A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗稳定性研究

为确定A +C群脑膜炎球菌多糖疫苗有效期 ,对该疫苗在不同储藏温度下的稳定性进行了系统研究。将C群多糖抗原放置在 37℃ ,A +C群多糖疫苗分别放置在 2～ 8℃、37℃和 5 6℃ ,定期取样 ,用琼脂糖CL - 4B凝胶柱层析后 ,测定Kd值在 0 .5以前的多糖回收率。结果表明 ,C群多糖抗原在 37℃保存 9周 ,A +C群多糖疫苗于 2～ 8℃保存 4年、37℃保存 88周、5 6℃保存 10个月 ,多糖抗原或多糖疫苗的Kd值小于 0 .4 ,多糖回收率大于 75 % ,符合规程要求 ;因而A +C群脑膜炎球菌多糖疫苗的有效期可定为在 2～ 8℃储藏条件下 3年

冻干A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗安全性和免疫原性观察

为了评价冻干A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗(MPV)的安全性和免疫原性,按随机、盲法的原则,评价疫苗免疫后不良反应发生率、抗体阳转率及抗体几何平均滴度(GMT)。将606名健康观察者分为2～5岁、6～12岁、13～17岁、18～60岁四个年龄组,结果显示,该疫苗全身反应发生率2.64%,局部反应发生率1.32%,四个年龄组疫苗免疫后杀菌抗体阳性率分别为100%、100%、99.3%和100%,免疫后A群杀菌抗体GMT分别为1:250.47、1:190.61、1:144.22和1:205.79,免疫后C群杀菌抗体GMT分别为1:273.33、1:551.18、1:788.26和1:809.81,冻干A+C群多糖疫苗在≥2岁人群中具有良好的安全性和免疫原性,建议推广使用A+C群MPV。

C群脑膜炎球菌荚膜多糖结合疫苗的研制

目的对C群脑膜炎球菌多糖-破伤风类毒素结合疫苗进行研制。方法将C群脑膜炎球菌多糖在溴化氰(CNBr)的活化下,以1,6己二酰肼(ADH)作为连接子与精制破伤风类毒素(TT)在碳二亚胺(EDAC)作用下结合,制成C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗原液,加保护剂冻干后制成C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗。结果制备的冻干C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗各项指标均达到了质控标准。该疫苗安全性及免疫原性良好。结论已成功研制出冻干C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗,该制备工艺是可行的。

薄膜过滤法在A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗无菌检查中的应用

采用薄膜过滤法对A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗的无菌检查方法进行验证。结果表明,薄膜过滤法具有取样量大,操作简便,污染几率小,能确保检验结果的准确性、有效性和重现性,该方法适用于A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗的无菌检查方法。

A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗及b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量检测方法的建立与验证

目的建立A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗和b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量的检测方法并加以验证。方法参照《中华人民共和国药典》三部（2010年版）中＂毛细管柱顶空进样等温法＂,优化色谱条件,建立A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗和b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量的检测方法并对该方法进行验证及初步应用。结果色谱条件为顶空平衡温度70℃,顶空平衡时间40 min,汽化室温度200℃,柱箱温度40℃,检测器温度250℃,进样量为1.0 m L,载气（高纯氮气）流量1.3 m L/min,尾吹气（高纯氮气）流量5 m L/min,分流比1∶1。丙酮质量分数在2×10^-6-5×10^-5范围内具有良好的线性关系（r〉0.99）。丙酮的平均回收率及相对标准偏差（RSD）分别为86.05%-105.11%及2.1%-9.5%,检测限为2×10^-6,定量限为3×10^-6。结论本方法的线性、特异性、准确性、重复性等均符合规定,方法准确、稳定,可用于A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗和b型流感嗜血杆菌结合疫苗中丙酮残留量的检测。

