正丁醇 (V∶V)为 1∶1 ,氯仿 /正丁醇 (V/V)为 1∶0 2 5 ,萃取时间为 60min效果最好 ,去除杂蛋白达 97 4% .

灰树花多糖的抗辐射作用研究

探讨灰树花多糖对受8Gy60Co-γ射线照射的小鼠的防护作用。分别用灰树花多糖剂量为100、200、300mg·kg-1·d-1和水为对照共4组处理,经口灌胃来考察抗辐射的作用。结果表明:受辐照的小鼠在200mg·kg-1·d-1剂量以上,可以提高平均存活时间和30d存活率,增加骨髓的DNA含量,说明灰树花多糖有很好的辐射保护作用。

离子束注入技术筛选灰树花多糖产生菌的研究

本文用20×1013ion/cm2～100×1013ion/cm2剂量的N+离子注入灰树花菌,设5个处理,0处理为对照,观测菌丝长势、菌丝长速、纤维素酶活、菌丝生长量、多糖含量探讨离子注入的效应与影响。结果表明,适宜剂量的离子注入促进生长、增加纤维素酶活和产物积累,灰色关联分析得到离子注入的最适剂量为40×1013ion/cm2～60×1013ion/cm2;并用纸层析和GC法对离子注入处理和对照菌的产物进行比较鉴定,结果显示多糖性质与结构一致。

灰树花深层发酵及菌丝体成分分析研究

本文报道了灰树花菌丝体的深层发酵及有效成分提取和分析。分别从菌丝体及发酵清液中提取得到了灰树花多糖和胞外多糖 ,同时还测定了菌丝体成分 :灰树花多糖 7 82 % ,蛋白质 2 1 7% ,总糖 5 7 2 % ,灰分6 0 5 % ,其中菌丝体灰树花多糖及总糖含量明显多于子实体。

种子深层培养对灰树花生长的影响

灰树花是食药两用真菌中的极品,其中灰树花多糖具有抗辐射、抗氧化、抑制肿瘤、激活免疫等功能。研究种子深层培养对灰树花生长的影响。结果显示:灰树花最佳种子培养基为马铃薯-葡萄糖-蛋白胨培养基;种子培养基初始pH为6.0;种子培养温度为25℃,最佳接种时间为108h;接种量为10%。在此条件下进行深层发酵,灰树花菌丝体干重和胞外粗多糖的含量分别为5.325g/L和0.53g/L。

灰树花多糖胶囊制剂的免疫调节实验研究

探讨了灰树花多糖胶囊制剂对小鼠的免疫调节和受8Gy60-Co-γ射线照射的防护作用。分别用灰树花多糖胶囊制剂的剂量为0.13,0.27,0.81 g和水为对照共4组处理,经灌胃考察免疫调节和抗辐射的作用。结果:超过0.27 g的剂量时,可以提高小鼠的足跖肿胀度、抗体细胞生成数、平均存活时间和30 d存活率及提高白细胞总数,有很好的免疫调节和辐射保护作用。

灰树花多糖D组分对PM_(2.5)引起肺泡巨噬细胞损伤的拮抗作用

目的探讨灰树花多糖D组分（D-fraction）对大气细颗粒物PM2.5染毒后的大鼠肺泡巨噬（NR8383）细胞损伤的拮抗作用。方法分别以不同浓度的SRM 2786悬液（31.25、62.5、125、250和500μg/ml）、不同浓度的D-fraction溶液（1.56、3.125、6.25、12.5、25、50、100、200及400μg/ml）及SRM 2786溶液（浓度为125μg/ml）与不同浓度的D-fraction溶液（3.125、6.25、12.5、25μg/ml）暴露NR8383细胞24 h,同时,设置空白对照（F-12K培养基）组,采用MTT法检测细胞存活率。将125μg/ml SRM 2786悬液分别与不同浓度（3.125、6.25、12.5、25μg/ml）的D-fraction溶液联合暴露NR8383细胞24 h后,采用酶联免疫法（Elisa）检测细胞上清液肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素6（IL-6）及白介素1β（IL-1β）三种炎性因子的释放。结果与空白对照组相比,各浓度SRM 2786暴露组NR8383细胞的存活率均较低,差异有统计学意义（P〈0.01）;且随着SRM 2786暴露浓度的升高,NR8383细胞的存活率呈下降趋势。与空白对照组相比,1.56~25μg/ml D-fraction暴露组NR8383细胞的存活率均升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;而50~400μg/ml D-fraction暴露组NR8383细胞的存活率均无明显改变。与125μg/ml SRM 2786暴露组相比,125μg/ml SRM 2786＋各浓度D-fraction暴露组NR8383细胞的存活率均明显增高;细胞上清液中的TNF-α、IL-6和IL-1β含量均较低,除125μg/ml SRM 2786＋3.125μg/ml D-fraction暴露组外,差异有统计学意义（P〈0.01）。且随着D-fraction暴露浓度的升高,125μg/ml SRM 2786暴露NR8383细胞的存活率及细胞上清液中的TNF-α和IL-1β含量均呈逐渐下降趋势,IL-6含量呈波浪性下降的趋势。结论 PM2.5可显著降低细胞存活率和促进炎性因子的释放,而D-fraction可改善由PM2.5引发的NR8383细胞损伤。