C群脑膜炎球菌结合物小鼠免疫原性的研究

目的比较C群脑膜炎球菌多糖蛋白质结合物(简称结合物)的相对分子质量大小和免疫剂量对其在小鼠体内免疫原性的影响,为结合物的分子大小的质控和结合疫苗成品免疫剂量的选择提供实验依据。方法利用CDAP活化法制备C群脑膜炎球菌结合物,通过硫酸铵盐析进行纯化,然后利用Sepharose CL-4B凝胶过滤层析分析,并根据化学检测结果将结合物分为KD0-0.2(组分1)、KD0.2-0.4(组分2)、KD0.4-0.7(组分3)等3个不同相对分子质量组分,每份分别采用1.0μg、0.2μg的免疫剂量免疫小鼠,并对血清进行ELISA分析。结果采用1.0μg免疫剂量时,3种不同相对分子质量的C群脑膜炎球菌结合物均能产生较高水平的抗体,具有典型的加强效应,第2剂免疫即可产生高水平的抗体,而第2、3剂免疫后的抗体水平差异无统计学意义;采用0.2μg免疫剂量时,三种不同相对分子质量的C群脑膜炎球菌结合物只有在第3剂免疫后才能产生较高水平抗体,第1、2剂免疫后的抗体水平差异无统计学意义,组分1和组分2在第3剂免疫后产生的抗体水平优于组分3;对于相同相对分子质量结合物,用1.0μg免疫小鼠产生的抗体水平优于0.2μg免疫组,而且有显著的统计学意义。结论高剂量时,多糖相对分子质量大小对C群脑膜炎球菌结合物的免疫原性没有显著性影响;低剂量时,小相对分子质量结合物对其免疫原性有影响。同等相对分子质量时,1.0μg比0.2μg的免疫剂量可以激发更高的抗体水平。

A+C群脑脊髓膜炎球菌多糖菌苗生产工艺与内毒素含量研究

A群及C群流脑多糖抗原用 10 0 0 0 0×g离心或不经超速离心处理 ,经用鲎试验法测定内毒素含量 ,2种工艺生产的A群及C群流脑多糖抗原的内毒素含量均很低。用未经超速离心处理的A群及C群流脑多糖抗原制成的A +C群流脑多糖菌苗 ,经鲎试验法测定 ,内毒素含量也很低 ;经家兔升温法进行热原质试验 ,家兔体温未明显升高。证明A +C群流脑多糖菌苗生产工艺不经 10 0 0 0 0×g离心去除内毒素步骤是可行的。所制备的流脑多糖抗原内毒素含量符合要求。

C群流脑多糖菌苗唾液酸含量测定试验

C群脑膜炎球菌多糖菌苗是我们近年开发的一种新制品 ,其中唾液酸 (SA)是该制品的有效成份之一。为了严格控制该制品的质量 ,经反复试验 ,对比各种试验条件 ,选择出较为理想的测定SA方法———改良法。该法与Svennerholm氏法比较 ,其标准曲线变异系数 (cv % )为 0 0 3% ,低于Svennerholm氏法 (0 31% ) ;其回收率平均为10 0 6 2 %。与中检所方法比较 ,无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,对 4批样品进行 6次重复性试验 ,结果表明 ,该法重复性好 ,操作简便 ,结果可靠 ,实验周期短 ,适于同类制品的SA含量测定。

CDAP活化制备C群脑膜炎球菌结合疫苗原液的稳定性试验

目的：评价以1－氰基－4－二甲氨基－吡啶四氟硼酸（ CDAP ）活化制备的C群脑膜炎球菌结合疫苗原液的稳定性。方法以变通的现有工艺为基础，选取C群脑膜炎球菌结合疫苗原液连续3批样品，分别放置于（37＆#177;2）℃、（25＆#177;2）℃，和2～8℃三种温度下，根据稳定性试验原则定期取样并进行主要指标的检测，评估原液的稳定性。结果 C群脑膜炎球菌结合疫苗原液于2～8℃保存18个月，（25＆#177;2）℃保存20周，37℃保存7天，各项检测指标均符合质量标准的要求。结论在2～8℃之下，施行变通的工艺， C群脑膜炎球菌结合疫苗原液可稳定存放18个月。

A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗在广东省2~6岁儿童的免疫原性和免疫持久性研究

目的评价A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗(Group A and group C meningococcal polysaccharide vaccine,MPV-AC)在广东省2~6岁儿童接种后的免疫原性和免疫持久性。方法选择广东省高州市529例2~6岁儿童作为研究对象,接种1剂次MPV-AC。分别采集免疫前、免疫后1个月、免疫后2年血清。采用血清杀菌力试验检测血清抗体水平,评价其免疫原性和免疫持久性。结果受试者免疫后1个月A群、C群抗体阳转率分别为89.60%和90.93%;受试者免疫前、免疫后1个月和免疫后2年A群抗体阳性率分别为15.69%、90.36%和19.55%,C群抗体阳性率分别为5.48%、92.25%、20.54%。受试者免疫后1个月A群、C群抗体几何平均滴度(GMT)与免疫前比差异有统计学意义(t=43.583,P<0.001;t=52.732,P<0.001),免疫后2年A群、C群抗体GMT与免疫前比差异有统计学意义(t=2.470,P值=0.014;t=7.126,P<0.001)。结论MPV-AC在2~6岁儿童中接种具有良好的免疫原性,在免疫后1个月能达到较好的保护效果,免疫后2年A群、C群抗体下降明显。

人群接种A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗后安全性和免疫原性研究

目的以分组对照法观察A＋C群脑膜炎球菌多糖疫苗对6～24月龄幼儿和5～13岁儿童接种后的安全性和免疫原性。方法观察组共428名儿童，分为2个年龄段接种A＋C群脑膜炎球菌多糖疫苗，接种剂量为每人100μg；阳性对照组103人接种A群脑膜炎球菌多糖疫苗，接种剂量为每人50μg；阴性对照组94人接种伤寒Vi多糖疫苗，接种剂量为每人30μg。各组于接种后6、24、48和72h测量体温并观察全身和局部反应，并于免疫前、后1个月分别收集血清标本，观察组2个年龄段儿童各不少于50名于免疫后6个月和1年再次收集血清标本，免疫前后收集到的血清采用体外杀菌力试验方法进行杀菌抗体水平的测定。结果疫苗接种后人体反应轻微，428名儿童仅有3名（0.7％）出现中、强发热反应，有4名（0.9％）出现局部红晕，48h后反应全部消失。5～13岁儿童组免疫后1个月抗A和C群脑膜炎球菌杀菌抗体4倍增长率分别为96.59％、92．15％，免疫后1年的4倍增长率仍保持在90．91％和90．08％。结论A＋C群脑膜炎球菌多糖疫苗接种后具有较好的安全性和免疫原性。

A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的安全性及免疫原性分析

目的:探讨并分析婴幼儿接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的安全性及免疫原性。方法:选取115名接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的婴幼儿作为研究对象,观察其接种疫苗后的表现,根据其出现全身或局部不良反应的情况评价该疫苗的安全性。在接种疫苗前及接种疫苗后30 d,检测并评价婴幼儿的免疫原性。结果:接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗前,这115名婴幼儿A群流脑抗体的阳性率和C群流脑抗体的阳性率分别为2.61%和6.09%,几何平均滴度(GMT)分别为4.30和4.38。接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗后30 d,这115名婴幼儿A群流脑抗体的阳性率和C群流脑抗体的阳性率分别为95.65%和97.39%,GMT分别为162.27和157.39。这115名婴幼儿接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗后出现的不良反应有发热、腹泻、皮肤斑丘疹、皮肤瘙痒、皮肤水泡疹等,其上述不良反应多较为轻微。结论:为婴幼儿接种A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗具有良好的安全性及免疫原性。

A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗预防接种不良反应病例报告分析

目的:分析A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的安全性,提出预防接种不良反应(AEFI)的防治对策。方法:选取2021年3月-2022年3月成都欧林生物科技股份有限公司出库的414730支A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗接种者为研究对象,分析AEFI发生情况,讨论发生AEFI儿童的年龄、性别、临床表现及联合用药情况。结果:2021年3月-2022年3月成都欧林生物科技股份有限公司共出库A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗414730支,发生AEFI 7例,发生率为0.169/万剂,均发生在2021年。7例AEFI儿童中,以6~11个月月龄儿童最多,共5例,占71.43%;0~2个月、3~5个月儿童各1例,各占14.29%。7例AEFI儿童中,男3例,女4例,性别占比男∶女为1∶1.3。7例AEFI儿童中,发热6例,累计发生率为0.14/万剂;疫苗接种部位肿胀、皮疹各1例,累计发生率均为0.02/万剂。7例AEFI儿童中,单独使用A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗5例,联合其他药品使用2例。7例AEFI儿童中,涉及产品批号S-20200401者4例,累计出库47504支,发生率为0.84/万剂;涉及产品批号S-20200402者2例,累计出库51709支,发生率为0.39/万剂;批号不详1例。结论:A群C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的安全性高,AEFI发生率较低。

b型流感嗜血杆菌奈瑟球菌荚D蛋白作为载体的膜多糖C群脑膜炎-蛋白结合物的免疫效果评价

目的对b型流感嗜血杆菌(Haemophilus influenzae type b,Hib)D蛋白(protein D,PD)作为载体的C群脑膜炎奈瑟球菌荚膜多糖(group C meningococcal polysaccharide,GCMP)-蛋白结合物进行免疫效果评价,以确定PD作为GCMP蛋白载体的可行性。方法采用1-氰基-4-二甲氨基-吡啶四氟硼酸(CDAP)活化法,将重组PD、破伤风类毒素(tetanus toxin,TT)分别与GCMP结合制备结合物;将GCMP及结合物分别经腹部皮下免疫雌性BALB/c小鼠,分为GCMP、GCMP-PD、PD、GCMP-TT、TT及阴性对照(生理盐水)组,每组12只,共免疫3次,分别于每次加强免疫前及末次免疫后7 d,经眼眶采血,分离血清,用于抗体水平检测及血清杀菌力试验(serum bactericidal assay,SBA);同时在末次免疫后7 d取脾脏,进行细胞免疫水平检测。结果蛋白与GCMP结合后能增强抗-GCMP抗体IgG水平,第3次免疫后,与单独GCMP组相比,GCMP-PD和GCMP-TT组小鼠血清抗-GCMP IgG水平均显著升高(F分别为5.294、14.917,P均<0.05),且产生免疫记忆,诱导IgG1产生,但GCMP-PD组低于GCMP-TT组(F=5.828,P<0.05);CMP-PD、PD组小鼠血清抗-PD IgG抗体水平各次免疫后均显著增长,第3次免疫后,GCMP-PD组抗-PD IgG抗体水平显著高于PD组(F=15.426,P<0.01),而GCMP-TT组低于TT组(F=211.207,P<0.001)。SBA结果显示,GCMP-PD组杀菌抗体滴度高于GCMP组(F=11.797,P<0.05),但低于GCMP-TT组(F=8.688,P<0.05)。流式细胞术结果显示,GCMP-PD组Th1、Th2细胞亚群比值与GCMP及GCMP-TT组相比,差异均无统计学意义(F分别为0.073、3.021,P均>0.05)。结论重组PD与GCMP结合后,既能增强多糖疫原性,提高体液免疫反应能力,也能激发细胞免疫反应,同时免疫后血清杀菌效果显著,提示PD具备作为GCMP蛋白载体的可行性。

A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的研制

目的 制备安全有效的Ａ群脑膜炎球菌多糖结合疫苗。方法 通过碳二亚胺（ＥＤＡＣ）将Ａ群脑膜 炎球菌多糖－ＡＨ衍生物与破伤风类毒素（ＴＴ）蛋白共价结合，制备Ａ群脑膜炎球菌多糖结合疫苗。结果 所结合 成的多糖－蛋白结合物，具有Ａ群脑膜炎球菌多糖和破伤风类毒素抗原特异性。单独用多糖免疫小鼠未能诱导出 高水平的血清Ｐｓ抗体，而用结合物免疫小鼠却诱导出高水平的血清Ｐｓ抗体及ＴＴ抗体，并有免疫记忆性。结论 为进一步临床评价该疫苗的人群免疫效果提供了实验基础。

流行性脑脊髓膜炎53例临床及流行病学分析

目的总结合肥市2004年上半年流行性脑脊髓膜炎(下称流脑)疫情动态,流行趋势,为今后流脑防治工作积累经验。方法对53例流脑患者病原学、临床流行病学等进行回顾性分析。结果53例患者中15岁以下38例,占71.7%;在2～4月份发病46例,占86.8%。随机抽取20例患者脑脊液及血清送检查,结果培养阳性14例,占70%,均为脑膜炎双球菌C群菌株。结论2004年上半年合肥市局部流行的流脑,主要病原体为脑膜炎双球菌C群菌株,发病有明显的季节性,且15岁以下儿童易感。因此,今冬明春有必要对易感人群接种A+C群脑膜炎球菌多糖疫苗(简称多糖菌苗)进行预防。

A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗的制备及其稳定性考察

目的 制备安全、有效的A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗。方法 将A群脑膜炎球菌多糖以已二酰肼作为多糖和蛋白之间的连接子与精制破伤风类毒素结合 ,形成A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗原液 ,加保护剂后冻干制成A群脑膜炎球菌多糖结合疫苗 ,检测其生化、生物学特性和安全性 ,并考察制品的稳定性。结果 结合疫苗各项检测结果达到质量控制标准 ,制品放置 2年后仍保持稳定。

A＋C群脑膜炎球菌多糖疫苗安全性和免疫原性的研究

目的 以分组对照法观察A＋C群脑膜炎球菌多糖疫苗对6～24月龄幼儿和5～13岁儿童接种后的安全性和免疫原性。方法 观察组共428名儿童,分为2个年龄段接种A＋C群脑膜炎球菌多糖疫苗,接种剂量为每人100μg;阳性对照组103人接种A群脑膜炎球菌多糖疫苗,接种剂量为每人50μg;阴性对照组94人接种伤寒Vi多糖疫苗,接种剂最为每人30μg;各组于接种后6、24、48和72 h测量体温并观察全身和局部反应,并于免疫前、后1个月分别收集血清标本,观察组2个年龄段儿童各不少于50名于免疫后6个月和1年再次收集血清标本,免疫前后收集到的血清采用体外杀菌力试验方法进行杀菌抗体水平的测定。结果 疫苗接种后人体反应轻微,428名儿童仅有3名（0．7%）出现中、强发热反应,有4名（0．9%）出现局部红晕,48h后反应全部消失。5～13岁儿童组免疫后1个月抗A和C群脑膜炎球菌杀菌抗体4倍增长率分别为96．59%和92．15%,免后1年的4倍增长率仍保持在90．91%和90．08%。结论A＋C群脑膜炎球菌多糖疫苗接种后具有较好的安全性和免疫原性。

A+C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗安全性和免疫原性研究

目的评价A+C群脑膜炎球菌多糖结合疫苗(Groups A and C Meningococcal Polysaccharide ConjugateVaccine,MCV-A/C)的临床安全性和免疫原性。方法按照随机、盲法、对照、单中心的原则,评价MCV-A/C的临床安全性和免疫原性。结果各年龄组MCV-A/C免疫后,A群、C群血清杀菌力抗体(Serum Bactericidal Antibody,SBA)以及A群和C群SBA同时≥4倍增长率均>90%。3～5月龄、6～23月龄、2～15岁、16～30岁四个年龄组免疫后,A群、C群SBA几何平均滴度(Geometric Mean Titer,GMT)均>1:150,达到保护水平以上。各年龄组MCV-A/C和A群脑膜炎球菌多糖疫苗(Meningococcal Polysaccharide Vaccine,MPV)及MPV-A/C免疫后,全身反应及局部反应发生率差异均无统计学意义,未观察到严重的全身和局部反应。结论MCV-A/C在≥3月龄受试者中有良好的安全性和免疫原性。临床试验注册国家食品药品监督管理局《药物临床试验》2006L04776号。

冻干A＋C群脑膜炎球菌结合疫苗安全性和免疫原性观察

目的评价冻干A＋C群脑膜炎球菌结合疫苗（meningococcal conjugate vaccine，MCV）的临床安全性和免疫原性。方法按随机、对照、盲法的原则，评价试验组和对照组疫苗免疫后不良反应发生率、抗体阳转率及抗体几何平均滴度（GMT）。结果免疫后试验组和对照组疫苗全身反应发生率分别为2．5％和6．430A，局部反应发生率分别为0．54%和1．43％。试验组疫苗免疫后A／C群杀菌抗体同时阳转率分别为94．28％、94．81％和90．86％，对照组分别为6．00％、94．84％和95．00％，6～12月龄儿童的试验组与对照组差异有统计学意义。试验疫苗6～12月龄、2～12岁儿童和对照组免疫后A群、C群杀菌抗体GMT差异有统计学意义，16～30岁成人差异无统计学意义。结论冻干A＋C群MCV在≥6月龄人群中具有良好的安全性和免疫原性。